国家自然科学基金(30770036)
- 作品数:7 被引量:26H指数:4
- 相关作者:李爱英邓会群张碧乾王蔚万娟更多>>
- 相关机构:华中师范大学复旦大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 大引物PCR定点突变方法的改进被引量:5
- 2009年
- 对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突变,可以减少操作步骤,提高突变频率.
- 张碧乾邓会群宫彩霞杨青彭建新洪华珠李爱英
- 关键词:基因克隆
- 极端环境分离的氧化微杆菌的嗜碱性及其基因组文库的构建被引量:2
- 2011年
- 从极端环境分离的微生物因适应特殊的生境而具有特殊的生理生化性质,已经成为重要的生物研究材料,而目前关于嗜碱氧化微杆菌的相关研究却非常少。为了解一株从新疆碱湖环境中分离的氧化微杆菌HSL10的生理特性以及进行其功能基因的克隆和分析,文章首先对菌株HSL10进行生长特性的研究,发现此菌株在培养基pH 5~12范围内生长良好,且生长较快;然后提取其总DNA建立基因组文库,重组率为100%。试验结果说明从碱性环境中分离的氧化微杆菌菌株HSL10具有嗜碱性,其基因组文库的构建可为相关功能基因的克隆和分析打下基础。
- 吴小丹刘明王蔚万娟李爱英
- 关键词:极端环境微生物基因组文库
- 链霉菌次生代谢中双因子调控系统的研究进展被引量:4
- 2010年
- 链霉菌次生代谢产物的生物合成受到严格和复杂的调控,而双因子调控系统是其中重要的一类调控因子,在链霉菌中广泛存在,且存在作用方式的多样性和作用机制的复杂性。就近些年研究较多的参与链霉菌次生代谢的两类双因子调控系统(真核型和原核型)的研究状况做了综述,重点阐明其作用机制,并对其研究趋势以及在药物代谢工程中的应用前景进行了展望。
- 宫彩霞李爱英
- 关键词:链霉菌次生代谢
- 抗肿瘤抗生素美达霉素的生物合成与调控
- 抗癌新药的研发对于癌症治疗是非常重要的。芳香聚酮抗生素美达霉素作为一种新颖的烷化试剂可以阻断多种肿瘤细胞的信号传导。野生菌中美达霉素生物合成机制有待阐明,且产量极低。美达霉素生物合成基因簇已经克隆,基因簇中存在合成相关的...
- 李爱英
- 文献传递
- 天然产物的C-糖基化研究进展被引量:4
- 2009年
- 自然界中的天然产物在其结构上存在各种修饰,C糖-基化为其中一种比较稀少的修饰方式。C-C糖苷键的形成由C-糖基转移酶负责催化。含C-糖基的化合物多数来自微生物,但高等植物也会有少量积累。综述了近些年来在天然产物C-糖基化方面的研究工作,并对其在药物开发方面的潜力进行了展望。
- 邓会群王惠利杨红洪华珠李爱英
- 关键词:结构修饰
- 群感效应与链霉菌次生代谢调控被引量:2
- 2011年
- 群感效应是细菌协调群体行为的一种外界信号传递机制,在细菌中普遍存在,参与细胞的多种生理过程。链霉菌中也存在群感效应,在抗生素等次生代谢产物的生物合成中起重要的调控作用;从自诱导信号分子的结构到信号传递机制都存在一定多样性,其中以A-因子为代表的γ-丁酸内酯类信号分子的作用机制研究最为深入。近几年在链霉菌中发现的PI-因子、M-因子以及一些特定的代谢产物则代表几类结构较新颖的信号分子,通过群感效应机制调控次生代谢过程;链霉菌中还发现胆固醇氧化酶、甘油等分子具有信号分子特征,不排除是通过群感效应来参与抗生素生物合成调控。本文主要就参与链霉菌次生代谢调控的几类群感效应系统的研究状况进行综述,重点阐述各类群感信号分子的结构和信号传递机制的不同,并对链霉菌群感效应的研究趋势以及在抗生素高产菌遗传育种中的应用前景进行了展望。
- 刘明李爱英
- 关键词:链霉菌次生代谢调控
- 分子伴侣协助下抗肿瘤抗生素美达霉素生物合成中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达被引量:11
- 2011年
- 糖基转移酶在天然产物的糖基化修饰过程中起关键作用。目前链霉菌源抗肿瘤抗生素美达霉素(Medermycin)生物合成途径中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达及酶学性质还未有研究。首先通过结构模拟确定Med-ORF8的端部加上His-标签不会影响其三维结构的正确折叠,然后利用2种pET原核表达载体来进行Med-ORF8的原核表达,发现以pET-28a(+)为载体进行表达时,目的蛋白产量非常高,但是以不可溶的包涵体形式为主。当分子伴侣基因(编码大肠杆菌触发因子)与Med-ORF8的编码基因共表达时,在优化诱导条件的情况下,可以有效减少包涵体的形成,提高了Med-ORF8的可溶性表达效率,为Med-ORF8的酶学分析打下基础。
- 万娟邓会群张碧乾王蔚蔡晓凤李爱英
- 关键词:糖基转移酶原核表达分子伴侣
- 阿泊拉霉素抗性基因的点突变和功能分析被引量:1
- 2008年
- 链霉菌基因组中常见连续两个基因重叠的现象(如ATGA),这为基因的同框敲除或取代研究带来很大困扰。对常用的报告基因——阿泊拉霉素抗性基因的5′端进行定点突变,使之可应用于这种链霉菌重叠基因的同框取代,功能验证表明,点突变没有影响到这个报告基因的生物学活性。
- 蔡晓凤彭蓉李爱英
- 关键词:基因敲除定点突变