国家教育部博士点基金(20030712017)
- 作品数：8 被引量：79H指数：4
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- 相关机构：西北农林科技大学临沂市动植物园临沂大学更多>>
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- SW-BSA偶联率对小鼠免疫原性的影响被引量：8
- 2009年
- 【目的】探讨合成苦马豆素人工抗原(SW-BSA)的不同偶联率对小鼠免疫原性的影响,筛选合成SW-BSA的最佳偶联率。【方法】苦马豆素(Swainsonine,SW)和载体牛血清白蛋白(BSA)分别以20∶1,30∶1,40∶1和50∶1的比例化学合成4种SW-BSA(分别为AgA、AgB、AgC和AgD),用紫外分光光度法分别测定SW与BSA的偶联率;分别用AgA、AgB、AgC和AgD免疫小鼠,免疫3次后,间接ELISA试验检测血清效价。【结果】合成的4种SW-BSA的偶联率分别为14.7,20.2,25.3和32.6;AgA、AgB、AgC和AgD各组免疫小鼠的血清抗体效价分别为214,>215,215和213,4种SW-BSA均能刺激小鼠产生高效价抗体,其中AgB组的抗体效价最高,与其他各组相比差异显著(P<0.05),AgA组和AgC组间差异不显著(P>0.05)。【结论】4种不同偶联率的SW-BSA对小鼠均具有较好的免疫原性,其中以偶联率为20.2的SW-BSA(AgB)的免疫原性最高。
- 宋毓民王爱华王建华唐金宁赵兴华余永涛李海利耿果霞
- 关键词：化学合成免疫原性
- 气相色谱-甲基化-α-D-甘露糖苷内标法测定变异黄芪中的苦马豆素被引量：19
- 2007年
- 建立以甲基化-α-D-甘露糖苷为内标物,用气相色谱测定变异黄芪中苦马豆素的方法。植物样品经甲醇超声提取、氯仿去除杂质后,将碱性正丁醇萃取物用硅烷化试剂进行衍生化,通过AT.SE-54毛细管柱分离,氢火焰离子化检测器检测,测得变异黄芪干草粉中苦马豆素含量为115.7mg/kg,加标回收率为82.6%～94.0%,相对标准偏差为2.8%。该方法能用于疯草样品中苦马豆素的含量检测。
- 赵兴华崔忠华耿果霞王建华张志敏宋毓民刘志滨
- 苦马豆素对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响被引量：33
- 2008年
- 【目的】探索苦马豆素(SW)与小鼠腹腔巨噬细胞功能之间的关系,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将70只小鼠随机分为7组,其中5组分别按0.05、0.2、0.8、3.2和6.4mg·kg-1每天灌服SW生理盐水,连续21d,另2组为生理盐水和空白对照组。收集小鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖(LPS)诱导活化,用ELISA法检测TNF-α生成,酶法检测一氧化氮合酶(NOS)活性,化学法检测H2O2浓度,MTT比色法检测杀伤肿瘤细胞活性及吞噬中性红能力。【结果】SW剂量在0.2～3.2mg·kg-1之间,能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬和杀伤活性﹑NOS活性,促进TNF-α和H2O2生成,且均呈剂量效应关系;6.4mg·kg-1SW对小鼠巨噬细胞的活性具有抑制作用。【结论】低剂量SW可以通过提高NOS活性介导巨噬细胞信号传递通路,促进TNF-α和H2O2生成,发挥其吞噬和杀伤功能;高剂量SW对小鼠巨噬细胞免疫功能起抑制作用。提示,SW对小鼠腹腔巨噬细胞具有双向调节作用。
- 张志敏王建华赵兴华公小兵余永涛崔忠华耿果霞
- 关键词：苦马豆素巨噬细胞TNF-ΑNOSH2O2小鼠
- SW-BSA人工抗原疫苗对山羊的免疫评价
- 2014年
- 10只山羊随机分为攻毒对照组和免疫攻毒组。免疫攻毒组山羊经过2次免疫,检测血清效价达到较高后,2组山羊同时饲喂甘肃棘豆草粉,进行攻毒饲喂试验。攻毒组山羊出现明显中毒症状后处死,进行病理组织学观察。免疫攻毒组继续饲喂试验,以观察疫苗的保护效果。分别测定血液中各项生化指标,并进行病理组织学检查。结果显示,攻毒组山羊于饲喂草粉的第15~20天出现典型的中毒症状,免疫攻毒组于第50~55天出现中毒症状,比攻毒对照组延缓30~40d;攻毒后,攻毒对照组山羊血液中生化指标迅速改变,而免疫攻毒组表现渐进性变化,其中苦马豆素（SW）浓度、AST、ALP、LDH、BUN、α-mannosidase活性分别比攻毒对照组延缓27、24、27、30、24、30d达到较高或较低点;中毒山羊组织器官出现以急性中毒性缺血、缺氧和空泡变性为特点的病理变化。结果表明,SW-BSA人工抗原疫苗对山羊疯草中毒有一定的免疫保护作用。
