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江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(xm04-62)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
刘秀梵
刘文博
张小荣
吴艳涛
焦新安
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相关机构:
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发文基金:
江苏省普通高校研究生科研创新计划项目
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刘文博
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刘秀梵
传媒
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病毒学报
年份
1篇
2007
共
1
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表达禽流感病毒特异性siRNA分子减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建
被引量:4
2007年
为了寻找一种新的短干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)片段的表达和递送系统,并进行评价,根据禽流感病毒核苷酸序列,设计了3条分别针对A型禽流感病毒核衣壳蛋白、聚合酶A和H5亚型禽流感病毒血凝素的特异性siRNA分子,人工合成相应DNA片段,退火后形成双链,与阴性对照片段分别连接到构建的pSIREN—ASD ZsGreen载体鼠源U6启动子下游,测序鉴定证实获得了阳性质粒,分别命名为PAZ—NP、PAZ-PA、PAZ—HA和PAZ-NC,1ng的质粒可以完全抑制50个PFU的禽流感病毒在MDCK细胞上的复制,细胞不产生任何病变,细胞上清的血凝效价为2^0,而对照组细胞在病毒感染36~48h后细胞变圆、死亡、脱落,其细胞上清的血凝效价可达2^4。将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550得到重组沙门氏菌X4550(PAZ—NP)、X4550(PAZ-PA)、X4550(PAZ—HA)和X4550(PAZ-NC)。对4日龄雏鸡口服1×10^9菌落形成单位(CFU)的重组菌后第1d、7d、15d用10。ELDso的H5亚型AIV进行攻毒,最后一次攻毒后观察15d,实验结束时采泄殖腔棉拭子对存活鸡进行病毒分离。结果表明,表达不同的siRNA分子对雏鸡有一定的保护力,保护率为27%~50%不等,存活鸡泄殖腔棉拭子未分离到病毒,说明重组减毒沙门氏菌携带质粒在体内产生的siRNA能够对机体产生一定保护力。
刘文博
张小荣
曹永忠
王海燕
吴艳涛
焦新安
刘秀梵
关键词:
减毒鼠伤寒沙门氏菌
SIRNA
H5亚型禽流感病毒
递送系统
保护力
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