吴阶平医学基金(320670009050)
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 相关作者：冯继锋曹海霞吴建中徐姝李小优更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省肿瘤医院南京市胸科医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-200c启动子区甲基化与肺癌细胞对EGFR-TKI耐药相关被引量：2
- 2013年
- 目的:初步探讨miR-200c启动子区甲基化与非小细胞肺癌细胞株对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)敏感性变化的关系。方法:选用表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)19外显子区缺失突变(E746-A750)的细胞株(H1650、HCC827)及EGFR野生型细胞株(H358、H1299),应用MSP法检测各细胞株miR-200c启动子区的甲基化状态,CCK-8法检测各细胞株对EGFR-TKI吉非替尼的药物敏感性,荧光定量PCR法检测各细胞株miR-200c的相对表达量;去甲基化药物5-aza-CdR处理各细胞株后,观察其对吉非替尼敏感性及miR-200c表达量的变化。结果:吉非替尼敏感细胞株HCC827及H358高表达miR-200c,其启动子区为非甲基化状态;吉非替尼耐药细胞株H1650及H1299的miR-200c表达较低,其启动子区为甲基化状态;经5-aza-CdR处理后,吉非替尼耐药细胞株H1650及H1299的miR-200c及对吉非替尼的敏感性较前显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而吉非替尼敏感株HCC827及H358的miR-200c及对吉非替尼的敏感性未见有明显改变(P>0.05)。结论:miR-200c启动子区的甲基化抑制了miR-200c的表达,从而使H1650及H1299细胞对吉非替尼耐药。
- 徐姝吴建中曹海霞张琰刘宇飞冯继锋
- 关键词：MIR-200C吉非替尼甲基化5-AZA-CDR
- microRNA-200c预测肺腺癌患者对吉非替尼的敏感性及其机制被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨microRNA-200c的表达对肺腺癌患者吉非替尼敏感性的影响及其机制。方法:收集38例EGFR基因敏感突变且选用吉非替尼初治的肺腺癌患者外周血,采用real-time PCR法检测microRNA-200c的表达量,MSP法检测microRNA-200c启动区的甲基化状态。结果:对吉非替尼敏感的29例患者均存在microRNA-200c的相对高表达,其启动子区为非甲基化状态;耐药的9例患者存在microRNA-200c相对低表达,启动子区为甲基化状态。结论:肺腺癌患者microRNA-200c的表达与吉非替尼敏感性相关,作用机制可能为其启动子区的甲基化状态。
- 徐姝冯继锋林勇
- 关键词：甲基化吉非替尼肺腺癌
- 非小细胞肺癌EGFR酪氨酸激酶抑制剂的耐药机制及逆转被引量：4
- 2012年
- 晚期非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)的治疗以含铂双药联合化疗为标准治疗方案,多项研究表明,化疗药物对于NSCLC的疗效已经进入平台期,因此,寻求新的治疗方式已迫在眉睫。表皮生长因子受体(EGFR)在40%～80%的NSCLC中过表达,通过干预EGFR酪氨酸激酶信号转导已成为治疗NSCLC的主要方式。临床应用的EGFR抑制剂主要有EGFR单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)及特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)。目前已证实EGFR-TKI的疗效肯定,但其原发性及继发性耐药是一个不容忽视的问题,且耐药机制复杂。文章对EGFR-TKI在临床中的应用,EGFR突变与TKI敏感性的关系,EGFR-TKI的耐药机制及逆转耐药的方法进行综述。
- 潘晶晶冯继锋
- 关键词：非小细胞肺癌EGFREGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药耐药逆转
- 表皮生长因子受体基因与非小细胞肺癌的分子靶向治疗研究进展被引量：7
- 2012年
- 近年来分子靶向药物已成为晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)可供选择的临床治疗方案。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变与小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor re-ceptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的临床疗效有一定相关性。然而,有些EGFR基因突变患者对EGFR-TKI的治疗并不敏感或对该类药物产生耐药。文中就EGFR基因突变与NSCLC分子靶向治疗敏感性和耐药机制的研究进展进行综述。
- 李小优冯继锋
- 关键词：表皮生长因子受体分子靶向治疗肺癌基因突变
- 非小细胞肺癌EGFR启动子区甲基化和mRNA表达临床意义的探讨被引量：1
- 2012年
- 目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)组织学类型和淋巴结转移的关系,分析EGFR启动子区甲基化与其mRNA表达的关系。方法:应用免疫组织化学法检测60例非小细胞肺癌组织中EGFR的表达,统计EGFR与病理类型及淋巴结转移的关系。用实时定量PCR方法检测其中30例非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织中EGFR mRNA的表达,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测EGFR启动子区的甲基化状态。结果:鳞癌中EGFR阳性率为38.5%(10/26),明显低于腺癌中EGFR阳性率76.5%(26/34),差异有统计学意义,χ2=8.87,P=0.002 9;且有淋巴结转移的NSCLC中EGFR的阳性率为73.7%(28/38),而无淋巴结转移的NSCLC中EGFR的阳性率为45.5%(10/22),差异有统计学意义,χ2=4.78,P=0.028。30例有癌旁组织的标本中,11例患者肿瘤组织EGFR的表达高于其癌旁组织;12例标本中存在肿瘤组织EGFR基因启动子区甲基化水平与EGFR mRNA表达呈负调节关系。结论:EGFR的表达与NSCLC的病理类型及淋巴结转移相关,部分NSCLC患者中存在EGFR基因启动子区甲基化水平与EGFR基因mRNA表达呈负调节关系。
