国家自然科学基金(81072008)
- 作品数：6 被引量：11H指数：3
- 相关作者：彭志海严东旺唐华美姜韬王权更多>>
- 相关机构：上海市第一人民医院宁夏医科大学宁夏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 增殖1阻断基因在肝癌组织中上调并促进癌细胞的迁移被引量：5
- 2013年
- 目的观察增殖1阻断（BOPl）基因在肝细胞肝癌中的表达，以及对人肝癌细胞株HepG2增殖和迁移能力的影响。方法运用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测45例肝癌及正常组织中BOPlmRNA的表达量，比较其差异。构建pEGFP—N1．BOPl真核表达载体，并通过脂质体质粒转染HepG2细胞，运用细胞计数试剂盒（CCK_8）了解BOPl对细胞增殖的影响，划痕实验观察BOPl过表达对HepG2细胞运动迁移的影响。结果45例肝癌组织中BOPlmRNA表达水平ACt（为BOPl基因的ct值减去内参后所得）为15．164-1．86，对应正常组织表达水平△ct为17．48±2．68，癌组织中BOPl基因表达明显高于正常组织（P〈0．01）。细胞实验结果显示实验组吸光度值显著高于对照组（P〈0．05）；实验组向划痕部位的迁移速度明显快于对照组，72h对照组划痕部位仍有裂隙，而实验组完全愈合，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BOPl基因在肝癌组织中异常表达，癌组织中的表达明显高于正常组织；过表达BOPl可促进肝癌HepG2细胞的增殖和迁移能力。该基因可能在肝细胞肝癌的发生发展中起重要作用。
- 骆琼珍王晓亮严东旺裘国强唐华美彭志海
- 关键词：肝细胞
- CUL4B基因在结肠癌组织上调并促进HCT116细胞的增殖被引量：3
- 2014年
- 目的观察CUL4B基因在结肠癌组织中的表达,以及对人结肠癌细胞株HCT116增殖能力的影响。方法运用实时定量荧光PCR(Real-time PCR)技术检测40例结肠癌及配对正常结肠黏膜中CUL4B mRNA的表达量,比较两者表达差异。构建pEGFP-N1-CUL4B真核表达载体,并通过脂质体质粒转染HCT116细胞,运用体外细胞毒性试验(MTT)法研究CUL4B对结肠癌HCT116细胞增殖功能的影响。结果 40例结肠癌组织中CUL4B mRNA表达水平ΔCt为13.21±1.33,对应正常组织表达水平ΔCt为18.61±1.86,结肠癌组织中CUL4B基因表达量明显高于配对正常结肠黏膜组织(P<0.05)。MTT实验结果显示CUL4B可显著促进结肠癌HCT116细胞的增殖,HCT116-GFP-RKO组与阴性对照组、亲本细胞组对比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UL4B在结肠癌组织中异常高表达,并且可促进结肠癌HCT116细胞株的增殖功能,可能在结肠癌发生发展中起重要作用。
- 张顺霞马丽园姜韬
- 关键词：结肠癌过表达
- 胃癌17号染色体抑癌基因候选区域精细定位分析被引量：3
- 2011年
- 目的对胃癌17号染色体微卫星位点进行杂合缺失精细定位研究，以寻找新胃癌相关杂合缺失区域及可能存在的抑癌基因。方法在17号染色体上筛选出13个微卫星位点，然后与48例胃癌患者的肿瘤组织及正常组织进行多重聚合酶链反应（PcR）。产物在ABIPrism3730自动荧光测序仪进行毛细管电泳，以Genemapper3．2对电泳结果以进行杂合缺失分析。使用Fisher’s精确检验对杂合缺失与临床病例资料进行分析。结果17号染色体具有较高的杂合缺失现象（31％），D17S2196、D17S808和D17S1853位点没有有效数据。其中以D17S796位点杂合缺失率最高为48％（10／21），D17S956位点杂合缺失率最低为20％（6／30）；结合临床病例资料发现D17S956、D17S805位点与pTNM分期相关，D17S831、D17S921位点与分化相关；通过杂合缺失研究在17号染色体上发现3个候选抑癌基因可能存在的区域D17S1857-D17S805、D17S930．D17S1877、D17S1857-D17S805。结论通过杂合缺失精细定位分析提示17号染色体上发现3个可能存在胃癌抑癌基因的区域。
