安徽省高校省级自然科学研究项目(ZD200907)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：张志强于德新黄韵陈磊江山更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院合肥微尺度物质科学国家实验室安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 槲皮素对人肾癌细胞株细胞增殖、侵袭及其VEGF表达的影响被引量：9
- 2012年
- 目的研究槲皮素对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、侵袭力的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养ACHN细胞,加入不同浓度的槲皮素进行处理后,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率,采用涂有Matrigel胶的Tr-answell小室模型对传代培养的ACHN细胞进行体外侵袭检测,以Western blot法检测ACHN细胞内血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果不同浓度的槲皮素均能抑制ACHN细胞的增殖,并有明显的浓度和时间依赖性(P<0.05);Tr-answell试验结果显示,与空白对照组比较,槲皮素处理组肾癌细胞侵袭能力明显下降;槲皮素处理组VEGF蛋白表达水平均明显低于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论槲皮素可明显抑制ACHN细胞的增殖、侵袭力,其机制可能与下调VEGF表达有关。
- 范宗荣张志强于德新黄韵方卫华江山施浩强廖贵益
- 关键词：肾细胞癌槲皮素增殖血管内皮生长因子
- siRNA沉默VEGF基因对肾癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨siRNA干扰血管内皮生长因子(VEGF)基因对人肾细胞癌细胞株(ACHN)细胞增殖与凋亡的影响。方法:化学合成针对VEGF的小干扰RNA,通过脂质体转染至ACHN中,利用Western印迹法检测细胞内VEGF的表达,采用台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率(IR),用TUNEL方法检测细胞凋亡率(AR)。结果:生长曲线提示,与空白对照组及阴性对照组相比,siRNA1组、siRNA2组ACHN细胞的生长明显减慢;在24 h、48 h、72 h,siRNA1的增殖抑制率为10.6%、18.0%、27.1%,siRNA2增殖抑制率为18.9%、32.7%、40.3%,均高于空白对照组及阴性对照组(P<0.05);siRNA1组的细胞凋亡率为10.7%、15.2%、20.3%,siRNA2组的细胞凋亡率为17.3%、26.2%、37.4%,均高于空白对照组及阴性对照组(P<0.05);siRNA1组、siRNA2组VEGF蛋白表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组,其中siRNA2对ACHN细胞的IR、AR和VEGF蛋白表达的抑制作用均显著高于siRNA1组(P<0.05)。结论:VEGF在肾癌的发生发展中起着重要作用,化学合成的VEGF-siRNA能特异性抑制肾细胞癌ACHN细胞株中VEGF的表达,抑制细胞生长增殖,促进细胞凋亡。对于VEGF基因高表达的肾细胞癌患者,针对VEGF的RNAi技术有望成为肾细胞癌新的基因治疗手段。
- 张志强于德新黄韵方卫华江山施浩强廖贵益陈磊
- 关键词：肾癌小干扰RNA血管内皮生长因子
- Eg5基因对膀胱癌T24细胞增殖和迁移的影响被引量：1
- 2014年
- 目的通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对T24细胞增殖和迁移的影响。方法 T24细胞株分为3组:干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,通过脂质体转染至T24细胞中,应用Western blot法检测转染后T24细胞中Eg5蛋白表达,采用台盼蓝拒染实验检测细胞死亡率,用噻唑蓝(MTT)比色分析法和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制率,通过细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果干扰组Eg5蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组;干扰组细胞死亡率显著升高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干扰组的克隆形成率下降,与空白对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);MTT结果提示,干扰Eg5基因表达后,T24细胞的增殖率明显下降(P<0.05);划痕实验结果显示干扰组细胞迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。结论 Eg5基因在膀胱移行细胞癌起重要作用,干扰Eg5基因能有效抑制T24细胞的增殖与迁移,促进细胞死亡,以Eg5为靶点有望成为膀胱癌基因治疗的新基因靶点。
