国家高技术研究发展计划(2006AA020202)
- 作品数：9 被引量：74H指数：4
- 相关作者：平淑珍林敏陈明赵仲麟马鑫更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所江南大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学化学工程更多>>
- 华根霉菌丝体结合脂肪酶催化酯合成动力学拆分2-辛醇被引量：14
- 2008年
- 研究了华根霉CCTCC M201021菌丝体结合脂肪酶(RCL)在非水相中催化酯合成动力学拆分外消旋2-辛醇的能力.发现RCL对该反应具有较好的光学选择性(E>100),辛酸和异辛烷分别是最佳的酰基供体和反应溶剂,体系水活度的减少对反应的光学选择性没有明显影响,但能显著提高反应初速度.在相同转化率下,通过添加3A分子筛降低体系水含量可使反应初始速度提高7.3倍.当底物浓度提高到0.230 mol/L,反应40 h时转化率达44.4%,产物酯的ee值为94.7%.与三种商品化脂肪酶进行了比较,发现在相同条件下RCL对2-辛醇的拆分不但具有较好的光学选择性(E=103.1),而且也表现出较高的反应初速度和转化率.
- 单天宇王栋徐岩何军邀
- 关键词：华根霉动力学拆分2-辛醇
- RNA聚合酶σ^S亚基的研究进展被引量：2
- 2009年
- σS(RpoS)是大肠杆菌RNA聚合酶的一个亚基。在压力情况下,如高温、酸、渗透冲击、营养缺陷和生长进入稳定期等能够被诱导,并在一定程度上能够取代σ70与核心酶结合形成全酶,从而激活多数σS-依赖的基因的转录。对RpoS调控的基因和它们的启动子序列、调控方式以及它自身的调控进行了简单的综述。
- 李燕燕永亮林敏平淑珍
- 关键词：RPOS基因RNA聚合酶
- 斯氏假单胞菌Pseudomonas stutzeriA1501氧胁迫下基因表达谱研究被引量：3
- 2008年
- 斯氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri A1501分离自我国南方水稻田,在低铵和微好氧条件下能紧密结合在水稻根表,并侵入根内生长和固氮.为探讨氧对A1501基因组表达的影响,利用全基因组芯片技术,研究不同氧浓度(0.5%,21%)下A1501基因组表达谱,结果表明:(ⅰ)67个基因在高氧浓度下表达上调2倍以上,其中17个基因的功能未知;(ⅱ)68个基因在高氧条件下表达,其中约50%的基因参与固氮或反硝化.实时定量RT-PCR验证结果表明,4个编码氧化还原酶的基因和7个编码胞外夹膜多糖和抗原寡糖合成的基因在高氧下表达上调,其中sodC在高氧下表达上调2.7倍、编码黄素单胺氧化酶相关蛋白的基因PST1610表达上调2.2倍、编码α-酮戊二酸-铁氧化酶族氧化还原酶的基因PST3584表达上调3.2倍、编码NAD依赖型氧化还原酶的基因PST2179表达上调2.9倍.这些基因及其表达产物可能在A1501氧保护机制中发挥作用.
