国家高技术研究发展计划(2012AA022006) 作品数:19 被引量:92 H指数:6 相关作者: 孙洋 祝令伟 刘军 纪雪 郭学军 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 吉林农业大学 吉林省畜牧兽医科学研究院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 吉林省科技发展计划基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
蓖麻毒素气源感染小鼠后炎性因子的定量分析 2014年 蓖麻毒素会引起机体内蛋白合成终止和细胞凋亡,通过测定组织器官内细胞因子的表达情况可监测机体中毒后免疫应答反应的发生与发展。本试验以气溶胶的方式将蓖麻毒素感染给小鼠,采用荧光定量聚合酶链式反应对攻毒后小鼠的肺脏、脾脏及胸腺中的6种炎性因子进行定量分析。研究结果显示:与对照组(生理盐水组)相比,试验组(蓖麻毒素组)小鼠肺脏、脾脏、胸腺中的趋化因子(CCL2、CXCL2)、白介素2(IL-2)和γ干扰素(INF-γ)的信使RNA(mRNA)表达均显著升高;而白介素1(IL-1)的信使RNA(mRNA)在肺脏、脾脏中高表达,在胸腺中为低表达;白介素4(IL-4)的信使RNA(mRNA)在肺脏、胸腺中高表达,在脾脏中为低表达。由此可知:经毒素气源感染后的小鼠,肺组织及免疫器官组织炎性因子分泌水平发生显著改变,局部及整体免疫调节机能紊乱。 郑关雨 王全凯 王蒙 钱军 刘林娜关键词:蓖麻毒素 炎性因子 荧光定量聚合酶链式反应 小鼠 超级细菌NDM-1质粒的水平转移研究 2015年 为探究超级细菌NDM-1质粒水平传播的特性,以携带NDM-1质粒的猫源洛菲不动杆菌和人源醋酸钙不动杆菌为供体菌,以工程菌株大肠杆菌DH5α和大肠杆菌、沙门氏菌弱毒菌株为受体菌,通过接合试验验证了NDM-1基因通过质粒跨种传播的可能性。结果显示,猫源NDM-1质粒可以转入E.coli DH5α中,并可以DH5α为中介,转入猪霍乱沙门氏菌C500中;而人源NDM-1质粒仅转入E.coli DH5α中,未能转入其他菌株。NDM-1质粒在沙门氏菌C500中比在E.coli DH5α中较为稳定遗传。质粒的导入并不影响宿主菌的生长特性。本研究初步揭示了NDM-1的传播方式,表明NDM-1质粒能够跨越菌种界限,并可以大肠杆菌为中介,转移至其它菌株中。 刘果 孙洋 纪雪 佟盼盼 祝令伟 刘军 周伟 郭学军 冯书章致赤大袋鼠皮肤化脓的荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定 2016年 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是巴氏杆菌属的成员之一,能感染鸡、鸭、兔、猪和牛等多种家养动物和部分野生动物,不同动物感染后的疾病命名不同,如禽霍乱(Eveleth et al.,1949)、猪肺疫和牛出血性败血症(陆承平,2001)。该菌为革兰氏阴性球杆菌或短杆菌,新分离菌株瑞氏染色两极着色明显, 周伟 李沐 王海军 祝令伟 孙洋 郭学军关键词:多杀性巴氏杆菌 生物光谱技术在病原微生物检测中的应用进展 被引量:9 2015年 病原微生物检测一直是微生物学研究领域的热点,常规检测方法,如分离培养、PCR、ELISA和基因组测序等,样品前处理复杂,耗时较长,不利于现场和实时在线检测。光谱技术因具有快速准确、安全高效、非破坏性和便于在线侦检等特点,成为一种新型无创检测技术,在病原微生物检测、疾病诊断等领域得到迅速发展。该文就3种常用的光谱技术,即激光激发荧光光谱、红外光谱和拉曼光谱在病原微生物检测中的工作原理、研究进展作一综述,讨论各自优缺点,并展望其应用前景。 郭振东 赵思言 张毅 付莹莹 赵红艳 曲英龙 王中一 赵宗正 钱军 刘林娜关键词:病原微生物 红外光谱 长春地区猪源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析 被引量:16 2014年 为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重PCR方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和磺胺甲基异恶唑耐药最严重(83.63%、52.72%、51.27%),全部菌株对美洛培南、多粘菌素敏感,其中176株菌表现为对3类以上抗生素的多重耐药(64.00%)。从仔猪腹泻样品分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素、四环素、氯霉素及磺胺甲基异恶唑的耐药率显著高于健康猪和猪肉样品分离株的耐药率。大肠杆菌分离株主要为A群和B1群。研究获得了吉林长春地区猪源大肠杆菌耐药性的基本流行病学数据,为指导养殖业的临床用药及耐药性监测提供了依据。 