国际科技合作与交流专项项目(2008DFA31970) 作品数:16 被引量:70 H指数:5 相关作者: 牛建昭 黄春芳 王继峰 杨长福 孙晓芳 更多>> 相关机构: 北京中医药大学 河北大学 贵阳中医学院 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 高等学校学科创新引智计划 河北省科学技术研究与发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
三七总皂苷对肺纤维化小鼠血清中Ⅳ-C型胶原透明质酸的干预作用 被引量:6 2010年 目的:研究三七总皂苷对小鼠肺纤维化血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的的影响。方法:C57BL/6雄性小鼠60只,分为三七总皂苷高、中、低剂量组,强的松组,模型组,假手术组,每组10只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组小鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后第2天开始给药,持续到处死动物的前一天。三七总皂苷高、中、低剂量组分别为120、60、30mg/kg/d,强的松组为0.56mg/kg,假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。于28d后处死,观察比较各组小鼠血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的含量。结果:模型组小鼠肺组织中Ⅳ-C型胶原、透明质酸含量均明显高于假手术组(P<0.01),与模型组相比,三七总皂苷高中低剂量组均能降低小鼠血清中Ⅳ-C型胶原、透明质酸含量,其中中、高剂量组的降低作用较为显著(P<0.01)。结论:三七总皂苷可通过降低肺纤维化小鼠细胞外基质含量而发挥治疗肺纤维化作用。 孙晓芳 黄春芳 杨长福 牛建昭 段斐 杨美娟 王小波 刘霞 王继峰关键词:三七总皂苷 肺纤维化 透明质酸 姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响 被引量:7 2011年 目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。 黄春芳 刘霞 王晓波 赵丽云 杨长福 王继峰 牛建昭关键词:A549 莪术油对肺腺癌A549细胞周期及组织蛋白酶K表达的影响 被引量:19 2010年 目的:探讨莪术油对A549细胞增殖抑制作用及组织蛋白酶K表达的影响。方法:MTT法观察莪术油对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期阻滞;Western blot检测组织蛋白酶K的表达情况。结果:莪术油作用后①MTT法结果显示莪术油在60mg·L-1~200mg·L-1对A549细胞增殖有抑制作用,IC50随作用时间的延长显著前移。②流式细胞术结果出现凋亡峰,与未处理组细胞相比,给药组细胞G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。③Western blot结果显示,莪术油处理细胞24h后,组织蛋白酶K表达明显上调,100mg·L-1达最大值。结论:莪术油能抑制肺腺癌A549细胞增殖,阻滞细胞周期的作用,其机制可能与上调组织蛋白酶K表达水平有关。 杨长福 李亚东 牛建昭 王晓波 黄春芳 唐炳华 赵丕文 刘霞 王继峰关键词:莪术油 A549细胞 细胞周期 组织蛋白酶K 姜黄素抗C_(57BL/6)小鼠肺纤维化与CathepsinK相关性研究 被引量:3 2012年 目的:探讨姜黄素抗C57BL/6小鼠肺纤维化分子机制。方法:博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分组:对照组(气管内注入0.1mL生理盐水),模型组(气管内注入0.025U博来霉素),姜黄素组(气管内注入0.025U博来霉素);造模第2天,对照组和模型组给予生理盐水灌胃,姜黄素组给予200mg/kg/d姜黄素灌胃,分别于造模后第7、14、28天取材。采用Mallory染色观察肺组织胶原表达变化;应用免疫组化检测Cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异;在免疫组化的基础上,Re-al Time RT-PCR,Western-blot进一步验证Cathepsin K mRNA及蛋白在各组之间表达的差异。