江苏省自然科学基金(BK2011636)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：南京农业大学更多>>
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- 基因枪介导的小麦叶片瞬间表达体系的优化及应用被引量：1
- 2014年
- 麦类作物的叶片单细胞瞬间表达是一种高效而快速的基因功能验证方法,尤其适用于麦类作物与白粉病菌的互作系统,但由于影响参数较多、参检基因表达频率低而尚未广泛应用。本研究使用绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,对影响表达效率的多个转化参数进行优化,筛选出表达频率最高的参数组,即小麦叶片采用固体保鲜培养基固定,钨粉用量为每枪300μg,质粒DNA用量为每枪750ng,可裂膜氦压为1 350psi,可裂膜与受体膜距离6mm,受体与阻挡网距离6cm,与先前报道的方法相比表达频率有显著提高。应用上述参数在感病小麦品种离体叶片中过量表达一个已知具有抗白粉病功能的簇毛麦SGT1基因,结果表明该基因瞬间表达使互作细胞吸器指数降低,表现为对白粉病菌侵入和吸器形成具有抑制作用,在一定程度上增强了表达细胞对白粉病菌的抗性,使目标基因的抗性功能再次得到印证。本研究还进一步运用该优化体系开展瞬间表达介导的基因沉默(TIGS)实验,将携带抗白粉病基因Pm21的抗病小麦品种南农9918和感病小麦品种扬麦158中的内源SGT1和RAR1分别或同时沉默,结果显示南农9918的叶片表皮与白粉菌互作细胞的吸器指数增高,在一定程度上降低了表达细胞对白粉菌的抗性。而扬麦158中互作细胞的吸器指数较对照变化不显著。说明这两个基因均分别参与了Pm21介导的抗白粉病信号途径,且二者共同作用与白粉病抗性关系更加密切。
- 邢莉萍钱晨李颖波俞奇曹爱忠王秀娥陈佩度
- 关键词：小麦
- 小麦Mlo反义基因的转化及转基因植株的白粉病抗性分析被引量：8
- 2013年
- 采用基因枪法将小麦反义Mlo基因导入扬麦158和济麦20的幼胚愈伤组织中,在含除草剂的分化培养基上经两轮筛选,获得抗性再生植株。PCR检测、PCR-Southern杂交、基因组DNA斑点杂交和除草剂BASTA抗性分析结果证实已获得转基因扬麦158和济麦20阳性植株,荧光定量表达分析亦证明Mlo基因发生沉默。对T0和T1代转基因植株的白粉病抗性鉴定表明,有6个转基因株系高抗白粉病。对T1代转基因小麦接种白粉菌后孢子发育的显微观察结果显示,Mlo反义基因的导入明显加快了乳突的形成和维持时间,有效抑制了吸器的发育,因而使转Mlo反义基因材料表现抗病性。
- 邢莉萍钱晨李明浩曹爱忠王秀娥陈佩度
- 关键词：基因枪转化
- 普通小麦望水白矮秆多蘖突变体的鉴定及遗传分析
- 利用理化诱变创造新的遗传变异可以为作物遗传改良提供新的遗传资源，分蘖和株高是与小麦产量相关的重要农艺性状.本研究通过EMS处理普通小麦品种望水白，诱变得到一个矮秆多蘖突变体NAUH167.与野生型相比，突变体株高从132...
- 卞能飞温明星高润红王海燕王秀娥
- 关键词：小麦突变体株高分蘖
- 望水白及其感赤霉病突变体受赤霉菌诱导基于基因芯片的转录谱分析
- 小麦品种望水白是高抗赤霉病的地方品种,利用快中子辐射望水白获得了一个稳定的干赤霉病突变体。前期研究表明,该突变体由于定位于小麦3B染色体短臂上的主效QTL缺失,导致其感病性提高。为了研究望水白响应赤霉菌侵染的分子机制,本...
- 贾新平肖迸赵维萍金夏红陈启广何立强曹爱忠王海燕王秀娥
- 关键词：小麦赤霉病基因芯片差异表达基因
