吉林省科技厅发展计划项目(20040206-2-2)
- 作品数:8 被引量:49H指数:4
- 相关作者:胡桂学张鑫段小波王翌董浩更多>>
- 相关机构:吉林农业大学农业部动物检疫所辽宁医学院更多>>
- 发文基金:吉林省科技厅发展计划项目吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 鹅细小病毒研究进展被引量:13
- 2011年
- 小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种急性、亚急性烈性传染病,是目前危害养鹅业的重要传染病之一。近年来关于鹅细小病毒的研究又有了新的发展和新的观点,作者从鹅细小病毒分子生物学、检测方法、致病机理和抗原位点的定位等方面进行了阐述。
- 马磊董浩蒋运博段小波谷松至胡桂学
- 关键词:小鹅瘟鹅细小病毒致病机理抗原表位
- 鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了一对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得与预期大小相符约1.6ku核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌...
- 胡桂学张鑫徐佳王淳玉许洪洁
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因真核表达载体VERO细胞
- 文献传递
- 小鹅瘟病毒胶体金层析检测卡的研究被引量:10
- 2007年
- 参照李茂祥等人的方法提纯小鹅瘟病毒(Goose plague virus,GPV),免疫小鼠,按常规方法获得3株GPV单克隆抗体。用胶体金标记提纯的GPV单克隆抗体288并制备金标棉,马抗GPV多克隆抗体和羊抗鼠抗体喷涂NC膜,组装成胶体金检测卡。特异性试验结果表明,该检测卡只能检测出GPV,其他对照病毒检测结果均为阴性。将GPV做100倍稀释,仍可获得阳性结果。
- 李长瑜周铁忠张喜悦王翌胡桂学
- 关键词:小鹅瘟病毒单克隆抗体
- 鹅副黏病毒胶体金检测卡的研究被引量:7
- 2008年
- 将制备的抗鹅副黏病毒(GPMV)JG04株单克隆抗体3A5标记胶体金颗粒,提纯的鸡IgG(抗JG04株GPMV)喷涂在NC膜上,建立检测GPMV的快速夹心胶体金免疫层析检测卡(ICS)。该检测卡检测鸡减蛋综合征病毒、传染性法氏囊炎病毒、传染性支气管炎病毒、小鹅瘟病毒鸡胚或鸭胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟热病毒细胞培养物呈阴性,与鹅副黏病毒、孔雀源新城疫毒株,鸽源新城疫毒株、新城疫La sota株、鸡源新城疫病毒的尿囊液出现阳性反应。敏感性试验结果表明,该检测卡可检出血凝效价为24以上的鹅副黏病毒尿囊液。
- 王翌周铁忠张喜悦胡桂学
- 关键词:鹅副黏病毒单克隆抗体胶体金
- 小鹅瘟病毒VP3基因真核表达质粒在小鼠中的免疫效果被引量:13
- 2008年
- 检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因真核表达质粒在小鼠中的免疫效果。大量提取本实验室已构建的含有GPV VP3基因的真核表达质粒pVAXⅠ/VP3和空载体pVAXⅠ,分两组进行两点肌肉注射免疫小鼠,共免疫4次。利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,间接ELISA法检测免疫小鼠血清中GPV特异性抗体的水平。淋巴细胞增殖指数,免疫小鼠与正常小鼠差异不显著。间接ELISA检测结果表明,pVAXⅠ/VP3质粒免疫组小鼠血清中GPV特异性抗体水平,显著高于空载体对照组和阴性对照组。已构建的GPV VP3基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫,为小鹅瘟核酸疫苗的研究奠定基础。
- 许洪洁张鑫夏铭琦胡桂学
- 关键词:小鹅瘟病毒真核表达质粒VP3基因免疫效果
- 鹅细小病毒VP3基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中表达被引量:2
- 2010年
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)B株核苷酸序列,设计并合成了1对引物,PCR扩增GPV吉林分离株主要结构蛋白VP3基因,获得大小为1605bp的核苷酸片段。将该片段纯化后克隆入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌JM109,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。经过酶切和连接反应,将VP3基因克隆入真核表达载体pVAX1,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,提取质粒,进行了PCR和酶切鉴定。通过脂质体法将pVAX1-VP3转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光法检测。结果显示,VP3基因克隆成功,与GPVB株核苷酸序列同源性为96.2%;PCR和酶切鉴定结果证实,成功构建了含VP3基因的GPV真核表达载体pVAX1-VP3。提取转染该质粒的Vero细胞RNA,RT-PCR扩增,在1000~2000bp可见一明显DNA条带;间接荧光抗体染色转染细胞,在细胞表面可见特异荧光。
- 高光张鑫徐佳王淳玉许洪洁胡桂学
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因核酸疫苗VERO细胞
- 鹅源沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验被引量:3
- 2005年
- 为了对辽宁省某养鹅场10日龄患病鹅作出正确诊断和治疗,利用实验室诊断和药物敏感试验对病菌进行分离培养与鉴定。结果表明,该病病原为沙门氏菌,对培氟沙星、环丙沙星、痢特灵等药物高度敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对磺胺嘧啶钠等药物不敏感。选用敏感药物进行治疗,收到良好效果。
- 徐凤宇马红霞于守平单晓枫胡桂学
- 关键词:沙门氏菌药敏试验
- 鹅细小病毒四平分离株VP3基因的克隆与序列分析被引量:4
- 2006年
- 根据已发表的鹅细小病毒(GPV)核苷酸序列,设计并合成了1对引物,对吉林农业大学预防兽医学研究室分离鉴定的GPV四平株(SP)主要保护性抗原蛋白VP3基因进行扩增。所得到的PCR产物片段大小约1.6 kb,与预期片段大小相符。将该片段纯化后与T载体连接,转化到感受态大肠杆菌JM-109中进行克隆。对所提质粒进行快速鉴定、PCR鉴定以及限制性内切酶NheⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒,对重组质粒测序并进行核苷酸序列分析。结果表明:GPV四平株VP3基因长1 605 nt,包含了完整编码GPV VP3蛋白阅读框,且与国内GPV分离株B,GD,HG5/82相应核苷酸序列和氨基酸序列的同源性较高,分别为96.2%,96.3%,96.4%和97.4%,98.7%,98.9%。据此认为,GPV四平株VP3基因可以作为构建具有普遍应用价值的基因工程疫苗的候选基因。
- 张鑫李柏岁徐佳李长瑜王淳玉胡桂学
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因克隆
- 鹅细小病毒的分子生物学研究进展被引量:4
- 2012年
- 鹅细小病毒(GPV)病是危害养鹅业的主要传染病之一。文章根据国内外对鹅细小病毒的分类地位、分子生物学特性、基因组的结构特点、非结构蛋白与结构蛋白的功能以及分子生物学诊断与防治等方面的研究作一综述,以期为鹅细小病毒及小鹅瘟的防控提供参考。
- 蒋运博董浩马磊徐楠楠段小波胡桂学
- 关键词:鹅细小病毒分子生物学小鹅瘟