王基伟 孙洋 纪雪 刘军 祝令伟 周伟 佟盼盼 郭学军 李晓慧 冯书章关键词:大肠杆菌 耐药性 致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:13 2016年 目的了解长春地区水产品中致病性嗜水气单胞菌流行菌株的分布及其耐药情况。方法采用国标方法初步分离嗜水气单胞菌,结合生化及分子生物学方法进行种属鉴定并检测毒力基因,测定致病株毒力及耐药谱。结果 319份样品中共分离到279株嗜水气单胞菌,分离率87.46%。毒力基因阳性株为24株,阳性率为8.60%,毒力基因阳性株全部为β-溶血并具有较强的细胞毒性。致病性分离株至少耐受4类抗生素,均为多重耐药株。结论研究获得了长春地区嗜水气单胞菌的基本流行病学数据,探讨了其毒力谱和多重耐药模式,为嗜水气单胞菌病防控措施提供了依据。 高智玲 纪雪 陈萍 郭学军 刘军 祝令伟 周伟 冯书章 孙洋关键词:嗜水气单胞菌 毒力 耐药性 7株野鸟源新城疫病毒F基因和HN基因遗传变异分析 被引量:5 2015年 目的了解野生鸟类新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染情况,分析NDV的基因型与遗传变异特点。方法采用HA试验和RT-PCR检测野生鸟类新城疫病毒感染情况,对新城疫病毒分离株的融合蛋白基因(F基因)和血凝素-神经氨酸酶基因(HN基因)进行遗传进化分析,了解F和HN基因相关分子特性。结果 7株NDV的F基因序列分析表明显示其编码区核苷酸为1 662bp,编码553个氨基酸。F基因碱性裂解位点序列为112G-K/RQ-G-R-L117,均符合新城疫弱毒特征,与Ⅱ类NDV代表株核苷酸同源性为93.5%~99.9%。M46与M52为Ⅱ类Ⅱ亚型,其余5株为Ⅱ类Ⅰ亚型。HN基因序列分析显示,M46、M52编码区核苷酸为1 734bp,编码577个氨基酸,其余5株编码区氨基酸为1 851bp,编码616个氨基酸,与Ⅱ类代表毒株核苷酸同源性为92%~99.6%。结论分离的7株新城疫病毒在基因上均符合弱毒特点。其中有5株为Ⅱ类Ⅰ型,2株为Ⅱ类Ⅱ型。 李胜楠 王海军 高晓龙 李元果 国娇 陈迪 王铁成 于志君 高玉伟 夏咸柱 王全凯关键词:新城疫病毒 融合蛋白基因 克氏原鳌虾产ESBLs大肠杆菌的分离鉴定与耐药研究 2016年 为了解克氏原螯虾产ESBLs大肠杆菌的耐药流行情况,采集来自山东、江苏、浙江、湖北和辽宁五省共计198份活体克氏原螯虾肠道样品,采用头孢噻肟抗性选择性培养基培养、PCR方法和BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定/药敏系统筛选、鉴定产ESBLs大肠杆菌并检测其药物敏感性。结果显示,从198份克氏原螯虾样品中共分离获得107株产ESBLs大肠杆菌,分离率为54.0%。所有分离菌株对青霉素类、一代头孢和部分三代头孢菌素均耐药;对四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类和磺胺类药物的耐药率均在60%以上(>65株);对氨基糖苷类药物耐药率较低;多重耐药(R≥3类)菌株所占比例为86.7%(96/107),且以5类(30%,31/107)和6类耐药(28%,30/107)为主。通过试验初步获得了克氏原螯虾产ESBLs大肠杆菌耐药水平的基础数据,为克氏原螯虾细菌耐药性防控和水产品公共卫生监测奠定基础。 贾敏 周伟 韩一啸 梁冰 梁津豪 纪雪 孙洋 刘军 祝令伟 陈萍 郭学军关键词:克氏原螯虾 多重耐药 病毒宏基因组学在医学领域的应用 被引量:5 2014年 新发、再发病毒性传染病不断出现,如何快速鉴别致病病原显得尤其重要。近年来,不依赖传统培养技术的病毒宏基因组学在临床医学的运用越来越广泛。大量成功诊断的临床病例和新病毒的发现为病毒宏基因组在传染病的预防和公共卫生防控方面开拓了新的领域。本文主要对近10年来病毒宏基因组的兴起、优势及策略、在临床检测及公共卫生领域的应用进展作一综述。 范胜涛 高玉伟 夏咸柱关键词:传染病 新德里金属β-内酰胺酶的表达及活性 2013年 利用前期构建的重组表达菌Tb1(pMAL-p2X::NDM-1),以温度、时间和IPTG浓度建立三因素三水平的正交试验,对该重组蛋白诱导表达条件进行优化。用Amylose树脂对重组蛋白进行纯化,Xa因子进行切割,MALDITOF-MS鉴定蛋白。测定重组表达菌对亚胺培南的最小抑菌浓度,分光光度法测定蛋白酶的活性及EDTA抑制作用。结果显示,37℃,IPTG 0.3mmol/L,诱导8h为MBP-NDM-1融合表达的最优条件,表达量占菌体蛋白的39.2%,MALDI-TOF-MS显示重组蛋白相对分子质量为71 200.811,经Xa切割后目的蛋白相对分子质量为21 053.324,重组表达菌对亚胺培南的MIC为0.064g/L,重组蛋白对亚胺培南的米氏常数Km=69.347μmol/L,25μmol/L的EDTA可以抑制重组蛋白的酶活性。本试验对NDM-1蛋白酶活性进行了研究,为后续NDM-1酶抑制剂的研究奠定了基础。 夏力亮 张瑞安 刘军 王中强 祝令伟 纪雪 柳楠 陈硕 宋宏斌 孙洋 冯书章关键词:活性