国家自然科学基金(81160226)
- 作品数：26 被引量：118H指数：7
- 相关作者：殷明殷嫦嫦邬亚华何丁文胡文龙更多>>
- 相关机构：南昌大学第二附属医院南昌大学九江学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅资助项目江西省研究生创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组hTERT腺病毒载体的构建、包装与纯化及其意义被引量：1
- 2012年
- 目的利用分子生物技术构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因腺病毒表达载体并检测hTERT基因腺病毒转染细胞的功能表达。方法用凝胶电泳、测序、Western blot-ting等鉴定hTERT质粒。用PCR技术扩增hTERT基因,构建hTERT-PIRES2-EGFP基因载体,重组到pAd腺病毒,转染293A细胞扩增病毒。终点稀释分析法测病毒滴度。CsCl连续梯度离心纯化。结果凝胶电泳、测序和Western blotting检测hTERT基因分子量、序列以及功能是正确的。并且成功构建hTERT腺病毒,病毒浓度达2.1×1012ifu/mL。结论成功构建hTERT腺病毒,为hTERT基因治疗的基础研究和动物实验研究奠定了基础。
- 周荣平殷明崔运能张忠民麦奇光陆明徐颂金大地
- 关键词：人端粒酶逆转录酶腺病毒
- GDF-5和Dex通过Wnt/β-catenin信号通路促进rBMSCs体外成软骨分化被引量：6
- 2016年
- 目的利用生长分化因子(GDF-5)联合地塞米松(Dex)诱导大鼠BMSCs成软骨分化,并探讨Wnt/β-catenin信号通路在其中的作用。方法用全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,取P3代细胞随机分成6组:BMSCs组、BMSCs+Dex组、BMSCs+GDF-5组、BMSCs+GDF-5+Dex组、BMSCs+GDF-5+Dex+SB216763组和BMSCs+GDF-5+Dex+XAV-939组。连续诱导培养14 d,倒置相差显微镜观察细胞形态,Alcian blue染色检测细胞的蛋白聚糖,RT-PCR检测成软骨分化相关基因aggrecan、Col2、Sox9、Col1,Wnt/β-catenin信号通路相关基因Dvl1、Gsk3β、β-catenin mRNA表达,Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白和β-catenin蛋白表达。结果与BMSCs组相比,BMSCs+GDF-5+Dex组能够使诱导的细胞蛋白聚糖分泌明显增加;Aggrecan、Col2、Sox9基因表达明显增加(P<0.05);Ⅱ型胶原蛋白表达增加(P<0.05);β-catenin mRNA及蛋白表达水平也增加(P<0.05)。与BMSCs+GDF-5+Dex组相比,添加SB216763组蛋白聚糖,Ⅱ型胶原基因和蛋白表达增加(P<0.05);相反,添加XAV-939组相应的成软骨分化基因及蛋白表达下降(P<0.05)。结论 GDF-5联合地塞米松(Dex)可诱导大鼠BMSCs成软骨分化,Wnt/β-catenin信号通路可能在其中发挥促进作用。
- 汪建样殷嫦嫦邬亚华严晨王子瑶殷明
- 关键词：WNT/Β-CATENINBMSCS成软骨分化GDF-5
- NF-κB信号和MAPK通路在椎间盘退变中的研究进展被引量：2
- 2012年
- 椎间盘退变涉及诸多因素,其中由细胞外基质分解代谢和合成代谢失衡导致的基质减少发挥了很大的作用,但这些变化的发生还没被全部阐明。由丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子kappaB(NF-κB)通路介导的细胞因子在代谢失衡中发挥重要作用,所以,研究细胞因子产生作用的信号转导通路对深入了解椎间盘退变的原因及为其治疗提供了新的方向。对NF-κB和MAPK信号转导通路及其在椎间盘退变中的作用机制加以综述。
- 刘玉亮殷明梁广胜董理何丁文
- 关键词：椎间盘退变丝裂原活化蛋白激酶核因子ΚB细胞因子
- 端粒酶延缓椎间盘退变的研究进展
- 2013年
