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柯萨奇病毒A组16型感染生物学的研究进展: 2013年; 近年来柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16,CVA16）和肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）在我国引起了手足口病（HFMD）的暴发和流行.CVA16感染的生物学基础研究有助于提高HFMD的防治水平,为HFMD疫苗的研发提供重要依据,此文就CVA16的生物学特性及其与宿主细胞相互作用的研究进展作一综述.; 丁东普晶孙乐; 关键词：柯萨奇病毒肠道病毒属手足口病

人二倍体细胞对不同病毒感染过程的生物学效应比较分析被引量：2: 2016年; 目的分析人二倍体细胞对不同病毒感染的生物学反应差异性及相关分子生物学机制。方法用人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人二倍体细胞,光镜和电镜下观察感染细胞形态学特征;比较两种病毒在人二倍体细胞上的增殖动力学及两种病毒感染后细胞酶谱的变化;采用基因芯片检测两种病毒感染后人二倍体细胞基因反应的差异。结果感染细胞的光镜或电镜的超微结构观察均表现出许多相同的特点,包括细胞变圆、肿胀、折光性增强,以及细胞细微结构的受损,大多数细胞器的破坏等。两种病毒在人二倍体细胞上具有不同滴度峰值的增殖动力学过程;对细胞超氧化物歧化酶的动力学改变趋势有不同影响,但对乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶动力学变化趋势无明显影响;两种病毒感染引起人二倍体细胞出现不同的基因反应,其中与信号转导及与天然免疫反应有关的mRNA转录效率具有一定的差异。结论人二倍体细胞对EV71、HSV-1感染过程表现不同的生物学效应。; 王辉张莹刘龙丁廖芸王建斌胡雅洁王丽春赵婷王艳翠李琦涵; 关键词：二倍体细胞肠道病毒71型单纯疱疹病毒1型酶谱

两株不同表型的CA16毒株(B基因型)的生物学性状比较分析被引量：1: 2012年; CA16病毒作为手足口病主要病原之一,其病原学性状与感染引起的病理过程具有可能的相关意义.对分离自一名重症手足口病(HFMD)患者咽拭子的两株呈现不同蚀斑形态的CA16毒株所做的生物学分析表明,它们在增殖动力学、免疫原性等生物学性状上的差异与其对乳鼠致病能力的差异具有相关性,而这些共同的差异与病毒基因非编码区5′端序列及结构区的VP1区域中的序列之间存在着可能的对应关系,所有这些结果提示了CA16病毒生物学及遗传学性状与其致病能力的相关性.; 杨二霞赵恒张莹刘建生廖芸王丽春崔萍芳杨丽仙刘龙丁董承红董少忠邵聪文姜莉孙乐李琦涵; 关键词：增殖动力学免疫原性

EV71可感染幼龄中缅树鼩被引量：27: 2012年; 树鼩是灵长类动物的近亲,且具有体型小、繁殖周期短、饲养管理成本低等优点,长期以来被认为有望替代灵长类动物用于人类疾病的动物模型研究。该文研究了肠道病毒EV71对幼年中缅树鼩的感染特点,探索建立EV71感染树鼩动物模型及替代灵长类动物的可行性。实验分别采用灌胃、滴鼻和尾静脉注射3种方式,感染3月龄树鼩,定期观察动物临床症状和血常规变化和定期采集血液和粪便样品,并使用中和抗体试验、reverse transcription-PCR(RT-PCR)和Real-TimePCR等技术,检测相关样品中和抗体效价、病毒核酸及载量变化。结合组织病理学检查,分析感染病变特点。研究结果发现,实验组树鼩体温在第4天前后开始升高,白细胞、淋巴细胞也有类似趋势;3种攻毒方式均可检测到病毒载量,峰值出现在第10天前后,灌胃途径尤为明显,血清的最大中和抗体效价为1:16。感染EV71病毒的树鼩2周左右出现急性松弛性瘫痪,大体解剖发现伴有尿潴留症状,组织病理学检查发现在脑、肺、肠、脾脏、肾脏等部位发生病变。结果表明,EV71病毒通过灌胃、滴鼻和静脉注射3种方式均可以感染中缅树鼩,并使之出现神经系统及相关病变,该实验为将来研究EV71感染树鼩致病机理、建立手足口病树鼩动物模型奠定了理论基础。; 王文广黄晓燕徐娟孙晓梅代解杰李琦涵; 关键词：手足口病 EV71 中缅树鼩动物模型