- 窦岳坦燕永亮平淑珍陆伟陈明张维王忆平金奇林敏
- 关键词：斯氏假单胞菌PSEUDOMONASSTUTZERIA1501氧胁迫联合固氮
- 芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因的克隆及表达被引量：7
- 2009年
- 从新疆极端干燥环境土壤样品中筛选到具有高β-甘露聚糖酶活性的芽孢杆菌(Bacillussp.MX)。运用PCR技术从该菌基因组中克隆得到β-甘露聚糖酶基因,连接到表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21中高效表达的基因产物经亲和层析纯化,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示该蛋白的相对分子质量为41kD。酶学性质分析表明该酶在25～95℃,pH3.0～9.6范围内均具有酶活。最适作用温度55℃和pH值5.0,酶比活力为4572U/mg。在最适pH5.0,高温85℃和95℃分别处理10min后,该酶相对酶活力仍保持51%和34%,显示β-甘露聚糖酶具有较好的耐酸性和热稳定性。
- 马鑫赵仲麟李亮陈明林敏平淑珍
- 关键词：芽孢杆菌Β-甘露聚糖酶酶活
- 生物固氮及在可持续农业中的应用被引量：35
- 2008年
- 氮是限制农业生产的重要营养元素。生物固氮指某些原核生物能利用体内的固氮酶将空气中的氮气还原为氨,为植物生长提供氮素。自然界中存在多种具有固氮能力的微生物,依据其固氮方式分为自生固氮、共生固氮和联合固氮三种类型。联合固氮菌通过趋化定殖在植物根表,并生长、固氮。
- 张秋磊林敏平淑珍
- 关键词：生物固氮联合固氮农业
- 重组华根霉脂肪酶协同转谷氨酰胺酶提高冷冻面团抗冻发酵特性的研究被引量：3
- 2011年
- 采用差示扫描量热仪和F3流变发酵仪研究重组华根霉脂肪酶(RCL)和转谷氨酰胺酶(TG)共同作用对冷冻面团抗冻发酵特性的影响。将面团于-18℃冻藏0、7、21、35d,结果发现:随着冻藏时间的延长,甘油含量有所降低,可冻结水含量增加;引入RCL和TG到冷冻面团中可以显著增加面团中的甘油含量,显著降低面团中可冻结水的含量,减少冰晶体的形成,并且可以提高酵母的存活数。F3流变发酵仪测定面团的发酵流变学特性,结果表明:RCL和TG同时作用可以显著降低冻藏对面团发酵高度的削弱作用,改善酵母的发酵性能和增加面团的持气率。
- 李珍妮王宏兹黄卫宁张峦贾春利徐岩RAYAS-DUARTE Patricia
- 关键词：脂肪酶转谷氨酰胺酶冷冻面团发酵
- 内含肽介导的蛋白质环化研究进展被引量：2
- 2009年
- 内含肽介导的蛋白质主链骨架环化是一种稳定蛋白质的新方法。在内含肽的作用下,蛋白质的N端和C端生成一个天然的肽键,达到蛋白质环化的目的。环化可以减小蛋白质构象的熵值,从而使蛋白质更加稳定。蛋白质环化的方法为生产稳定药物蛋白质和工业酶提供了一种新的手段。
- 赵仲麟马鑫林敏平淑珍
- 关键词：内含肽蛋白质剪接环化稳定性
- 固氮斯氏假单胞菌dctB基因在大肠杆菌中异源表达的研究
- 2008年
- 固氮斯氏假单胞菌dctB基因编码一个二元调控系统的感应蛋白DctB,该蛋白可以感应环境中四碳二羧酸的存在,通过磷酸化激活转录因子DctD,启动四碳二羧酸转运结构基因的转录,为生物固氮过程提供能量。本研究通过克隆dctB基因并实现了其在大肠杆菌BL21(DE3)中的过量表达,经IPTG诱导8h后DctB的表达量达到最高。该研究为进一步纯化DctB蛋白,深入研究该蛋白的功能与性质奠定了基础。
- 李红权平淑珍何升陈明林敏
- 关键词：斯氏假单胞菌蛋白表达
- 华根霉(Rhizopus chinensis)前导肽脂肪酶基因的克隆及其在Pichia pastoris中的表达被引量：8
- 2009年
- 通过3次PCR程序克隆得到了华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶全基因序列,该基因的开放阅读框长1170bp,不含内含子,编码一个389个氨基酸残基的蛋白质,包括26个氨基酸的信号肽,94个氨基酸的前导序列和269个氨基酸的成熟肽,其推断的氨基酸序列与一些已报道的根霉脂肪酶序列同源性为86%。在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中分泌表达前导肽序列。SDS-PAGE分析表明表达蛋白的分子量约37kD。N-端氨基酸序列分析表明该重组蛋白分泌过程中前导序列N-端的67个氨基酸被切割掉,表达的重组脂肪酶由前导序列C-端的27个氨基酸和成熟肽的269个氨基酸组成。发酵132h后上清中重组脂肪酶的表达量最高,蛋白含量约5.4mg/mL,橄榄油乳化法测水解酶活为161U/mL,其比活比野生型华根霉脂肪酶高约43倍。
- 王乐乐喻晓蔚徐岩
- 关键词：华根霉脂肪酶克隆毕赤酵母
