国家自然科学基金(30671888)
- 作品数:9 被引量:41H指数:4
- 相关作者:杨恬李玉红杨力连小华陈伟更多>>
- 相关机构:第三军医大学重庆大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大鼠毛囊干细胞的纯化培养鉴定及其生物学特性被引量:8
- 2008年
- 目的采用免疫磁珠法(vario magnetic activated cell sorting,Vario MACS)分离纯化培养大鼠CD34+毛囊干细胞,并研究其生物学特性。方法显微分离获得毛囊bulge区,消化成单细胞悬液并进行CD34抗体标记和磁珠标记,使细胞悬液通过分选柱,分别收集CD34+细胞和CD34-细胞,检测细胞活性后进行细胞培养并绘制细胞生长曲线。扫描电镜观察毛囊干细胞表面形态,透射电镜观察干细胞内部结构形态。免疫细胞化学检测培养细胞中β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达。结果用VarioMACS法有效分离并成功培养CD34+毛囊干细胞,分选后的细胞仍具有较好的活性,细胞生长曲线表明,CD34+毛囊干细胞增殖速度快,增殖期长,而CD34-细胞则较快进入平台期。培养的CD34+细胞中干细胞标记物β1-整联蛋白、CD34和α6-整联蛋白的表达均强于CD34-细胞。获得电镜观察毛囊干细胞表面形态学特征及内部结构特征资料。结论VarioMACS法能有效分离获得的CD34+毛囊干细胞,该细胞具有良好的生物学性能。
- 黄恩毅杨恬陈伟杨力
- 关键词:免疫磁珠CD34毛囊干细胞
- 淋巴增强因子-1在大鼠触须毛囊生长周期中的表达被引量:3
- 2008年
- 目的研究淋巴增强因子(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)在大鼠触须毛囊生长周期中表达及其重要作用。方法选取处于毛发周期各阶段的触须毛囊,采用免疫组织化学的方法检测LEF-1在各时期毛囊中的表达及变化。结果生长期,LEF-1主要表达于毛囊的毛母质和外根鞘的细胞核内,随着生长的推进,核表达逐渐转化为细胞质表达;退化期,LEF-1表达明显减弱,毛母质中弱表达,外根鞘内表达消失;静止期,LEF-1重新出现在bulge区的外侧,在内根鞘中的表达明显增强。结论LEF-1参与毛干和内根鞘的分化,并且在毛囊周期的维持中起到重要的作用。
- 施春英张艺陈伟郭燕燕杨恬杨力
- 关键词:毛发周期
- 角膜缘基质诱导毛囊干细胞角膜上皮样转分化的研究被引量:5
- 2008年
- 目的体外诱导培养毛囊干细胞角膜上皮样分化。方法体外分离培养毛囊干细胞,然后用角膜缘基质组织匀浆液对其进行诱导培养,并用免疫细胞化学(ICC)法检测诱导前后α6-integrin、CD34、K12的变化;RT-PCR方法检测细胞诱导前后K12的mRNA表达情况;流式细胞分析(FCM)检测毛囊干细胞角膜上皮样分化的阳性率。结果体外培养的毛囊干细胞保持高增殖的状态,α6-integrin、CD34于细胞质表达。经过10d的诱导培养,可见K12于细胞质阳性表达;RT-PCR结果显示毛囊干细胞经诱导后K12的mRNA明显表达;FCM结果亦显示毛囊干细胞经诱导培养后有较高比率的K12阳性细胞。结论毛囊干细胞经角膜缘组织匀浆液体外诱导可成功地分化为角膜上皮样细胞。
- 姜自玲杨力连小华杨恬杨柯
- 关键词:毛囊干细胞角膜上皮细胞转分化
- β-catenin在毛囊干细胞中转位表达与细胞增殖的关系被引量:6
- 2008年
- 目的:观察β-catenin在毛囊干细胞中的分布表达变化,探讨其与细胞增殖的关系。方法:体外分离培养毛囊干细胞,绘制细胞生长曲线,采用ICC方法观察β-catenin在不同培养时相毛囊干细胞中的定位表达变化。结果:培养2d便可见细胞生长,6d时细胞数达到最高峰;培养前3d β-catenin表达于胞浆及胞膜,第5—6天出现核内表达,伴有ki67核内表达;继续培养,β-catenin集中在胞核表达,胞浆呈弱表达,并表现与细胞增殖的相关性。结论:β-catenin核内转位是毛囊干细胞增殖的重要信号调节机制。