RNAi技术对EV71病毒感染恒河猴星状胶质细胞所需细胞磷酸酶谱的分析被引量：1: 2013年; 肠道病毒71型(EV71))已被证明是引起近年来亚洲-太平洋地区频发的手足口病重症并导致患者死亡的最主要病原体.但是,其是如何感染神经系统并导致严重神经系统病理损伤的分子机制尚不明确.在前期针对EV71感染星状胶质细胞的研究工作基础上,本研究利用针对恒河猴细胞内磷酸化/去磷酸化系统的共212个磷酸酶基因的siRNA库,分别下调了分离自恒河猴大脑并经纯化培养的星状胶质细胞内相应的磷酸酶的表达,并在此背景条件下比较了EV71在该细胞中的增殖特征,并对若干可以通过其表达水平及其活性的变化而直接影响EV71增殖的磷酸酶做了进一步分析.结果表明,恒河猴星状胶质细胞中若干与调控信号通路相关的酪氨酸磷酸酶和丝/苏氨酸磷酸酶对EV71的增殖具有调控作用,而病毒亦可能通过与这些磷酸酶的相互作用对所感染的星状胶质细胞的免疫反应性产生相应的影响.; 郭素杰马娜岳磊张莹刘龙丁王晶晶廖芸赵红玲纳锐雄李昭李琦涵; 关键词：小干扰RNA 星状胶质细胞磷酸酶

A comparative study of the characteristics of two Coxsackie A virus type 16 strains (genotype B)被引量：5: 2012年; Coxsackie A virus is one of the major pathogens associated with hand, foot and mouth disease (HFMD). The etiological characteristics of Coxsackie A virus type 16 (CA16) are thought to correlate with the pathological process of its infection. Two CA16 strains that were isolated from a severe HFMD patient presented with different plaque forms. This observation, along with biological analysis, indicated that the differences in the strains' biological characteristics, such as proliferation kinetics and immunogenicity, correlate with differences in their pathogenicity toward neonatal mice. Furthermore, these differences are thought to be associated with the sequence of the 5′ non-coding region of the viral genome and the VP1 structural region sequence. The results suggest that the biological and genetic characteristics of the CA16 viral strains are relevant to their pathogenicity.; YANG ErXiaZHAO HengZHANG YingLIU JianShengLIAO YunWANG LiChunCUI PingFangYANG LiXianLIU LongDingDONG ChengHongDONG ShaoZhongSHAO CongWenJIANG LiSUN LeLI QiHan; 关键词：PATHOGENICITY

肠道病毒71型灭活疫苗的规模化制备和免疫原性研究被引量：8: 2012年; 目的规模化制备3批肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞),研究其免疫原性。方法在人二倍体细胞上适应的EV71毒株经灭活、纯化后,制备成为EV71灭活疫苗成品。采用0、4周2针程序,皮下注射免疫恒河猴,于第2次免疫后2、4～72周取外周静脉血分离血清进行中和抗体测定,同时于第2次免疫后8周时取外周静脉血采用γ干扰素酶联免疫斑点(IFN-γELIspot)方法检测细胞免疫应答。通过EV71毒株颅内注射乳鼠的研究方法,获得乳鼠攻毒的半数致死量(LD50),按5倍LD50对疫苗免疫母鼠所生的乳鼠攻毒,评价疫苗的动物保护效果。结果 EV71灭活疫苗免疫恒河猴后,2针免疫后2周即可诱导中和抗体的产生,其抗体水平可达到1∶32,在2针免疫后72周时中和抗体水平仍能维持在1∶16～1∶32;于2针免疫后第8周取血,疫苗组诱导产生IFN-γ斑点数[250斑点形成细胞(SFC)/1×106外周血单核细胞(PBMCs)]显著高于接种生理盐水的对照组(16SFC/1×106 PBMCs),P<0.01。EV71疫苗对小鼠—乳鼠免疫的保护性研究结果表明,接种EV71疫苗后,在5倍LD50攻毒情况下,对乳鼠的保护率达到100%。结论规模化生产制备以人二倍体细胞作为细胞基质的EV71疫苗,具有较好的免疫原性。; 梁燕赵红玲刘龙丁廖芸董承红纳锐雄张莹王晶晶王丽春李琦涵; 关键词：免疫原性

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国家自然科学基金(81171573)

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