结果:Mallory染色结果显示姜黄素组、模型组与对照组比较胶原表达都比对照组高,姜黄素组与模型组比较胶原表达减少;姜黄素组、模型组与对照组比较,Cathepsin K表达都有不同程度增加;但姜黄素组与模型组比较Cathepsin K蛋白表达显著增加,其中第14天(P=0.006);第7天(P=0.015);28天(P=0.027);Real Time RT-PCR分析CathepsinK mRNA表达,姜黄素组与模型组进行比较发现,姜黄素组比模型组明显增加,第7天(P=0.047),第14天(P=0.001),第28天增加不明显(P=0.053)。结论:姜黄素通过增加Cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。 黄春芳 李亚东 沈俊辉 崔向清 李彧 王晓波 王继峰 牛建昭关键词:姜黄素 肺纤维化 CATHEPSIN 莪术油对人肺腺癌A549细胞中组织蛋白酶D,K表达的影响 被引量:4 2012年 目的:探讨莪术油对A549细胞中胶原及组织蛋白酶D,K表达的影响。方法:用不同浓度的莪术油(0,40,80,120 mg.L-1)作用A549细胞,苦味酸天狼猩红染色法观察莪术油对A549细胞层胶原分泌的动态变化;酶法测定细胞中可溶性羟脯氨酸的分泌;Western blot检测Cat D,Cat K的表达情况。结果:莪术油刺激细胞后A549细胞分泌的胶原含量随剂量和作用的时间增加而减少。Cat D,Cat K蛋白的表达随作用时间持续而增强。结论:莪术油减少肺腺癌A549细胞胶原沉积,其机制可能与上调Cat D,Cat K蛋白表达有关。 杨长福 黄春芳 孙晓芳 牛建昭 王继峰关键词:莪术油 A549细胞 胶原 组织蛋白酶K 组织蛋白酶D 姜黄素抗环磷酰胺致染色体畸变的初步研究 2011年 目的研究姜黄素对化疗药物环磷酰胺所致染色体畸变的影响。方法昆明小鼠随机分成正常组,姜黄素组(100 mg/kg),模型组和环磷酰胺加姜黄素大、中、小剂量组(50、100、200 mg/kg)。造模方法为腹腔注射环磷酰胺2次,浓度为50 mg/kg,2次间隔24 h。正常组(不造模)即阴性对照组,只喂基础饲料;模型组只注射环磷酰胺;姜黄素组(不造模)和环磷酰胺加姜黄素大、中、小剂量组在环磷酰胺给药前4周开始灌胃给药,每日1次。末次注射环磷酰胺24 h后将全部小鼠脱颈椎处死,小鼠在处死前2~3 h腹腔注射秋水仙素,每10 g体重注射0.04%秋水仙素0.1 mL,以积累分裂相。处死后取小鼠股骨制备染色体标本。Giemsa染色观察小鼠染色体畸变情况,统计染色体总畸变率及不同类型的染色体畸变率。结果姜黄素能显著降低环磷酰胺所致的染色体末端缺失及染色体碎片形成。姜黄素组与正常组比较没有明显差异,姜黄素本身不具有致畸性;低、中、高剂量姜黄素组染色体畸变率明显低于模型组(P〈0.05,P〈0.01),抑制率分别为19.65%、37.08%和17.22%,中剂量组影响最显著。不同类型染色体畸变方面,与模型组比较,不同剂量姜黄素组染色体末端缺失率明显下降(P〈0.05),多倍体形成没有显著差异;中剂量组对染色体碎片形成率有显著降低作用(P〈0.01)。结论姜黄素能减少由环磷酰胺所诱发的染色体畸变,姜黄素对环磷酰胺所致的染色体损伤有显著的保护作用。 黄春芳 孙晓芳 杨长福 沈俊辉 杨美娟 王继峰 牛建昭关键词:姜黄素 环磷酰胺 染色体畸变 小鼠 莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的影响 被引量:1 2011年 目的探讨莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法体外培养肺腺癌细胞A549,MTT比色法测定莪术油对A549细胞作用24、48、72 h后抑制率;流式细胞术分析莪术油对A549细胞作用24 h后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测莪术油对A549细胞作用24 h后细胞凋亡与坏死情况。结果莪术油对A549细胞增殖的抑制率随时间延长明显升高,随药物浓度增加抑制作用增强;莪术油对A549细胞作用24 h后,细胞周期停滞在G0/G1期,阻止其进入S期;细胞的早期凋亡、晚期凋亡和坏死比例随着莪术油浓度的增加而增加,且坏死细胞的比例高于凋亡细胞。