国家自然科学基金(81171613) 作品数:7 被引量:38 H指数:3 相关作者: 徐晓刚 郭燕 陈春辉 杨洋 吴湜 更多>> 相关机构: 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
磷霉素耐药金黄色葡萄球菌临床分离株murA、glpT及uhpT序列分析 被引量:1 2015年 目的了解磷霉素耐药金黄色葡萄球菌(金葡菌)murA、glpT及uhpT基因的变异情况,探索变异与磷霉素耐药的相关性。方法连续收集2014年1—3月复旦大学附属华山医院临床分离磷霉素耐药金葡菌44株,及同期磷霉素敏感金葡菌6株;采用琼脂稀释法测定磷霉素最低抑菌浓度;聚合酶链反应(PCR)及测序分析fosB、murA、glpT及uhpT的变异情况。结果 44株磷霉素耐药金葡菌临床株中,42株存在murA、glpT和(或)uhpT基因变异,其中12株同时检出fosB基因;6株敏感株中有2株出现murA和(或)glpT基因突变,无uhpT基因变异。合计50株金葡菌中发现murA、glpT及uhpT3种基因的变异类型分别达3类、9类及6类。结论磷霉素耐药金葡菌中murA、glpT及uhpT突变常见,可能参与金葡菌磷霉素耐药性形成。 傅祝英杰 吴湜 郭燕 马莹 杨洋 胡付品 朱德妹 刘杨 徐晓刚关键词:磷霉素 耐药 基因 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌临床分离株磷霉素耐药性及f os耐药基因的检测 被引量:5 2015年 目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)对磷霉素的耐药性及其相关耐药基因fos分布。方法连续收集2014年1—3月复旦大学附属华山医院临床分离金葡菌109株;采用琼脂稀释法测定药敏,聚合酶链反应(PCR)检测磷霉素耐药基因fosA、fosB、fosC。筛选得到的fos基因阳性菌株进行多位点序列分型(MLST),并采用步移测序法分析磷霉素耐药基因周边序列。结果 109株金葡菌临床株中,磷霉素耐药菌株(MIC>32 mg/L)44株。计有13株fosB基因阳性金葡菌,均对磷霉素耐药。未检出fosA及fosC基因。fosB基因阳性的金葡菌以ST1型为主,3株磷霉素MIC>512 mg/L的金葡菌分属于3个不同的ST型别。耐药基因周边序列分析结果显示,fosB基因位于一含转座酶基因的移动元件。结论磷霉素耐药金葡菌中耐药基因fosB检出率高,可能与金葡菌磷霉素耐药性形成有一定相关性。 傅祝英杰 吴湜 郭燕 马莹 杨洋 林东昉 胡付品 朱德妹 刘杨 徐晓刚关键词:磷霉素 耐药 基因 金黄色葡萄球菌 35株vanA与vanM双基因型万古霉素耐药屎肠球菌株在重症监护病房的分布及传播特点 2019年 目的了解vanA与vanM双基因型万古霉素耐药屎肠球菌(vancomycin-resistant Enterococcus faecium,VREF)在重症监护病房的分布及传播特点。方法收集2013年至2017年复旦大学附属金山医院重症监护病房分离到的VREF菌株共35株,采用微量肉汤稀释法测定菌株对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和氯霉素等9种抗菌药物的敏感性。采用多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)进行van基因分型,并通过脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行菌株同源性分析。结果35株耐药菌株标本主要分离自尿液16株、血液11株、粪便5株、胆汁2株和胸腔积液1株。所有菌株对万古霉素、氨苄西林、左氧氟沙星耐药率均为100.00%,对替考拉宁耐药率为40.00%,所有菌株均对利奈唑胺敏感。van基因分型结果显示,33株(94.3%)属vanA和vanM双基因型VREF,其余2株为vanA型VREF。PFGE结果显示,35株可分为14个PFGE谱型,其中10株2014年分离的菌株中有7株谱型相同,其余3株分属3个不同PFGE谱型。结论一种同时携带vanA和vanM的双基因型VREF已在金山医院重症监护病房出现并持续传播。 袁轶群 丁丽 周迎 李培 林东昉 丁柳美 徐晓刚关键词:万古霉素 基因 基因型 万古霉素耐药肠球菌的检测及分子特征 被引量:1 2014年 肠球菌属是医院感染的重要病原菌,以粪肠球菌和屎肠球菌多见,可引起败血症和心内膜炎等.