河北省自然科学基金(C2011204041)
- 作品数：7 被引量：25H指数：4
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- 美国白蛾高毒力白僵菌菌株的紫外线诱变选育被引量：8
- 2016年
- 【目的】对分离自美国白蛾幼虫虫尸的1株白僵菌菌株BH01进行紫外线诱变,以获得高毒力突变株,为美国白蛾的生物防治提供新的工程菌株。【方法】将白僵菌的孢子悬浮液置于紫外灯下进行诱变处理,诱变处理后获得的菌株进行培养后以产孢量超过原始菌株2倍以上作为依据筛选正向突变菌株,测定其对美国白蛾5龄幼虫的致病力,筛选高毒力突变株进行继代培养,研究其产孢量和致病力的稳定性。【结果】对原始菌株BH01经紫外线诱变处理后获得28个菌落,孢子校正死亡率为85.5%,将获得的菌落重新接种于PDA平板上得到产孢量高于原始菌株2倍以上的正突变株BH01-5、BH01-12、BH01-25。其中诱变菌株BH01-5对美国白蛾5龄幼虫的校正死亡率明显低于原始菌株,BH01-25与原始菌株相当,而BH01-12的校正死亡率和LT50值分别为原始菌株的1.30和0.68倍,具有显著差异。将突变株BH01-25和BH01-12继代培养6次,发现诱变菌株BH01-25菌株在继代过程中产孢量和致病力明显降低,表现出与原始菌株类似的趋势,但其产孢量始终高于原始菌株,另外,原始菌株培养第4代时即开始降低,BH01-25至第6代时才出现明显的降低,表现出了更好的稳定性。诱变菌株BH01-12在试验的6代继代培养过程中,无论产孢量还是对美国白蛾幼虫的致病力方面均未出现下降,且均明显优于原始菌株。【结论】经过对分离自美国白蛾幼虫的1株球孢白僵菌BH01进行紫外诱变,得到了产孢量和致病力均高于原始菌株的突变株BH01-12,该菌株经过继代培养后,其产孢量和致病力均未出现降低,表现出一定的遗传稳定性,具有很好的生产和应用前景。
- 苏筱雨王婧任晓婧李会平
- 关键词：白僵菌紫外诱变产孢量美国白蛾
- 白僵菌菌株退化的酯酶同工酶比较分析被引量：1
- 2014年
- 白僵菌是桑天牛的生物防治菌种之一。为探究白僵菌菌种退化的遗传机理，以便利用生物工程技术控制菌种退化、提高其生物防治效率，采用酯酶同工酶技术分析各代白僵菌株在蛋白质水平的变异情况，结果表明：球孢白僵菌酯酶同工酶酶谱共出现2-7条酶带，随着传代次数的增加，其主要酶带一直存在且酶谱类型未变，但酶的活性在不断减弱，尤其是几条主要酶带（A、B、E、C ）的活性变化更为明显；从聚类图中各菌株排列次序来看，各代菌株按照传代顺序排列，与第1代菌株比较，继代次数越多其间的类间距越大，变异越大，相似度越低，表现出一定的遗传多样性，严重影响其杀虫效果，说明酯酶同工酶技术可以在一定程度上反映白僵菌菌株的退化。
- 张云龙岳素红张娣李会平
- 关键词：白僵菌酯酶同工酶
- 桑天牛幼虫致病性白僵菌菌株退化的RAPD分析被引量：6
- 2013年
- 白僵菌是桑天牛的生物防治菌种之一,探究白僵菌菌种退化的遗传机理有助于利用生物工程技术控制菌种退化,提高其生防效率。利用RAPD技术分析第1、6、12、14、16、18和20代白僵菌菌株在基因水平的变异情况,结果表明各代菌株间既有共有的条带,同时又有谱带的增加或减少,与第1、6代菌株相比,第12代菌株的基因组DNA发生了明显的变化,第14代时继续变化,之后的第16、18和20代菌株又趋于稳定。供试的7代菌株间的遗传距离变化范围在0.05～0.60之间,存在较明显的遗传差异,且随传代次数增加,菌株的菌丝生长量增大,产孢能力降低和对桑天牛幼虫致病能力降低等检测结果具有一定的一致性。研究结果提示,可利用RAPD技术进行桑天牛幼虫致病性白僵菌菌株退化的早期遗传检测。
- 李会平魏晓鹏岳素红
- 关键词：白僵菌传代RAPD分析致病力
- 桑天牛生物防治专用高毒力球孢白僵菌菌株的紫外线诱变选育被引量：4
- 2013年
- 白僵菌是蛀干害虫桑天牛的生物防治菌种。利用紫外线对前期筛选出的生防用白僵菌菌株Bb00进行诱变,筛选出几丁质酶活力高的突变株,再测定其对桑天牛幼虫的致病力,获得毒力高于出发菌株的突变株Bb00-3和Bb00-4。用这2个菌株的1×108mL-1孢子悬液喷施桑天牛幼虫,至处理第6天时的校正死亡率分别达86.75%和79.95%,致死中时(LT50)分别为4.13 d和4.46 d,与出发菌株相比具有显著差异(P<0.05)。突变株Bb00-3经继代培养6代,每代的产孢量始终高出相应代数出发菌株的1倍以上,6次继代过程中亦没有出现致病力的明显降低,表现出较好的遗传稳定性。
