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人脐带间充质干细胞的安全性评价被引量：4: 2022年; 干细胞治疗作为某些难治性疾病的新型治疗手段,在组织修复、自身免疫疾病和退行性疾病治疗中具有重要的临床价值。本研究以裸鼠为动物模型,通过裸鼠皮下成瘤、克隆形成和端粒酶活性等试验,评估人脐带间充质干细胞的安全性,为干细胞用于临床治疗的安全性提供参考。裸鼠成瘤性试验结果显示,阴性对照组和试验组成瘤数均为0,阳性对照组成瘤数为12。克隆形成试验结果显示,阴性对照组和试验组无克隆形成,阳性对照组有克隆形成。端粒酶活性测定结果显示,阴性对照组端粒酶相对活性为0.01,阳性对照组端粒酶相对活性为4.33,试验组P6代细胞端粒酶相对活性为1.70。因此,本研究的评估结果显示,人脐带间充质干细胞在裸鼠中不致瘤,克隆形成试验结果为阴性,端粒酶活性测定结果正常,具有良好的遗传稳定性。人脐带间充质干细胞在本试验中展现了良好的安全性,具有较好的临床应用价值。; 冯波黎啸峰彭海宁杨满君丁浩徐叶刘如石; 关键词：脐带间充质干细胞端粒安全性

戊型肝炎病毒研究新进展被引量：5: 2011年; 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)是引起全球多地区大规模流行和散发病例的急性病毒性肝炎的病原体,发展中国家尤为突出;我国是戊型肝炎(hepatitis E,HE)流行的高发区.HE是一种人畜共患病,猪是人HEV病毒的主要储库,因而HE已成为一个全球性的的公共卫生问题.对HEV的病毒学和基因组特征、临床表征、流行病学、主要抗原表位以及HEV诊断试剂和疫苗研制的进展进行了综述.; 吴俊文刘胜姿李烨许凤吴莎莎邱义兰刘如石; 关键词：戊型肝炎病毒人畜共患病流行病学诊断试剂疫苗

一株高效稻草纤维素降解真菌的筛选与鉴定被引量：4: 2011年; 采用刚果红羧甲基纤维素钠培养基法、滤纸条降解法和胞外酶活性测定法从长白山原始森林的腐烂枯木和落叶腐质土中筛选一株高产纤维素酶的真菌,结合菌落形态学和分子生物学方法鉴定该菌株为产黄青霉,命名为CBS-1.滤纸崩解实验说明在24 h该菌对滤纸就具有明显的崩解能力,6 d后滤纸的失重率达到24.1%;以稻草粉为底物发酵120 h后,其胞外纤维素酶活性达到33.6 mkat/L,其活性高于已经报道的菌株,是一株具有研究开发潜力的纤维素酶生产菌株.; 熊格生刘志吴莎莎卢向阳刘如石; 关键词：水稻秸秆纤维素酶降解微生物

丙二醛通过激活p38和JNK通路抑制间充质干细胞成骨分化被引量：2: 2012年; 为了探索丙二醛(malonaldehyde,MDA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的作用机制,用不同浓度的丙二醛孵育MSCs,进行成骨诱导培养,检测碱性磷酸酶活性和钙结节形成;并检测p38和JNK表达水平和磷酸化程度,用这两种信号分子的特异性阻断剂进行验证.结果发现,丙二醛浓度依赖性地降低MSCs碱性磷酸酶的活性,抑制钙结节的形成;并引起p38和JNK的表达上调和磷酸化增强,诱导JNK由胞浆向胞核转位;p38和JNK阻断剂对丙二醛的上述效应有拮抗作用.结果表明,丙二醛可抑制MSCs的成骨诱导分化,其作用机制涉及p38和JNK信号通路的参与.; 李烨刘文锋刘如石印大中; 关键词：丙二醛间充质干细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路成骨分化

戊型肝炎病毒IV型衣壳蛋白缺失突变体原核表达与性质: 2014年; 采用PCR技术扩增基因IV型HEV(Hepatitis E Virus,HEV)开放阅读框2(Open Reading Frame 2,ORF2)的缺失突变体(aa384-606),亚克隆到表达载体后,转化到大肠杆菌中进行诱导表达,表达蛋白命名为rP24。SDS-PAGE和免疫印迹实验表明,rP24获得了高效表达,且和单克隆抗体15B2具有强的反应活性。rP24经过包涵体洗涤、溶解复性、离子交换层析和分子筛层析纯化后,免疫印迹实验表明,纯化rP24能与抗HEV ORF2中和单克隆抗体8C11以及HE(Hepatitis E,HE)阳性血清发生很强的免疫反应性,说明rP24上具有构象型中和表位,模拟了HEV衣壳蛋白的空间结构。动态光散色测量结果表明,rP24的平均水化半径为7.48 nm;纯化rP24免疫动物实验表明,rP24具有强的抗原性,小鼠阳转周期短,抗体持续时间长;纯化rP24作为包被抗原检测HE阳性血清和阴性血清,结果显示rP24对HE阳性血清和阴性血清检出率与北京万泰公司的抗HEV-IgG检测试剂盒的检出率一致。这些实验结果说明,具有较好免疫反应性和免疫原性的rP24获得了高效表达,该蛋白模拟了天然病毒衣壳蛋白的中和表位,为进一步研究基因I型和基因IV型HEV感染不同宿主细胞差异的分子机制奠定了基础。; 邱义兰吴俊文邱果李桑李烨刘胜姿刘如石; 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白原核表达免疫反应性免疫原性