- 张艺施春英杨恬
- 关键词:毛囊Β-CATENIN干细胞细胞增殖
- 整合素β1在大鼠毛囊中的表达稳定性研究
- 2007年
- 目的探讨整合素β1(β1 integrin)在大鼠背皮毛囊发育及生长周期中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学技术检测β1 integrin在胚胎E17.5、E18.5、E19、E20和出生后1、7、29d的表达。结果在E17.5、E18.5、E19、E20β1 integrin在发育毛囊中未见表达,在胚胎前期即E17.5、E18.5时表皮呈阳性表达,到E19、E20转为阴性。出生后1、7dβ1integrin在毛囊外根鞘中下段接近毛球部呈阳性表达,29d在皮脂腺细胞呈阳性表达。结论β1 integrin在大鼠毛囊生长期作为毛囊干细胞标记物比较好,并且它对毛囊干细胞维持自身的稳定性有重要作用。
- 郭燕燕杨恬杨力陈伟施春英连小华
- 关键词:毛囊发育干细胞标记物毛囊周期
- Wnt10b在小鼠毛囊周期中的表达被引量:11
- 2009年
- 目的初步探讨Wnt10b在小鼠毛囊生长周期中的表达变化规律及其意义。方法首先用RT-PCR检测Wnt10b在小鼠皮肤中的表达情况,然后以免疫组化检测Wnt10b在毛囊生长周期各阶段的表达定位及变化,同时检测了核增殖抗原Ki67在毛母质中的表达情况。结果Wnt10b在生后第1周期生长期皮肤的mRNA表达量显著高于退化期和静止期(P<0.01),生长中期达到峰值,退化期和静止期呈低表达;第2周期生长早期表达量略高于退化期和静止期。Wnt10b蛋白特异性表达于生长期毛囊的毛母质(Matrix)部位;退化期和静止期在整个毛囊都不表达;第2周期生长早期主要表达于毛囊次级毛芽。Ki67在毛母质中的表达变化情况与Wnt10b具有一致性。结论Wnt10b的表达具有严格的时空特异性,生后第1周期特异性表达于生长期毛囊的毛母质细胞,第2周期生长早期表达于毛母质细胞的祖细胞次级毛芽,提示Wnt10b可能对毛母质细胞增殖起作用,进而调控毛囊的生长并维持毛囊周期。
- 张坤连小华李玉红杨珂徐伟星懿展杨恬
- 关键词:毛囊周期增殖
- 糖蛋白激素受体Lgr5的功能被引量:3
- 2009年
- 糖蛋白激素受体Lgr5是一种G-蛋白偶联受体超家族的成员,与促甲状腺激素受体、黄体激素受体和卵泡刺激素受体同源。Lgr5多肽链的结构特点为外功能区有17个富含亮氨酸的重复序列,N-端和C-端尾部侧翼富含半胱氨酸序列以及高度保守的7次α螺旋跨膜区。目前尚未发现其生理性配体,故又被称为孤儿受体。Lgr5在人体内分布广泛,大脑、脊髓、乳腺、毛囊、眼睛、生殖器官及胃肠道等都有表达。最近有研究表明Lgr5与干细胞的鉴定和肿瘤的发生密切相关。
- 倪振洪张黎李玉红
- 关键词:LGR5WNT信号通路干细胞标记物肿瘤
- 毛囊干细胞标记物的研究进展被引量:4
- 2010年
- 毛囊干细胞是一类位于毛囊隆突区的成体干细胞,对毛囊的周期性生长,表皮和皮脂腺的更新以及皮肤损伤后修复有着至关重要的作用。毛囊干细胞的标记物是对毛囊干细胞进行分离和鉴定的重要依据,对毛囊干细胞的基础研究起着关键作用。因此寻找特异性较高的毛囊干细胞标记物成为了近年的研究热点。本文按毛囊干细胞标记物在细胞中所处部位进行分类,将其分为位于细胞膜、细胞质、细胞核的标记物,综述了目前国内外主要采用的整合素、角蛋白、CD34、CD200等标记物以及新发现的Lgr5、Sox9、Tcf3等基因标记物。
- 倪振洪邵勇李玉红
- 关键词:毛囊干细胞标记物
- 毛母质细胞研究进展被引量:3
- 2010年
- 李阳李玉红杨恬
- 关键词:毛囊周期信号通路体外培养