国家自然科学基金(30271139)
- 作品数：14 被引量：88H指数：6
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- GFAAS测定乙醇-EDTA法分离血清中不同形态的铜和锌被引量：2
- 2010年
- 血清中元素不同形态含量变化与人体营养和健康有着密切关系。文章利用两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定了血清中非蛋白结合的铜和锌。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,通过贝克曼离心机高速离心,可将蛋白质完全沉降。在血清中加入EDTA可将白蛋白结合的铜和锌脱落,转化为非蛋白结合铜和锌,从而可测得球蛋白和白蛋白分别结合的铜和锌含量。用氘灯校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定,方法检测限：Cu,1.2μg.L-1 Zn,0.098μg.L-1。回收率：Cu,92.3%~104%,Zn,90%~107%。利用此方法测定了健康人及肿瘤患者血清和肝豆状核性患者中球蛋白、白蛋白及结合的铜与锌以及游离的铜和锌,并与健康人作了对比。
- 张源林哲绚李慧彭琳罗红军李伟秋罗文鸿
- 关键词：蛋白质铜锌GFAAS
- 阿魏酸等五种酚类物质对DNA氧化损伤的影响被引量：15
- 2006年
- 背景与目的用单细胞凝胶电泳法研究阿魏酸、咖啡酸、香草酸、阿司匹林(乙酰水杨酸)和水杨酸五种酚类物质对DNA损伤的影响。材料与方法取正常人外周血淋巴细胞与不同浓度(0、50、100、500μmol/L)阿魏酸、咖啡酸、香草酸、阿司匹林、水杨酸五种酚类化合物于37℃下共同孵育30min后用或不用H2O2于4℃下处理10min,采用单细胞凝胶电泳法对DNA损伤进行分析、比较。结果分别用五种酚类化合物对淋巴细胞进行预处理后,经过H2O2处理,与阳性对照组相比,彗星尾距都有不同程度的缩短,其中阿魏酸、香草酸的作用最明显,并随着剂量的增加,尾距有减小的趋势(各浓度组之间没有显著差异),而咖啡酸、阿司匹林、水杨酸在浓度为500μmol/L时,尾距较低浓度组(50、100μmol/L)有所增加,以咖啡酸最为显著。用500μmol/L咖啡酸、阿司匹林、水杨酸与细胞共同孵育30min后(未经H2O2处理),咖啡酸可以导致DNA的明显断裂损伤,与对照组之间的差异有统计学意义,而阿司匹林、水杨酸与对照组相比,其彗星尾距没有显著变化。结论上述五种酚类物质均表现出了一定的保护DNA抗氧化活性,其中以咖啡酸保护DNA的作用最弱,而且咖啡酸单独与细胞作用时,可以产生DNA断裂损伤;阿司匹林和水杨酸在高浓度组其尾距较低浓度组又有所缩短,阿魏酸和香草酸抗氧化效果较好。
- 张俏忻罗文鸿李慧林哲绚
- 关键词：阿魏酸咖啡酸乙酰水杨酸香草酸单细胞凝胶电泳
- 利用酪氨酸残基的共振瑞利散射研究溶液中蛋白质构象被引量：7
- 2006年
- 基于酪氨酸残基K带激发峰在较高浓度的蛋白质溶液中表现出特征散射峰,通过Δλ=0同步荧光扫描识别,建立用荧光分光光度法测定酪氨残基K带的共振散射峰强度及其波长位移来推测溶液中蛋白质构象变化的新方法。方法不受蛋白质色氨酸残基的干扰,图谱简单明了直观。文章叙述了方法建立的实验基础,并用构建的方法研究了盐效应、酸碱性效应对蛋白质构象变化的影响,最后通过测定不同温度下酶活性的实验验证了方法对温度影响酶蛋白质构象变化的分析的正确性。
- 张源林哲绚李慧罗文鸿
- 关键词：蛋白质构象共振瑞利散射
- 甲胺对大鼠内皮的慢性毒理研究被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨Wistar大鼠体内低剂量甲胺的慢性分布是否能导致氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)活性上调而诱导内皮的损伤。方法:甲胺组20只、对照组10只分别给以甲胺(50 mg/kg)、NS(50 mL/kg)持续灌胃6个月后,取胸主动脉免疫组化染色,光镜下观察血管假性血友病因子(vWf)的表达;取升主动脉及心内膜透射电镜下观察内皮细胞的超微结构。检测血浆中SSAO活性、NO及甲醛浓度。结果:甲胺组血浆SSAO活性及甲醛浓度均高于对照组,NO浓度低于对照组,但两组比无统计学意义(P>0.05)。vWf在甲胺组内膜、内膜下层均有较明显表达,对照组只有弱表达。甲胺组内皮细胞超微结构呈不规则及浓缩核,对照组内皮细胞呈现正常细胞超微结构。结论:低剂量甲胺在大鼠体内的慢性分布能够诱导内皮损伤。
- 罗文英林哲绚李慧罗文鸿
- 关键词：甲胺内皮
- 血管内皮损伤危险因素研究进展被引量：19
- 2005年
- 血管内皮细胞具有多种重要的生物学功能 ,其损伤在心血管疾病的发生发展中起着重要作用。迄今为止发现衰老、吸烟、糖尿病等诸多危险因素。近年来内源性甲醛 (FA)也作为动脉粥样硬化的危险因素被提出。它是人体自身的代谢产物 ,由于FA化学性质活泼 ,易与多种生物分子产生化学反应 ,因此循环血中如长期存在过高浓度的内源性FA可能会引起内皮损伤 ,进而诱发各种心血管疾病。