近年来肠球菌感染呈增多趋势,在引起败血症的病原中位居第三.1988年万古霉素耐药肠球菌(vancomycin resistant enterococcus,VRE)出现之后,其危害更加突出.在美国,ICU中VRE感染比例逐年上升,2000年已超过25%[1].近年VRE菌株已不局限于ICU,根据美国疾病预防控制中心公布的数据显示,此耐药菌已在医院所有病房中广泛传播,一些机体抵抗力低下的人群感染发生率可能更高. 孙晴 张正银 郭燕 徐晓刚关键词:万古霉素耐药肠球菌 美国疾病预防控制中心 分子特征 肠球菌感染 感染发生率 抵抗力低下 替加环素、米诺环素对VanM型万古霉素耐药屎肠球菌体外抗菌活性 被引量:3 2016年 目的了解替加环素及米诺环素对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌临床分离株的体外抗菌活性。方法收集2006—2014年上海地区临床分离Van M型万古霉素耐药屎肠球菌45株;采用PCR扩增及测序确认菌种和万古霉素耐药基因型;测定替加环素及米诺环素等10种抗菌药物对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌的MIC。结果 45株临床分离株均确认为Van M型万古霉素耐药屎肠球菌;所有菌株对万古霉素高度耐药(MIC 128-〉256 mg/L),对替考拉宁耐药率为71.1%。几乎所有菌株对左氧氟沙星(100%)和氨苄西林(97.8%)耐药,对米诺环素、庆大霉素和利福平的耐药率分别为15.6%、64.4%和82.2%,未检出替加环素和利奈唑胺耐药株。结论替加环素和米诺环素对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌有良好的体外抗菌活性。 陈春辉 郭燕 吴湜 杨洋 胡付品 朱德妹 徐晓刚关键词:替加环素 米诺环素 万古霉素 耐药 屎肠球菌 肠球菌万古霉素高水平耐药基因vanA、vanB、vanD和vanM快速分型检测 被引量:11 2017年 目的 建立基于多重PCR技术的肠球菌万古霉素高水平耐药基因vanA、vanB、vanD和vanM的快速分型检测方法。方法 通过分析可介导肠球菌万古霉素高度耐药的D-丙氨酸∶D-乳酸(D-Ala∶D-Lac)连接酶基因序列差异,设计可同时检测肠球菌万古霉素高水平耐药基因vanA、vanB、vanD和vanM的多重PCR分型检测方法,以含vanA、vanB、vanD和vanM基因的重组质粒为阳性对照,以临床常见病原菌DNA为阴性对照,评价其敏感度及特异度。采用新建方法检测50株万古霉素耐药临床分离株,50株万古霉素耐药肠球菌(VRE)临床株于2006年1月至2014年12月分离自上海地区9家医院,并与常规PCR及测序方法比较。结果 vanA、vanB、vanD和vanM基因核苷酸序列一致率为60.8%~71.3%,根据序列差异建立的分型方法可对不同基因型阳性对照样品进行准确分型。所有阴性对照样品均未出现假阳性。检测50株临床分离VRE,18株为vanA型,32株为vanM型,与常规PCR及测序方法比较,敏感度及特异性度均为100.0%。检测下限2×10拷贝/PCR反应,检测可在3.5 h内完成。结论 建立了一种基于多重PCR技术的VRE万古霉素高水平耐药基因快速分型方法,可用于VRE菌株的分子流行病学研究及检测。 林东昉 陈春辉 周迎 徐晓刚关键词:肠球菌属 基因 肠球菌万古霉素耐药基因簇遗传特性 被引量:19 2015年 万古霉素耐药肠球菌自20世纪80年代后期被发现以来,已逐渐发展成为重要的医院感染病原菌。此类耐药肠球菌携带的万古霉素耐药基因簇编码产物可催化合成与万古霉素、替考拉宁等糖肽类抗生素亲和力极低的细胞壁前体导致耐药。目前已在肠球菌中发现的万古霉素耐药基因簇根据基因序列及构成不同分为9个型别;依据它们编码的连接酶合成产物不同又可分为D-Ala:D-Lac连接酶基因簇(Van A、Van B、Van D及Van M型)和D-Ala:D-Ser连接酶基因簇(Van C、Van E、Van G、Van L和Van N型)。这些耐药基因簇介导的耐药水平及其传播模式各有特点。文章综述了肠球菌中万古霉素耐药基因簇的类型、基因构成及传播特性。 陈春辉 徐晓刚关键词:肠球菌属 万古霉素 耐药 基因簇