湖南省教育厅科研基金(08C042)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：尹立韩伟马晓健宫德正卢琼更多>>
- 相关机构：怀化医学高等专科学校大连医科大学怀化市第三人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 异香豆素对阿尔茨海默病Aβ蛋白的抑制作用及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨异香豆素对阿尔茨海默病Aβ的影响及其相应作用机制。方法:脂质体转染构建APP695高表达CHO细胞系;MTT实验检异香豆素对CHO/APP695的细胞毒作用;RT-PCR检测APP695的表达;Western-blot实验检测目的蛋白的表达;放射免疫法测定细胞培养上清Aβ含量;ELISA法测定γ-分泌酶活性变化。结果:RT-PCR和Western-blot检测显示CHO/APP695细胞高表达APP蛋白;0,10,20,40μmol·L-1的异香豆素处理CHO/APP695细胞24 h后,Aβ的分泌量从(16.4±1.4)pg.mL-1依次减低为(12.6±1.1),(9.4±0.8),(4.7±0.6)pg·mL-1,各组间差异有统计学意义(P<0.05);Western-blot结果显示异香豆素对CHO/APP695细胞APP蛋白的表达没有影响;ELISA测定显示10、20、40μmol·mL-1的异香豆素分别抑制了(21.4±1.6)%、(41.1±2.5)%和(73.6±5.2)%的γ-分泌酶活性;Western-blot结果显示异香豆素没有减少剪切的Notch1蛋白的表达。结论:异香豆素可以高效的抑制γ-分泌酶对APP蛋白的剪切,减少Aβ的生成,其抑制活性并不影响Notch1蛋白的剪切。
- 尹立邹原韩伟宫德正马晓健
- 关键词：Β淀粉样蛋白淀粉样前体蛋白阿尔茨海默病
- 缺血再灌注大鼠脑组织提取液体外诱导骨髓基质细胞向神经元样细胞的分化
- 2010年
- 背景:骨髓基质细胞最终成为神经元需要经历定向及分化两个过程,定向及分化是含有相同基因库的细胞不同基因表达的结果,基因表达需要一定的条件,胞外基质的变化可引起细胞形态学及基因表达方式的改变。目的:观察骨髓基质细胞在损伤大鼠脑组织提取液诱导下,向神经元样细胞分化的可能性。方法:取第5代转染绿色荧光蛋白的骨髓基质细胞,分别用缺血再灌注/正常大鼠脑组织提取液进行诱导分化培养,并设立空白对照。相差显微镜下观察细胞形态变化,并行免疫组织化学染色鉴定。结果与结论:原代培养的骨髓基质细胞纯化、扩增后呈均匀一致的长梭形,第3代细胞均一表达CD44,CD106,不表达CD34。荧光显微镜下,绿色荧光蛋白转染后24h可观察到骨髓基质细胞有荧光表达,但强度稍弱;48h后大多数细胞发出明显绿色荧光。加入缺血再灌注大鼠脑组织提取液后,诱导细胞不仅在形态上表现为神经元样特征,而且神经元特异性烯醇化酶特异性抗体呈阳性表达。与空白对照组比较,缺血再灌注大鼠脑组织提取液组和正常大鼠脑组织提取液组骨髓基质细胞分化率均明显升高(P<0.05),且前组升高幅度明显大于后组(P<0.05)。提示缺血再灌注大鼠脑组织提取液能将骨髓基质细胞成功诱导为神经元样细胞。
- 韩伟宫德正李小媚卢琼尹立吴卫华
- 关键词：绿色荧光蛋白骨髓基质细胞神经元样细胞
- 异香豆素对老年痴呆小鼠β淀粉样蛋白的影响
- 2012年
- 目的建立老年痴呆(AD)小鼠模型,探讨异香豆素对AD小鼠的治疗作用及其机制。方法将50只昆明小鼠分为:对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组和高剂量异香豆素治疗组,每组各10只;水迷宫实验检测各组小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数;放射免疫法测定细胞培养上清Aβ含量。结果老年痴呆小鼠模型组与对照组对照比较,逃避潜伏时间出现显著性的延长(P<0.01),平台跨越次数显著性的减少(P<0.01)。异香豆素治疗后老年痴呆小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数得到显著性的改善(P<0.05)。对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组、高剂量异香豆素治疗组脑组织Aβ的表达水平分别为(1.01±0.44)pg/ml(、12.89±3.21)pg/ml(、10.45±2.06)pg/ml、(7.18±1.92)pg/ml、(4.07±1.24)pg/ml,各组之间具有统计学差异(P<0.01)。结论异香豆素具有抗AD小鼠痴呆的活性,减少AD小鼠脑组织Aβ的生成是其主要的作用机制。
- 尹立韩伟马晓健邬贤斌胡继实卢琼
- 关键词：阿尔茨海默病老年痴呆小鼠Β淀粉样蛋白