- 林哲绚罗文鸿李慧
- 关键词：血管内皮损伤内源性FA循环血活泼化学反应
- 兔血浆SSAO的分离纯化及其酶动力学研究被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)。本文研究以甲胺为底物的兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数。材料与方法:利用弱阴离子交换柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶动力学参数。结果:从兔血浆蛋白中分离得到两个具有SSAO酶活性的蛋白组分A和B。以甲胺为底物,未处理的血浆SSAO的酶动力学参数Km=(1.83±0.13)mmol/L,Vmax=(0.12±0.003)nmol/(min·mg)。蛋白组分B的酶动力学参数Km值(2.05±0.43)mmol/L小于蛋白组分A的Km值(3.14±0.63)mmol/L。组分B的酶动力学参数Vmax值(1.46±0.10)nmol/(min·mg)小于组分A的Vmax值(2.85±0.20)nmol/(min·mg)。结论:兔血浆含有两种SSAO酶,均可以催化甲胺氧化脱氨生成甲醛;组分A、B动力学特征有所不同。
- 门华涛罗红军李慧罗文鸿
- 关键词：甲胺酶动力学
- 石墨炉原子吸收光谱法测定血清中非蛋白结合铜和锌被引量：4
- 2009年
- 建立两步沉淀蛋白质-石墨炉原子吸收法测定血清中非蛋白结合铜和锌的方法。无水乙醇以2∶1与血清混合后,再经70℃温度变性处理,可将蛋白质完全沉降。用氘灯校正背景,石墨炉原子吸收法进行测定,方法检测限:Cu,1.2μg.L-1,Zn,0.098μg.L-1。回收率:Cu,92.3%～104%,Zn,为90%～107%。利用此方法测定了肿瘤患者血清中游离铜与锌,并与健康人作了对比。
- 张源林哲绚李伟秋张俏忻李慧罗红军罗文鸿
- 关键词：铜锌GFAAS
- 甲胺对兔心血管内皮的慢性毒性(英文)被引量：1
- 2008年
- 目的探讨甲胺在体内慢性分布是否导致氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)活性上调从而诱导心血管内皮损伤。方法新西兰兔灌胃给予甲胺100mg.kg-1,每日1次,连续6个月,隔周称量体重调整给药量。分析动脉血中循环内皮细胞数、血清NO浓度和主动脉内皮细胞的超微结构。高效液相色谱法检测血浆SSAO活性及甲醛浓度。结果甲胺组兔动脉血中内皮细胞数、血清NO浓度、血浆SSAO活性及甲醛浓度明显增高。主动脉内皮细胞超微结构显示核内大量包函体、核浓缩和核分裂等病理形态学改变。结论低剂量甲胺在体内慢性分布能够诱导SSAO活性上调而引起心血管内皮损伤。
- 罗文英林哲绚李慧罗文鸿
- 关键词：甲胺甲醛毒理学
- 彗星电泳法检测H_2O_2对人淋巴细胞DNA损伤及其激光扫描共聚焦显微境下的观察和三维重建被引量：6
- 2003年
- 目的 :应用彗星电泳法于荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察人淋巴细胞经H2O2 作用后的DNA损伤情况。 方法 :人淋巴细胞经不同浓度H2O2(0、10、20、40、80μmol/L)作用20min,或20μmol/LH2O2 作用不同时间(0、10、20、30min)后 ,采用彗星电泳法 ,荧光显微镜下观察、照相 ,对尾长、总彗星长度、尾距进行测量和分析。同时采用激光共聚焦显微镜(LSCM)进行观察和三维重建 ;比较了不同染料(PI、AO、EB、Hochest33258)的染色效果。 结果 :H2O2 作用浓度为0、10、20、40、80μmol/L时 ,尾距( x- ±s)分别为0.001±0.002、0.31±0.35、1.23±0.96、2.82±1.38、3.52±0.96(P<0.01) ;作用时间为0、10、20、30min时 ,尾距( x- ±s)分别为0.05±0.09、0.22±0.30、1.62±0.93、1.89±1.09(P<0.01)。尾长、总彗星长度也有显著性增加 ,经统计学检验 ,P<0.01。与荧光显微镜相比 ,LSCM下的"彗星"轮廓十分清晰 ;PI和EB染色效果较好。 结论 :H2O2 能剂量依赖性和时间依赖性地导致人外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤。利用LSCM构建"彗星"的三维图像将更有利于DNA损伤的准确测量。鉴于染色效果的差异 。
- 张俏忻罗文鸿李慧林哲绚
- 关键词：彗星电泳淋巴细胞DNA损伤激光扫描共聚焦显微镜
- 鼠主动脉内皮细胞培养被引量：8
- 2004年
- 血管内皮细胞 (ECs)具有多种重要的生物学功能 ,而鼠类是常用的动物模型 ,因此建立简易、有效、重复性好的分离培养鼠主动脉ECs的方法 ,在心血管疾病、肿瘤扩散。
- 林哲绚罗文鸿李慧
- 关键词：主动脉内皮细胞免疫疾病肿瘤扩散血管内皮细胞EC