UFC1基因在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达被引量：6: 2011年; 为探讨泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)基因在乳腺癌组织及相对应的癌旁正常乳腺组织中的表达,以及与临床病理特征之间的关系,分别应用RT-PCR法、Western-blot法、免疫组织化学检测20例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其对应的癌旁正常乳腺组织中UFC1基因的表达水平,并进行比较,同时分析UFC1蛋白表达与临床病理特征之间的关系.在mRNA水平上检测,乳腺癌组织中UFC1基因的表达率明显高于其对应的正常乳腺组织,差异显著(P<0.05);在蛋白质水平上检测,乳腺癌组织中UFC1蛋白表达明显增强,是正常乳腺组织表达量的3.15倍,其免疫组织化学所检测的结果也是如此.实验结果表明乳腺癌组织中UFC1基因的表达明显高于正常乳腺组织,其表达量的不同,提示UFC1基因与乳腺癌的发生和发展有着密切关系.; 贺爱兰张波刘如石; 关键词：乳腺癌 RT-PCR WESTERN-BLOT 免疫组织化学

分子生物学课程中的双语教学实践被引量：9: 2011年; 本文从分子生物学课程实施双语教学的必要性入手,对双语教学实施过程中影响教学效果的师资要求、教材的选用、教学方法和手段等方面进行了分析,列举了双语教学过程中出现的一些问题并提出了应对策略。; 贺爱兰陈跃进刘如石; 关键词：双语教学分子生物学

抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体的制备及性质研究被引量：1: 2014年; 人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种机会性感染疱疹病毒,在人群中感染比较常见,但在免疫缺陷个体与新生儿中可引起严重的疾病。HCMV Pp65是HCMV活动感染的主要标志,也是临床检验检测HCMV感染的重要靶标。为研发抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体作为临床免疫检测HCMV感染的关键原料,本研究采用重组表达的HCMV Pp65蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠淋巴结细胞与sp2/0细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性克隆与效价测定,再用Western blotting进行抗体特异性鉴定,最后用免疫捕获PCR和免疫荧光法评价其应用前景。最终获得了1株能稳定分泌高效价的抗HCMV Pp65单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8D6。Western blotting及间接ELISA检测其效价分别达1∶4 000和1∶105;细胞免疫荧光与免疫捕获PCR实验结果说明,该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有良好的亲和力和特异性,具有作为外周血细胞免疫荧光细胞化学和免疫捕获PCR检测HCMV临床感染的关键原料,也可作为双抗体夹心法检测HCMV临床感染的关键原料,为建立HCMV感染快速灵敏的临床诊断试剂打下了重要的基础。; 邱果许凤邱义兰廖旻晶李烨刘胜姿李桑刘如石; 关键词：人巨细胞病毒 PP65蛋白杂交瘤细胞单克隆抗体

基于荧光素酶的抗巨细胞病毒体外药物筛选模型的建立及应用被引量：1: 2021年; 人巨细胞病毒(HCMV)感染是常见的病毒性疾病,目前无有效的疫苗,故抗病毒药物筛选对HCMV的治疗具有重要意义。为了构建一种抗巨细胞病毒体外药物快速筛选模型,本研究以带有荧光素酶标签的鼠巨细胞病毒细菌人工染色体(Luc-MCMV-BAC)为基础,将其转染至小鼠成纤维细胞NIH-3T3,成功获得重组病毒Luc-MCMV,且其能够在细胞中稳定发光。噬斑法测定的病毒生长曲线显示,Luc-MCMV与野生型病毒Wt-MCMV具有相似的生长动力学,说明Luc-MCMV能够反映Wt-MCMV的生长状况,可用于后续抗病毒药物的筛选评价。进一步选用更昔洛韦(Ganciclovir)作为阳性对照药物,应用该体系对6种中药单体进行了筛选,结果显示黄芩素和黄芪甲苷具有抗MCMV活性,为抗HCMV药物的筛选奠定了前期基础。; 周丹云吴俊文蒋情王庆林刘如石全梅芳; 关键词：巨细胞病毒重组病毒荧光素酶

不同日粮饲养黄牛的胃部微生物群落多样性比较分析被引量：2: 2016年; 为分析不同饲料喂养对黄牛胃中微生物群落结构的影响,分别用芒草单一喂养和农家混合饲料喂养两年的黄牛为实验组和对照组。以瘤胃、蜂巢胃、重瓣胃和皱胃四个胃中的微生物为研究对象,采用原位包埋裂解法和脉冲场电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）提取微生物总DNA,脉冲场电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）。使用细菌16S rRNA引物341F/534R及真菌18S rD NA引物NS1/GCFungi进行降落PCR扩增。变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE）对扩增产物进行区分,使用硝酸银染色。电泳扫描结果通过Quantity one软件进行分析,SPSS软件进行数据统计。针对实验组和对照组瘤胃样品共性条带和特性条带测序并比对。结果表明：实验组与对照组细菌群落结构变化较大,UPGAM聚类图上被分为两支,相似性只有0.35。且香农多样性指数及条带丰度都明显少于对照组。真菌DGGE图谱条带差别不大,聚类图上显示实验组四个样品与对照组四个样品相似性在0.43-0.68之间。多样性及条带丰度在实验组与对照组之间差异0.0027-0.5999。测序结果,细菌与数据库中未培养细菌种类较为接近,而真菌中部分与已知菌种接近。芒草单一饲养对牛胃中的微生物群落结构具有极大的影响,对细菌的影响尤为明显。; 吴莎莎; 关键词：微生物群落结构 PCR-DGGE PFGE RRNA

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