- 端粒酶是由RNA模板和蛋白亚基构成的一种高度特异性的核糖核蛋白复合体。它能通过保持端粒长度的动态平衡和调节p53-p21-pRb通路、p16Ink41-pRb通路和Wnt/β-catenin信号通路来延长椎间盘细胞的寿命和保持细胞功能,进而延缓或阻止椎间盘退变的进程。端粒酶能调节椎间盘细胞的衰老和凋亡,可望运用端粒酶基因对椎间盘退变进行预防和修复重建其结构。
- 梁广胜殷明刘玉亮何丁文
- 关键词：端粒酶椎间盘退变信号通路
- 缺氧诱导因子经典通路的拓展与干细胞调控被引量：1
- 2015年
- 缺氧诱导因子是在缺氧条件下被激活参与机体低氧适应性反应的一类核因子,对于低氧条件下维持机体生命活动起着不可或缺的作用,且与肿瘤的发生发展以及干细胞调控关系密切,本文综述缺氧诱导因子经典氧感通路信号轴和非经典信号通路以及其对干细胞调控的作用,讨论了非经典通路中沉默信息调节因子家族尤其是去乙酰化酶sirtuin-3(SIRT3)对HIFα的负性调控作用,以及M2型丙酮酸激酶(PKM2)对HIFα的激活作用。探讨了HIF1α对多种干细胞生物学的调控,发现HIF1α可抑制胚胎干细胞-外胚层干细胞(ESC-Epi SC)过渡期线粒体呼吸,从而驱使其向糖酵解代谢的转变,继而维持ESC的多能性;且HIF1α可介导间充质干细胞的定向分化,如向成骨细胞,软骨细胞,神经细胞,脂肪细胞,肌细胞等细胞的定向分化;并可促进神经干细胞增殖与迁移以及参与肿瘤干细胞的干性维持。目的阐明缺氧诱导因子经典与非经典信号通路轴及其对干细胞生物学的调控,为临床组织损伤修复组织工程乃至肿瘤的诊疗预防提供新的靶点。
- 耿书国刘频健汪建样胡文龙殷明
- 关键词：缺氧诱导因子沉默信息调节因子
- 绿原酸对过氧化氢诱导大鼠髓核细胞凋亡保护作用的研究被引量：10
- 2013年
- 目的探讨绿原酸对体外过氧化氢诱导大鼠髓核细胞凋亡的影响及机制。方法采用体外培养大鼠髓核细胞,传代后取第3代细胞进行实验。分为4组:正常对照组、绿原酸组(90μmol/L)、过氧化氢组(600μmol/L)、绿原酸+过氧化氢组。通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR检测不同组髓核细胞Bcl-2和Caspase-3基因表达。结果与正常对照组比较,过氧化氢(600μmol/L)能非常明显的诱导髓核细胞凋亡(P<0.05),绿原酸(90μmol/L)能降低过氧化氢诱导的髓核细胞凋亡,表现为细胞凋亡率减少(P<0.05),Bcl-2表达增强,Caspase-3表达减弱。结论绿原酸可抑制过氧化氢诱导的髓核细胞凋亡,其作用机制可能与促进凋亡抑制基因Bcl-2的表达及抑制Caspase-3表达有关。
- 罗元一殷明邬亚华何丁文魏强强殷嫦嫦
- 关键词：过氧化氢绿原酸细胞凋亡
- 间充质干细胞对肿瘤作用的双向性:促进或抑制被引量：1
- 2016年
- 间充质干细胞（MSCs）是具有向肿瘤组织定向迁移能力的多能干祖细胞,到达肿瘤组织的MSCs参与形成肿瘤的纤维血管组织,分化形成肿瘤相关成纤维细胞（TAFs）和血管周细胞。研究表明MSCs促进肿瘤生长和转移,也有研究显示MSCs抑制肿瘤生长。出现这种矛盾的原因尚不清楚。有研究者将MSCs作为运载抗肿瘤制剂的特异性细胞载体。
- 胡文龙邬亚华殷嫦嫦施剑明殷明
- 关键词：间充质干细胞肿瘤
- 淫羊藿素促进BMSCs成软骨分化的研究被引量：1
- 2015年
- 研究淫羊藿素在GDF-5诱导BMSCs成软骨分化过程中的作用。全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),取P3代细胞随机分成4组:对照组,淫羊藿素(Icaritin)组,Growth differentiation factor 5(GDF-5)组,Icaritin+GDF-5联合组。连续诱导培养14 d,倒置相差显微镜观察细胞形态,Alcian Blue染色检测细胞的蛋白聚糖改变,RT-PCR检测软骨分化标记基因Aggrecan、COL2、Sox9及COL1的表达情况,Western Blot检测COL2和COL1蛋白表达水平。结果提示,与对照组及GDF-5组相比,Icaritin+GDF-5联合组蛋白聚糖染色更深;软骨分化标记基因Aggrecan、COL2、Sox9明显增加;Ⅱ型胶原蛋白表达量均明显增加。淫羊藿素能够促进GDF-5诱导BMSCs成软骨分化。