- 卢振起黄秋娴李雯王婧李会平
- 关键词：球孢白僵菌紫外线诱变桑天牛毒力
- 应用白僵菌防治美国白蛾的潜力(英文)被引量：7
- 2015年
- [目的]测定来自不同寄主和生境的白僵菌对美国白蛾的致病力,以明确白僵菌应用于美国白蛾的生防潜力。[方法]以自土壤诱集的白僵菌BS04,BS05,BS08菌株和分离自美国白蛾幼虫和桑天牛幼虫的BH01,BI05为供试菌株,利用POTTER喷雾塔对美国白蛾幼虫用1×108孢子·m L-1的白僵菌孢子悬浮液进行喷雾处理,逐日观察记载死亡率。对筛选出的高毒力菌株用1×104,1×105,1×106,1×107和1×108孢子·m L-1系列浓度的白僵菌孢子悬浮液进行喷雾以测定其致死中浓度LC50。对筛选出的高毒力菌株进行野外田间试验,共设置白僵菌BH01的8×108孢子悬浮液,4.5%高效氯氰菊酯2 000倍液和清水对照3个处理,用泰山ft-796型喷雾器进行喷雾,分别于处理后3,5和7天调查统计死亡率。[结果]BS08,BH01和BI05菌株接种美国白蛾幼虫8天后,其死亡率为70%～85%,而另外2个菌株的致死率仅为32.61%和30.43%,其致死中时LT50值亦明显低于菌株BS04和BS05。利用不同孢子浓度的悬浮液对美国白蛾幼虫进行接种,进一步测定了上述3个菌株的致死中浓度,菌株BH01的LC50值为1.39×106孢子·m L-1,明显低于菌株BS08和BI05（分别为1.34×107和2.11×107孢子·m L-1）。田间试验表明,处理7天后,BH01的防治效果达88.84%,与4.5%高效氯氢菊酯无明显差异。[结论]白僵菌BH01菌株的108孢子·m L-1孢子悬浮液对美国白蛾幼虫具有较高的毒力,显示出用于防治美国白蛾幼虫的生防潜力。
- 李会平黄秋娴王婧李雯
- 关键词：美国白蛾白僵菌生物防治
- 球孢白僵菌耐吡虫啉突变株的紫外线诱变选育被引量：1
- 2014年
- 球孢白僵菌是桑天牛的生物防治菌种，选育对杀虫剂吡虫啉耐受性较强的球孢白僵菌突变株，有益于利用生物防治与化学防治的协同效应防治桑天牛。在含吡虫啉的平板培养基上，利用紫外线对前期筛选出的球孢白僵菌菌株Bb00进行诱变处理，分离筛选到对吡虫啉敏感性明显降低的突变菌株Bb00-UVY1、Bb00-UVY4和Bb00-UVY7，吡虫啉对3个突变菌株的半数最大效应浓度（EC50）分别为原始菌株的13．35、8．84和12．40倍。对其它杀虫剂的交互耐受性试验表明，突变株Bb00-UVYl与Bb00-UVY7对常用杀虫剂阿维菌素、毒死蜱、灭幼脲和氯氰菊酯的交互耐受性更好，这4种杀虫剂对2个菌株的生长抑制率分别在3．08％-12．10％和3．24％～10．21％之间。耐药稳定性试验表明，突变菌株Bb00-UVY1和Bb00-UVY7经连续6次转接后，对吡虫啉的耐受性变化不大，表明突变菌株经传代培养其耐药性能够稳定遗传。
- 岳素红卢振起刘存亮李会平苏筱雨卜志国赵恒刚
- 关键词：球孢白僵菌吡虫啉耐药性
- 白僵菌RAPD-PCR反应体系优化被引量：1
- 2012年
- 为了建立一套适宜于白僵菌(Beauveria bassiana)退化研究的RAPD-PCR反应体系及反应程序,通过采用L16(45)正交试验及退火温度和循环次数的单因素优化对反应体系中的各因素进行优化组合。结果表明:20μL PCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为,10×Buffer 2μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4μL,4种dNTP(各2.5mmol/L)0.8μL,随机引物(10μmol/L)1.4μL,TaqDNA聚合酶(5 U/μL)0.4μL,模板DNA(10 mg/L)1μL。反应条件为,94℃预变性2 min,94℃变性30 s,38℃退火40 s,72℃延伸1 min,循环次数40次,72℃延伸5 min。
- 魏晓鹏李会平黄大庄唐秀光
- 关键词：白僵菌