- 宋毓民唐金宁王爱华王妍王建华
- 关键词：苦马豆素生化指标山羊
- 苦马豆素对小鼠细胞免疫功能的影响被引量：20
- 2008年
- 【目的】探索苦马豆素（SW）对小鼠免疫器官发育、外周血液中细胞数及淋巴细胞增殖功能的影响，为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将80只昆白系小鼠随机分为8组，其中5个试验组按0．05，0．2，0．8，3．2和6．4mg／kg剂量每天灌服不同质量浓度的SW生理盐水溶液，连续21d；其他3组均为对照组（分别为生理盐水组、环磷酰胺组和空白对照组）。检测小鼠胸腺和脾脏指数，用细胞分析仪检测外周血液中白细胞、红细胞及淋巴细胞数；用MTT法检测脾脏淋巴细胞的增殖活化。【结果】在SW剂量为0．2～0．8mg／kg，小鼠脏器（胸腺和脾脏）指数及外周血液中的细胞数均增加；SW单独作用或其协同刀豆蛋白A（ConA）和植物血凝素P（PHA-P）刺激时，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性增强，SW协同脂多糖（LPS）刺激时，小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性降低。SW剂量为6．4mg／kg时，小鼠的脏器指数和外周血液中的细胞数均减少；无论小鼠脾脏淋巴细胞受丝裂原刺激与否，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖活性均降低。【结论】SW可以通过提高小鼠脏器指数及外周血液中细胞数提高淋巴细胞的增殖活性，增强小鼠的细胞免疫功能；SW剂量为6．4mg／kg对小鼠细胞免疫功能有抑制作用，提示SW对小鼠细胞免疫功能的影响具有选择性和双向调节作用。
- 张志敏王建华赵兴华余永涛刘志滨耿果霞马保华赵晓娥
- 关键词：苦马豆素淋巴细胞脏器指数外周血液小鼠
- SW人工抗原的合成与鉴定被引量：2
- 2008年
- 【目的】探索高效苦马豆素(SW)人工抗原SW-BSA的合成方法。【方法】设计新的技术路线,合成SW人工抗原制备的关键中间产物SW-对甲基苯甲酸,并进行波谱分析。应用EDC法将SW-对甲基苯甲酸分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)连接,制备免疫抗原SW-BSA和包被抗原SW-OVA,通过小鼠免疫试验检测所合成的SW-BSA的免疫原性。【结果】合成的SW-对甲基苯甲酸的结构与预期目标产物一致;合成的SW-BSA可刺激小鼠产生针对SW的抗体;通过薄层层析技术可对反应进程进行即时检测。【结论】SW-BSA人工抗原合成成功,该人工抗原具有良好的免疫原性。
- 王爱华宋毓民周乐王建华
- 关键词：苦马豆素人工抗原免疫原性
- 抗苦马豆素抗体ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2008年
- 【目的】建立一种敏感性高、特异性强的抗苦马豆素(Swainsonine,SW)抗体的ELISA检测方法。【方法】用SW人工抗原(SW-BSA)免疫小鼠,制备抗SW血清,通过ELISA法进行血清抗SW抗体效价检测,比较以SW-OVA或SW为包被抗原的检测结果,分析包被抗原浓度、封闭剂等对测定结果的影响,以确定测定的最佳条件。【结果】以SW-OVA为包被抗原的检测结果明显优于以SW为包被抗原;抗苦马豆素抗体的最佳测定条件为:以1.0μg/mL SW-OVA作为包被抗原,于4℃包被过夜或37℃包被2 h,选用15 g/L的明胶作为封闭剂,酶标抗体的工作浓度为1∶1 500。【结论】建立的抗苦马豆素抗体ELISA检测方法,特异性强、稳定性高,为进一步研究苦马豆素人工抗原的免疫原性等奠定了基础。
- 王爱华王建华宋毓民
- 关键词：苦马豆素ELISA检测
- SW-BSA人工抗原疫苗对家兔的免疫效果被引量：3
- 2012年
- SW-BSA人工合成抗原与白油制成疫苗免疫家兔,饲喂甘肃棘豆后制备免疫血清,分别进行间接ELISA试验、SW浓度的测定、血清生化指标测定试验,并进行组织病理学检查。结果表明,免疫攻毒组家兔的临床中毒症状比攻毒对照组出现时间延迟30d,血清中SW浓度比攻毒对照组延缓21d达到较高水平,血清中AST、ALP、LDH、BUN活性比攻毒对照组延缓31d达到较高值,ALT的活性与攻毒对照组相比没有显著差异,血清α-甘露糖甙酶活性比攻毒对照组延缓28d下降到较低值。攻毒组家兔各器官组织的病理变化主要是以细胞呈现急性中毒性缺血缺氧和空泡变性为特点。结论得出SW-BSA人工合成抗原疫苗对攻毒家兔有一定的保护作用。
- 宋毓民唐岭田王建华唐金宁王爱华王研
- 关键词：苦马豆素人工抗原间接ELISA血清酶活性家兔