- 吴建中曹海霞井昶雯马蓉王卓冯继锋
- 关键词：甲基化
- 5-氮杂胞苷增强人非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在增强人非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)细胞对吉非替尼敏感性中的作用及其机制。方法:选取EGFR突变型NSCLC细胞株H1650及EGFR野生型NSCLC细胞株H1299,5-Aza-CdR处理后,CCK-8法检测H1650及H1299细胞对吉非替尼敏感性的变化,real-time PCR检测细胞中miR-200c及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA的表达水平。结果:EGFR突变型及野生型NSCLC细胞株H1650、H1299对吉非替尼有一定程度的耐药性,5-Aza-CdR处理后H1650及H1299细胞对吉非替尼的敏感性显著增强,表现为吉非替尼对细胞的IC50明显降低[(1.04±0.35)vs(159.37±17.48)μmol/L,(6.28±1.02)vs(223.76±23.63)μmol/L;均P<0.01]。Real-time PCR检测结果显示,5-Aza-CdR处理后EGFR突变型或野生型H1650、H1299细胞中miR-200c[(0.009±0.003)vs(0.002±0.001),(0.004±0.001)vs 0;均P<0.01]和EGFR mRNA[(0.286±0.037)vs(0.015±0.012),(0.057±0.014)vs(0.01±0.01);均P<0.01]的表达水平均显著增高。结论:DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR可上调NSCLC细胞中miR-200c及EGFR mRNA的表达,增强其对吉非替尼的敏感性。
- 徐姝吴建中曹海霞张琰刘宇飞冯继锋
- 关键词：非小细胞肺癌吉非替尼敏感性MIR-200C
- 5-aza-CdR增强吉非替尼对人非小细胞肺癌细胞株H1650敏感性机制的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨EGFR基因启动子甲基化水平与人非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼敏感性之间的关系。方法:5-aza-CdR和吉非替尼单独或联合用药作用于H1650细胞株后,应用甲基化特异性PCR法检测EGFR基因启动子区甲基化状态;CCK-8法检测细胞增殖率;流式细胞仪技术检测细胞凋亡率变化;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测EGFR蛋白和mRNA的表达情况。结果:5-aza-CdR可去除H1650细胞EGFR基因启动子区甲基化;CCK-8法检测结果显示,H1650对吉非替尼的敏感性较差,5-aza-CdR去甲基化后联合运用吉非替尼处理72h,联合用药组IC50为(2.93±0.95)μmol/L,与吉非替尼组(14.53±1.13)μmol/L、5-aza-CdR组(4.91±1.42)μmol/L比较显著降低,P<0.05;流式细胞仪技术结果显示,联合用药组细胞凋亡率为(83.62±4.3)%,与吉非替尼组(20.29±2.9)%、5-aza-CdR组(25.73±7.5)%比较,差异有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法结果显示,吉非替尼与5-aza-CdR联合用药干预72h后细胞EGFR蛋白和mRNA表达显著下降,与单药组相比,具有统计学意义,P<0.05。结论:EGFR基因启动子区甲基化可能是非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼获得性耐药的机制之一。
- 李小优吴建中曹海霞吴剑秋冯继锋
- 关键词：表皮生长因子受体吉非替尼
- 人非小细胞肺癌细胞EGFR基因启动子甲基化与吉非替尼敏感性之间的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨EGFR基因启动子甲基化水平与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株对吉非替尼敏感性之间的相关性。方法用不同浓度吉非替尼分别作用于NSCLC细胞株HCC827、H1650、H1975、H358、H1299、A549后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,DNA直接测序法、实时荧光定量PCR法、免疫印迹法和甲基化特异性PCR法分别检测上述NSCLC细胞株EG-FR基因突变、EGFR mRNA、EGFR蛋白表达和启动子区甲基化状态。结果 CCK-8法检测结果显示,19外显子缺失突变的HCC827细胞对吉非替尼最敏感,而同为19外显子缺失突变的H1650细胞对吉非替尼不敏感;野生型的H358细胞对吉非替尼中度敏感,其敏感性甚至超过19外显子突变的H1650细胞,而同为EGFR野生型的H1299、A549细胞对吉非替尼敏感性较差。吉非替尼处理72h后,HCC827细胞与H358细胞相比、HCC827细胞和H358细胞与其他4株细胞相比,IC50值均有显著性差异(P<0.05)。HCC827细胞EGFR启动子为未甲基化状态,其EGFR蛋白和mRNA表达最高;H358细胞为部分甲基化,其EGFR蛋白和mRNA为中等表达;其他4个细胞株均为高甲基化状态,EGFR蛋白和mRNA呈低表达;HCC827细胞的EGFR表达水平较H358细胞高,HCC827和H358细胞的EGFR表达较其他4个细胞株高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EGFR基因启动子区高甲基化可能下调EGFR基因的表达水平,从而降低NSCLC对吉非替尼的敏感性;对该基因的甲基化检测可能对预测吉非替尼治疗NSCLC疗效有一定的临床指导意义。
- 孙俊杰吴建中陆建伟曹海霞马蓉冯继锋
- 关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体DNA甲基化吉非替尼
