四川省教育厅青年基金(2006B112)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖被引量：1
- 2008年
- 目的研究一种快速准确的分析壳寡糖组成的定性测定方法。方法通过连续电泳和不连续电泳对比实验确定壳寡糖的最佳分析条件。结果浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度为17.5%,上样量为10μl,恒定电流为40mA,电泳时间50min条件下,获得最佳壳寡糖分析图谱。结论SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析壳寡糖组成的方法的确是一种简单快速有效地定性检测方法。
- 王亮吴昌英刘桦张涛
- 关键词：壳寡糖电泳分析聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 酶法制备壳寡糖及其生物学功能被引量：5
- 2010年
- 用正交试验方法考察温度、酶浓度、pH对蜗牛酶降解壳聚糖的影响,筛选蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件,采用SDS-PAGE方法分析降解产物,制备具有生物学功能的壳寡糖。用不同浓度的壳寡糖处理人肝癌HepG2细胞,观察细胞形态学变化,MTT法检测壳寡糖对其增殖的影响,琼脂糖凝胶电泳检测DNA变化,流式细胞术检测凋亡率（AR）。结果表明：蜗牛酶降解壳聚糖的产物主要是聚合度为4以上的寡糖,更多的接近壳六糖。最佳反应条件为pH 4.0、温度40℃、酶和底物质量比为4∶50;壳寡糖质量浓度在2~4 mg/mL时,对HepG2细胞增殖有抑制效应,细胞经壳寡糖处理48 h后,开始空泡化,DNA出现明显的凋亡条带,AR明显高于对照组。在最佳反应条件下蜗牛酶能较好地降解壳聚糖,制备的壳寡糖在一定浓度范围内能通过诱导HepG2细胞发生凋亡而抑制其增殖,其作用呈浓度依赖性。
- 王亮杨雨晗吴东明张涛
- 关键词：壳寡糖凋亡蜗牛酶
- 蜗牛酶降解壳聚糖制备壳寡糖的研究被引量：7
- 2010年
- 目的研究筛选蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件。方法采用正交试验法,以降解产物中寡糖的量和糖收率为指标,考察温度、酶浓度、pH对蜗牛酶降解壳聚糖的影响,筛选最佳反应条件;采用SDS-PAGE检测降解产物,用改良Schales法测定还原糖的含量并计算寡糖的收率。结果蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件为:pH4、40℃、酶底比为8:100。最佳条件下的寡糖收率为64.74%,产物主要是聚合度为4以上的寡糖。结论在最佳反应条件下,蜗牛酶能较好地降解壳聚糖。
- 张涛吴昌英张永模王亮
- 关键词：蜗牛酶壳聚糖壳寡糖正交实验