- 汪建样殷嫦嫦王子瑶耿书国胡文龙殷明
- 关键词：淫羊藿素GDF-5BMSCS成软骨分化
- BMP-2联合低氧环境诱导BMSCs向软骨表型分化的研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨BMP-2联合低氧环境诱导BMSCs向软骨表型分化的可行性,并进一步研究其生物学机制。方法取4周龄健康清洁级雌性SD大鼠骨髓采用贴壁法体外培养BMSCs,取第2代细胞根据培养条件不同分为4组:常氧对照组(A组)、常氧加BMP-2诱导液组(B组)、低氧(O2浓度3%)对照组(C组)和低氧加BMP-2诱导液组(D组)。倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,培养7、14、21 d阿利新蓝染色检测各组软骨基质糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAG)分泌水平,21 d时Western blot检测细胞内Ⅱ型胶原和低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白表达水平,RT-PCR检测成软骨、成骨以及低氧相关基因表达水平。结果诱导培养21 d,D组细胞变为类圆形,细胞密度降低,细胞周边呈陷窝样,基质包裹细胞;A、B、C组均未见上述典型变化。D组阿利新蓝染色明显较其他组深,并随诱导时间延长蓝染加深,21 d时出现成片深染蓝色,其他组各时间点仅见散在少量的淡染蓝色。Western blot检测D组细胞内Ⅱ型胶原蛋白表达水平较其他组显著增高,C、D组HIF-1α蛋白表达水平较A、B组显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测D组成软骨分化相关指标Ⅱ型胶原α1(collagenⅡα1,COL2α1)、聚集蛋白聚糖表达最高,而B组成骨分化相关指标COL1α1、ALP、Runt相关转录因子2表达水平最高,C、D组低氧相关指标HIF-1α较A、B组显著增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 BMP-2联合低氧(O2浓度3%)环境可以诱导大鼠BMSCs向软骨分化,并抑制其成骨分化,HIF-1α可能是参与促软骨生成过程中的一个重要信号分子。
- 廖新根吴梨华付明福何丁文顾玉荣陈伟才殷明
- 关键词：BMP-2低氧BMSCS
- N-乙酰半胱氨酸对过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的保护及作用机制研究被引量：7
- 2014年
- 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对过氧化氢(H2O2)诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用全骨髓贴壁培养法培养SD大鼠BMSCs,随机分成5组:正常对照组、H2O2处理组、NAC组、NAC+H2O2组和LY294002干预组。流式细胞术检测各组的细胞凋亡率及细胞内活性氧水平;RT-PCR检测各组rBMSCs中FOXO1、FOXO3、FOXO4基因水平的表达;Western blot检测各组rBMSCs中Akt、p-Akt、Bcl-2的表达。结果与正常组相比,H2O2组诱导的rBMSCs凋亡数明显增高,细胞内ROS含量明显增高,FOXO1、FOXO3、FOXO4基因水平的表达量明显下降;NAC明显抑制了rBMSCs凋亡和ROS产生,上调了FOXO1、FOXO3、FOXO4基因水平的表达,增加了细胞内p-Akt和Bcl-2的表达,但LY294002抑制剂明显抑制了NAC对氧化应激后rBMSCs的上述功能。结论 N-乙酰半胱氨酸可通过激活PI3K-Akt信号途径抑制细胞内活性氧的产生、上调FOXO1、FOXO3、FOXO4基因水平及抗凋亡Bcl-2的表达来保护BMSCs免受氧化应激引起的凋亡。
- 谢荣辉周师洁殷明殷嫦嫦程细高陈伟才林思文施剑明耿书国
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸骨髓间充质干细胞凋亡
