四川省教育厅资助科研项目(2006C010)
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 相关作者:徐倩张春来张春燕赵春玲杨烨更多>>
- 相关机构:泸州医学院更多>>
- 发文基金:四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人参皂甙Rb1对马桑内酯致痫大鼠海马组织蛋白质组的影响被引量:4
- 2011年
- 目的:运用双向电泳技术获得可能与马桑内酯(CL)癫痫发作及人参皂甙Rb1(GRb1)神经保护作用有关的蛋白质成分,探讨海马组织蛋白质在癫痫发生发展过程中的作用和地位以及GRb1对其的影响。方法:分别提取对照组、CL致痫组和GRb1+CL致痫组动物海马组织蛋白,双向电泳分离,ImageMaster 2D Platinum 5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:成功鉴定出6个蛋白质分别是:脑肌酸激酶(brain creatine kinase)、内吞蛋白A1(endophilin-A1)、UPF0628蛋白C10orf96同源物(UPF0628 protein C10orf96 homolog)、细胞色素P-450(cytochrome P-450)、光导素样蛋白(phosducin-like protein)及桥整合蛋白3(bridging integrator 3)。其中前3个蛋白质在GRb1+CL致痫组表达低于CL致痫组,后3个蛋白质在GRb1+CL致痫组表达低于对照组。结论:CL致痫组、GRb1+CL致痫组和对照组表达的蛋白质存在明显差异。鉴定出的6个差异表达的蛋白质可能与GRb1的神经保护作用有关,其中brain crea-tine kinase、endophilin-A1和UPF0628 protein C10orf96 homolog可能与CL所致癫痫发作有关。
- 徐倩张春来杨烨张春燕赵春玲
- 关键词:马桑内酯人参皂甙RB1蛋白质组
- 人参皂甙Rb1对马桑内酯癫痫的作用及海马蛋白组表达的影响被引量:1
- 2011年
- 目的:观察人参皂甙Rb1(GRb1)对马桑内酯(CL)所致大鼠癫痫及海马神经元损伤的作用,运用双向电泳(2-DE)技术获得可能与CL癫痫发作及GRb1神经保护作用有关的蛋白质成分,探讨海马组织蛋白质在癫痫发生发展过程中的作用和地位及GRb1对其的影响。方法:雄性成年SD大鼠随机均分为对照组、CL组和GRb1+CL组(n=10)。GRb1+CL组在实验前3d,大鼠每日灌胃GRb1(1.5mg/ml,30mg/kg),另2组灌胃等量生理盐水;实验日CL组和GRb1+CL组腹腔注射CL(1mg/ml,4mg/kg),对照组腹腔注射等量生理盐水。观察各组大鼠的行为学变化3h。各组半数动物麻醉后灌注固定,HE染色观察海马组织学改变。半数动物,断头处死剥离海马组织并提取蛋白,双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster 2D Platinum v5.0软件差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:①癫痫发作的行为表现:对照组大鼠未见痫性发作;CL组痫性发作程度较高(Ⅲ~Ⅴ级);与CL组相比,GRb1+CL组大鼠的痫性发作程度明显减低,潜伏期变长,持续时间变短(P<0.01)。②海马组织学(HE染色)改变:对照组大鼠海马组织结构正常;CL组大鼠可见海马神经元变性坏死,尤以CA3区和齿状回最明显;GRb1+CL组大鼠海马神经元结构无明显改变。③获得大鼠海马组织蛋白质组双向电泳图谱;差异表达蛋白质组分析显示GRb1+CL组与对照组差异蛋白斑点84个,GRb1+CL组与CL组差异蛋白斑点120个。④鉴定出6个蛋白质分别是:脑肌酸激酶(brain creatine kinase)、吞蛋白A1(endophilin-A1)、UPF0628蛋白C10orf96同源物(UPF0628 proteinC10orf96 homolog)、细胞色素P-450(cytochrome P-450)、磷导素样蛋白(phosducin-like protein)及桥整合蛋白3(bridging inte-grator 3)。其中前3个蛋白质在GRb1+CL组表达低于CL组,后3个蛋白质在GRb1+CL组表达低于对照组。结论:GRb1可减轻CL所致大鼠癫痫的发作程度及海马神经元损伤
- 赵春玲张春来徐倩杨烨张春燕
- 关键词:马桑内酯癫痫人参皂甙RB1双向电泳蛋白质组
- 人参皂甙Rbl对大鼠神经细胞表达蛋白质组的影响
- 2012年
- [目的]研究人参皂甙Rbl对大鼠神经细胞表达蛋白质组的影响。[方法]常规培养大鼠神经细胞,将其随机分为2组,试验组加入5μg/ml Rbl,对照组加入等量的培养基,药物作用20 min,裂解细胞,提取全细胞蛋白。双向电泳(2-DE)分离提取物,用ImageMaster2D Platinum v5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白质。[结果]通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,试验组的2-DE图谱共检出蛋白斑点418个,其中226个为差异表达的蛋白斑点;经质谱鉴定,与Rbl作用相关的2个差异表达的蛋白斑点包括:细胞色素P-450、光导素样蛋白,它们均属于磷酸化蛋白质。[结论]该研究表明Rbl对大鼠神经细胞的作用极有可能是通过相应的细胞信号转导网络系统来实现的。
- 张春燕徐倩赵春玲张春来
- 关键词:人参皂甙大鼠神经细胞生物信息学
- 人参皂甙Rbl作用后大鼠神经细胞蛋白质组双向电泳技术的建立被引量:3
- 2012年
- 目的:建立人参皂甙Rbl作用后大鼠神经细胞蛋白质组双向电泳分离体系,提高其分辨率和重复性。方法:人参皂甙Rbl 50mg/L作用于大鼠神经细胞,提取全蛋白,按标准条件对蛋白质进行双向电泳分离,并对各个关键因素进行了优化。结果:最终选择的裂解液配方是1%TBP,4%CHAPS,0.2%Bio-Lyte,40mmol/L Tris,8mol/L尿素,2mol/L硫脲;使用pH 4~7的IPG胶条进行被动水化上样,等电聚焦采用缓慢升压模式,电泳参数根据Bio-Rad公司的预设方案进行调整;改良硝酸银法进行蛋白质斑点染色。从而获得了满意的蛋白质组双向电泳图谱。结论:成功建立了人参皂甙Rbl作用后大鼠神经细胞蛋白质组双向电泳分离体系,具有较高的分辨率和重复性。
- 张春燕徐倩赵春玲张春来
- 关键词:人参皂甙RB1双向电泳蛋白质组