- 王权温玉刚唐华美严东旺彭志海
- 关键词：胃癌杂合缺失17号染色体微卫星位点
- MT1F基因过表达重组质粒构建及转染结肠癌RKO细胞的鉴定
- 2011年
- 目的构建MT1F基因过表达重组质粒，并转染结肠癌细胞株。方法Real—time聚合酶链反应（PCR）检测和筛选6株结肠癌细胞MT1FmRNA表达。采用全基因合成法合成MT1F编码区序列，分别克隆人pEGFP和pcDNA3．1（＋）载体的C1末端，构建重组质粒pEGFP-C1-MT1F和pcDNA3．1-MT1F，DNA测序，以500ul脂质体质粒复合物转染RKO细胞，G418（400mg／L）维持筛选，Westernblot（鼠抗人MT单抗1：500、鼠抗GFP抗体1：1000）等检测目的基因表达效率。结果6株细胞中，RKO细胞MT1FmRNA水平最低。测序表明MT1F重组质粒构建成功。瞬时和稳定转染RKO细胞后，MT1FmRNA分别升高约600和2000倍，并表达15×10^3的MT蛋白。结论成功构建MT1F基因过表达重组质粒．获得外源性MT1F稳定转染的结肠痛RKO细胞株。
- 严东旺王权李大卫温玉刚唐华美彭志海
- 关键词：结肠癌基因转染质粒
- 视网膜母细胞瘤结合蛋白-6在结肠癌组织中的表达及其意义
- 2013年
- 目的探讨视网膜母细胞瘤结合蛋白-6（RBBP6）基因对结肠癌发生、发展的意义及其与结肠癌临床病理特征的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）检测40例结肠癌患者肿瘤组织、配对的癌旁正常组织RBBP6基因的mRNA表达水平，通过免疫组织化学的方法检测72例结肠癌及其癌旁正常组织RBBP6基因的蛋白表达水平。结果Real-timePCR结果显示肿瘤组织中RBBP6mRNA的表达平均值为4．88，正常组织中RBBP6mRNA的表达平均值为3．49，结肠癌组织RBBP6mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织（P〈0．01）。免疫组织化学结果显示RBBP6在正常组织无表达或弱表达[6．9％（5／72）]，在肿瘤组织中高表达[68．1％（49／72）]。RBBP6的表达量与区域淋巴结转移（P〈0．05）、肿瘤远处转移（P〈0．001）、肿瘤分期（P〈0．01）和分化（P〈0．05）高度相关。结论RBBP6基因在结肠癌组织中有较高的表达水平，可能参与结肠癌的发生、发展。、
- 陈健严东旺吴泽华姜韬薛英明彭志海
- 关键词：结肠癌
- CD24在人胚肾上皮细胞Hek293中的表达及检测
- 2012年
- 目的构建含有CD24基因的重组质粒,在人胚肾上皮细胞Hek293中表达出具有免疫原性的抗原。方法用PCR方法扩增CD24基因,克隆到载体pYD5-hFC中,获得重组质粒pYD5-CD24,转化DH10α感受态细胞中,挑选克隆抽取质粒,以脂质体介导将质粒转染Hek293细胞,72 h后收集细胞培养上清,Western-Blot分析鉴定。结果构建了含有CD24基因的重组质粒,并在人胚肾上皮细胞Hek293中获得带有hFC标签的CD24蛋白。结论本研究成功表达出了具有免疫原性的CD24蛋白。
- 敖翔章清武强贺乐奇张群峰柯文才彭志海
- 关键词：CD24WESTERN
- PAK6在结直肠癌中的功能及其表达调控机制研究
- PAK6（p21-activated kinase 6,PAK6）是p21-激活激酶家族的一员,是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。自PAK6被发现以来,越来越多的研究集中于PAK6生物学功能和作用机制。近来研究揭示PAK6在...
- 陈健
- 关键词：结直肠癌增殖化疗耐药转录调控
- 文献传递