结论莪术油对A549细胞的增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖,其作用是通过阻滞细胞周期及诱导凋亡和坏死来实现的。 王晓波 牛建昭 崔巍 刘飒 杨长福 赵丕文 唐炳华关键词:莪术油 人肺腺癌细胞A549 增殖 细胞周期 三七总皂苷对肺纤维化小鼠组织蛋白酶B表达的影响 被引量:5 2013年 目的探讨三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS)对肺纤维化小鼠肺组织中组织蛋白酶B(cathepsinB,CatB)表达的影响。方法 C57BL/6雄性小鼠90只,分为假手术组,模型组和PNS组,每组30只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素(Bleomycin,BLM),假手术组小鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后第2天开始给药,持续到处死动物的前1天。假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7,14,28 d随机处死10只,取肺组织进行HE和Mallory染色;免疫组织化学法和Western-blot法检测CatB的表达情况。结果与模型组比较,PNS组肺泡炎和纤维化程度均减轻,CatB表达显著降低(P<0.05)。结论 PNS能明显减轻BLM所致的小鼠肺泡炎及纤维化程度,可能与其抑制肺组织中CatB的过度表达有关。 孙晓芳 段斐 刘佳琳 牛建昭 吴素焕关键词:三七总皂苷 肺纤维化 小鼠 组织蛋白酶B 姜黄素对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β受体的影响 被引量:1 2010年 目的探讨姜黄素对经转化生长因子β(TGF-β)诱导后人胚肺成纤维细胞TGF-βⅠ、Ⅱ型受体(TGF-βRⅠ、RⅡ)在人胚肺成纤维细胞中表达的影响,及其与特发性肺纤维化的关系。方法细胞分为正常组、姜黄素组、模型组、治疗组,采用RT-PCR、Western blotting法检测TGF-βRⅠ、RⅡ在人胚肺成纤维细胞的变化。结果模型组TGF-βRⅠ与RⅡ表达增强,治疗组与正常组、模型组相比,TGF-βRⅠ与RⅡ表达明显减弱。结论姜黄素可抑制人胚肺成纤维细胞的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起一定作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-βRⅠ与RⅡ的表达而实现的。 张会存 李亚东 王继锋 牛建昭 唐炳华 李银生 李健 解克芳 杨美娟关键词:姜黄素 特发性肺纤维化 转化生长因子Β受体 肺成纤维细胞 姜黄素上调博来霉素诱导肺纤维化C_(57BL/6)小鼠CathepsinK表达 被引量:5 2011年 目的:研究姜黄素对博来霉素诱导肺纤维化C57BL/6小鼠Cathepsin K表达的影响。方法:博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分为对照组(气管内注入0.1mL生理盐水)、模型组(气管内注入0.025U博来霉素)、姜黄素组(气管内注入0.025U博来霉素);造模后第2d,对照组和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠生理盐水灌胃,姜黄素组给予200 mg.kg-1.d-1姜黄素灌胃,分别于造模后第7、14、28d取材。采用H&E及Mallory染色观察肺组织病理学变化;应用免疫组学Cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异。结果:姜黄素组、模型组与对照组比较都有不同程度的炎症及纤维化病灶,但是姜黄素组与对照组比较炎症及纤维化程度明显减轻;姜黄素组、模型组与对照组比较Cathepsin K表达都有不同程度增加,但是姜黄素组与对照组比较Cathep-sin K表达显著增加。结论:姜黄素可能是通过增加Cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。 黄春芳 张东伟 王晓波 孙晓芳 刘霞 陈朝青 王继峰 牛建昭关键词:姜黄素 肺纤维化