- 陈杰勋于德新张志强王铮谢栋栋王毅张涛陈磊丁德茂邹慈闵捷褚晗
- 关键词：RNA干扰膀胱癌
- siRNA对VEGF蛋白表达的影响及对裸鼠移植肾癌的抑制作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨siRNA沉默血管内皮生长因子(VEGF)基因对人肾癌裸鼠移植瘤VEGF蛋白的表达水平及生长抑制作用的影响。方法化学合成针对VEGF的siRNA序列,通过脂质体将VEGF-siRNA转染到ACHN细胞中,将转染VEGF-siRNA的ACHN细胞(A组)、转染空质粒的ACHN细胞(B组)及未转染的ACHN细胞(C组)分别接种于裸鼠背部皮下。在SPF环境中饲养裸鼠并观察各组裸鼠移植瘤的生长情况,每隔5d测定移植瘤体积大小(肿瘤的长轴L,短轴W,肿瘤体积V=1/2LW2),绘制肿瘤生长曲线,采用免疫组化及Western blot法测定裸鼠移植瘤组织切片中VEGF蛋白的表达水平。结果 A组小鼠移植瘤成瘤及生长明显缓慢,移植瘤的体积和质量均低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05);移植瘤组织切片免疫组化及Western blot法检测结果提示:与B、C组相比,A组中VEGF蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);而B、C组间瘤体的体积重量及VEGF蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF在肾癌的发生、发展中起着重要作用,化学合成的VEGF-siRNA可特异性抑制肾癌细胞中VEGF的表达,抑制肿瘤的生长增殖。
- 余学江于德新黄韵段涛张志强
- 关键词：小干扰RNA裸鼠移植瘤肾癌
- 小干扰RNA沉默血管内皮生长因子对ACHN肾癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默血管内皮生长因子（VEGF）对ACHN肾细胞癌细胞生物学行为的影响。方法化学合成针对VEGF的小干扰RNA，实验分4组，转染后收集细胞，通过蛋白印迹方法检测VEGF的表达，噻唑蓝（MTY）比色法、细胞黏附实验、划痕实验及Transwell法测定细胞的增殖、黏附、迁移及侵袭能力。结果siRNA1～2组VEGF表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组；在24、48、72h，siRNA1—2的增殖抑制率均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0．05），其中以siRNA2组最为显著；与空白对照组比较，siRNA1—2组的细胞黏附数量明显下降[（81．5±3．1）％比（40．54-2．6）％、P〈0．05，（81．5±3．1）％比（22．5±2．4）％、P〈0．05]，其中以siRNA2组最为明显；siRNA1～2组的细胞迁移数量明显下降（162±9比81±5，P〈0．05；162-1-9比38±4，P〈0．05）；siRNA1—2组细胞侵袭能力明显下降（P〈0．05），且siRNA2组的细胞侵袭能力明显低于siRNA1组（P〈0．05）。结论VEGF基因在肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭中发挥着重要作用；以靶向VEGF的siRNA转染肾细胞癌细胞，可抑制肾细胞癌细胞黏附、迁移和侵袭能力。
- 张志强于德新黄韵方卫华江山施浩强廖贵益陈磊
- 关键词：肾细胞癌血管内皮生长因子
- siRNA沉默肾癌细胞EGFR基因对放疗敏感性影响的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨siRNA沉默ACHN肾癌细胞的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对放疗敏感性的影响。方法:免疫组化及细胞免疫荧光技术证明组织水平及细胞水平EGFR的表达,化学合成针对EGFR的小干扰RNA,通过脂质体转染法转染进ACHN肾癌细胞中,利用Western blot技术检测细胞中EGFR蛋白的表达,然后分别用0、2、4、6、8Gy剂量的X线对5组肾癌细胞(每组包含空白对照组、非异性RNA干扰组、特异性RNA干扰组)进行照射,光学显微镜下观察细胞凋亡情况,采用台盼蓝据染法检测细胞凋亡率。结果:靶向EGFR序列的特异性干扰RNA可明显抑制EGFR蛋白的表达,光学显微镜下观察到RNAi联合放疗组细胞死亡情况明显,台盼蓝拒染法检测特异性干扰EGFR基因组可显著提高ACHN肾癌细胞对放疗的敏感性(P<0.05)。结论:体外研究表明,siRNA沉默ACHN肾癌细胞的EGFR可明显提高肾癌细胞对放疗的敏感性,为肾癌放射治疗提供了新思路。
- 褚晗于德新张志强黄韵谢栋栋王毅张涛陈磊丁德茂邹慈闵捷王大明
- 关键词：肾癌RNAI放疗
