湖北省卫生厅科研基金(JX3C09)
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
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- IGF-1对Rh1肉瘤细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响
- 2011年
- 目的探讨胰岛素样生长因子(IGF)1对Rh1肉瘤细胞生长活性和PI3K/Akt/mTOR信号通路的背景变化。方法常规细胞培养,用无血清培养基消除内源性因子影响27 h,再用IGF-1(终浓度为10 ng/ml)刺激72 h,流式细胞仪检测细胞生长活性;另外Western印迹方法观察IGF-1刺激细胞5、10、20、30和60 min后Akt(s473)、S6的动态变化。结果与对照组相比,IGF-1可促进Rh1细胞存活。IGF-1刺激不同时间后S6磷酸化则随着时间的延长逐渐增强;IGF-1亦导致Akt(s473)位点的磷酸化,随时间的延长,磷酸化Akt在5 min时达高峰,此后逐渐减弱。结论Akt、S6等是PI3K/Akt/mTOR信号通路中的重要信号分子,对Rh1细胞而言,在IGF-1刺激下S6有逐渐增强的变化,Akt(s473)位点磷酸化则有减弱的动态变化。
- 金家红黄文峰
- 关键词:IGF-1PI3K/AKT/MTOR
- 胰岛素样生长因子2引起Rh1肉瘤细胞mTOR信号的背景变化
- 2011年
- 目的观察胰岛素样生长因子(IGF)2对Rh1肉瘤细胞生长活性和mTOR信号背景的影响。方法常规培养Rh1细胞,均用无血清培养液消除内源性因子影响后再用IGF-2(终浓度为10 ng/ml)刺激,72 h后用流式细胞仪检测细胞生长活性;蛋白质印迹方法观察IGF-2刺激细胞5、10、20、30、60 min后S6、Akt(s473)的动态变化。结果与对照组相比,IGF-2刺激可促进Rh1细胞存活,降低细胞凋亡率;IGF-2刺激细胞后可使S6磷酸化随着时间的延长逐渐增强;IGF-2亦导致Akt(s473)位点的磷酸化,其磷酸化状态相对稳定。结论 IGF-2刺激Rh1细胞时,mTOR信号通路中S6功能逐渐增强,Akt功能则相对稳定。
- 黄文峰
- 关键词:MTOR
- H_2O_2对原代培养的猪肺动脉内皮细胞钙离子的影响被引量:1
- 2010年
- 目的探讨活性氧对原代培养的猪肺动脉内皮细胞钙离子浓度的影响。方法原代培养的猪肺动脉内皮细胞分别用不同浓度的H2O2刺激2 min,用双波长荧光分光光度计观察细胞浆内钙离子浓度的变化;另外,分别以不同时间用10μM的H2O2刺激,观察细胞浆内钙离子浓度的变化。结果 1μM的H2O2即能引起胞内钙离子浓度显著增高,并且H2O2刺激浓度和胞内钙离子浓度的增高有明显量效关系。钙离子浓度由对照组的(110.85±32.33)nM升高至1μM组的(138.44±56.21)nM、10μM组的(171.83±37.92)nM、100μM组的(192.56±34.43)nM,后者与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。用10μM的H2O2分别刺激内皮细胞在120 s以后可见到胞内钙离子浓度增高,120 s时钙离子浓度为(171.83±37.92)nM,300 s时钙离子浓度为(176.31±43.17)nM,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论活性氧能够升高原代培养的猪肺动脉内皮细胞的胞内钙浓度,猪肺动脉内皮细胞对H2O2的刺激有一定的耐受性。
- 黄文峰廖贵华
- 关键词:内皮细胞活性氧钙离子