安徽省高校省级自然科学研究项目(2006KJ080C)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：程勇周颖凌斌冯定庆沈国栋更多>>
- 相关机构：安徽省立医院安徽省分子医学重点实验室安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA对白血病细胞株HEL中EDAG-1基因的干涉作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨抑制胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法收集重组质粒转染包装病毒细胞的上清转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,运用MTT检测转染细胞的增殖能力,并将稳定转染的细胞株种植到裸鼠皮下检测成瘤情况。结果成功建立了抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。与HEL/negative相比,HEL/siRNA细胞株增殖速度降低(P<0.05),接种裸鼠皮下的肿瘤生长明显减慢(P<0.05)。结论沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖程勇高宗侠肖敏冯定庆沈国栋凌斌
- 关键词：EDAG-1RNA干扰白血病
- siRNA靶向EDAG-1基因对K562细胞株生长的影响被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)是造血系统发育相关的新基因,定位于9q22。本研究探讨抑制EDAG-1基因的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,脂质体介导的重组质粒转染包装病毒细胞(PT67),收集细胞上清感染K562细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,应用MTT、流式细胞仪检测转染细胞的增殖能力及细胞周期。结果:成功构建了靶向EDAG-1基因的逆转录病毒重组质粒,建立了抑制EDAG-1基因表达的K562细胞株。抑制EDAG-1基因表达的细胞株增殖速度、增殖指数(PI)、增殖活性(SPF)相应降低,其G0/G1期细胞比例明显升高。结论:EDAG-1基因的沉默可以抑制白血病细胞株的增殖,使其阻滞在G0/G1期,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖凌斌程勇朱园园冯定庆沈国栋程志祥
- 关键词：EDAG-1RNA干扰白血病细胞周期
- 针对EDAG-1基因的siRNA抑制白血病细胞的生长及IL-8分泌被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨抑制胚胎发育相关基因-1(embryonic develop-associated gene1,EDAG-1)表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,将脂质体介导的重组质粒转染包装产病毒细胞株PT67;收集细胞上清液转染HEL细胞株,经嘌呤霉素筛选获得稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株;RT-PCR法检测EDAG-1基因的抑制情况,MTT法检测转染细胞的增殖能力,同时采用RT-PCR和ELISA法检测转染后细胞中IL-8的表达水平。结果:成功构建获得靶向EDAG-1基因的反转录病毒载体,筛选获得抑制EDAG-1基因表达的HEL细胞株。EDAG-1基因被抑制的细胞株增殖速度降低,IL-8的分泌水平同时相应减低。结论:沉默EDAG-1基因的表达可以抑制白血病细胞株的增殖和IL-8的分泌,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖程勇肖敏高宗侠程志祥冯定庆凌斌
- 关键词：小分子干扰基因肿瘤抑制基因
- RACE策略扩增EDAG-1基因3′端及序列分析被引量：1
- 2007年
- 目的通过RACE(rapid amplification of cDNA Ends)技术分析K-562细胞株中高表达的EDAG-1基因3′端。方法采用Marathon-ReadyTMcDNA方法扩增HLCM cDNA(人白血病细胞株K-562,Marathon-ReadyTMcDNA)的EDAG-1基因3′端,将扩增的特异带回收纯化,构建到原核表达载体中,提取质粒并且测序分析。结果第1次扩增、第1次巢式PCR扩增未见明显特异带,2次巢式PCR结果可见200bp特异带,回收后连接到pMD18-T中,转化到大肠杆菌中并筛选阳性菌落,提取质粒测序,结果未发现该段序列存在点突变、插入或缺失。结论EDAG-1基因在白血病细胞株K-562中高表达的机制可能与3′端无关。
- 程勇周颖张红雁马军钱立庭赵于飞汪思应
- 关键词：RACE技术CDNA
