江苏省自然科学基金(BK2011787)
- 作品数：10 被引量：66H指数：5
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- 瑞士乳杆菌X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶的分离纯化及酶学性质被引量：1
- 2013年
- 提取并纯化瑞士乳杆菌X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶(Pep X),并对其酶学性质进行研究。采用超声波破碎瑞士乳杆菌菌体获得含有Pep X的粗酶液,粗酶液经过硫酸铵沉淀、Sephacryl S-300 HR层析、非变性-聚丙烯酰胺凝胶电泳法切胶回收蛋白纯化瑞士乳杆菌Pep X。纯化后Pep X经SDS-PAGE测定分子质量并研究酶学性质。得到电泳纯的PepX,酶比活力62.24U/mg,单体分子质量大约26kD,最适酶反应pH7.0,最适酶反应温度37℃。Co2+对PepX有激活作用,Zn2+、Ni2+、Mn2+、Fe3+对Pep X有强烈的抑制作用,金属蛋白酶抑制剂EDTA、丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF对Pep X有一定的抑制作用,说明Pep X为金属依赖性的丝氨酸肽酶。
- 郭宇星祝倩朱坤周慧敏孙杨赢曾小群潘道东
- 关键词：酶学性质
- 利用Caco-2细胞模型评价乳源ACE抑制肽小肠吸收机制的研究进展被引量：5
- 2013年
- 乳中特定的活性肽可以有效地抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性,起到抗高血压的作用。但是乳源ACE抑制肽由于结构不同,经口服后并不都能通过小肠黏膜进入血液循环,因此并不都具有降血压的功效,口服生物利用度也较低。本文介绍乳源ACE抑制肽的研究现状和活性评价方法,概述利用Caco-2细胞模型研究乳源ACE抑制肽在小肠中的摄入、小肠细胞中滞留代谢及小肠外排机制的研究进展,并对如何提高乳源ACE抑制肽的口服生物利用度提出展望。
- 祝倩郭宇星潘道东
- 关键词：CACO-2细胞模型
- Caco-2细胞模型构建及抗高血压肽VPP和IPP小肠吸收机制研究被引量：8
- 2014年
- Caco-2细胞模型为小肠内皮细胞转运模型,本实验构建Caco-2细胞模型并研究抗高血压肽Val-Pro-Pro(VPP)和Ile-Pro-Pro(IPP)的小肠吸收机制。从细胞形态、电阻值和荧光素钠透过率等方面验证了Caco-2细胞模型;通过转运时间、肽浓度、吸收抑制剂和促进剂比较了VPP和IPP的小肠转运途径及外排机制。结果表明:构建的Caco-2细胞模型可用于VPP和IPP的模拟小肠吸收机制研究;VPP和IPP的小肠转运途径是旁路转运,VPP和IPP都存在外排泵的作用,IPP外排作用没有VPP大,所以生物利用度高于VPP。
- 祝倩郭宇星潘道东曾小群孙杨赢周慧敏
- 关键词：CACO-2细胞
- 固定化瑞士乳杆菌蛋白酶酶解乳清蛋白生产ACE抑制肽的条件优化被引量：4
- 2015年
- 以乳清浓缩蛋白WPC-80为原料,研究固定化瑞士乳杆菌蛋白酶酶解WPC-80生产血管紧张素转化酶(angiotensinⅠ-converting enzyme,ACE)抑制肽的工艺条件。通过单因素试验和响应面方法研究了酶解温度、酶解p H值、底物与酶质量比([S]/[E])、酶解时间对固定化瑞士乳杆菌蛋白酶制备ACE抑制肽的影响,确定了酶解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:温度37℃、p H 7.5、[S]/[E]=15%、酶解时间8 h。在此条件下,酶解产物的水解度为(6.05±0.36)%,ACE抑制率为(59.54±0.61)%。
- 周慧敏刘琛郭宇星潘道东曾小群孙杨赢
- 关键词：ACE抑制肽乳清蛋白响应面法
- 鸡枞菌精多糖对酒精性损伤小鼠肾及免疫器官的抗氧化作用被引量：6
- 2014年
- 目的:研究鸡枞菌精多糖(refined polysaccharide from Termitomyces albuminosus,RTAP)对酒精所致急性肝损伤小鼠肾、脾脏及胸腺的保护作用。方法:采用超声波辅助的热水浸提法提取鸡枞菌多糖,小鼠被随机分为正常组、模型组、阳性对照组(饲喂联苯双酯,150 mg/(kg·d))、RTAP各剂量组(100、200、400 mg/(kg·d)),连续灌胃30 d,正常组按等量生理盐水灌胃。第31天除了正常组外,给予50%乙醇(12 mL/kg)建立动物急性肝损伤模型。小鼠处死后取肾脏、脾脏、胸腺,测定各项抗氧化指标。结果:与模型组相比,RTAP各剂量组均能降低肾脏、脾脏及胸腺丙二醛含量,提高各器官超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性及谷胱甘肽含量。结论:RTAP对酒精性损伤小鼠肾及免疫器官具有明显的抗氧化作用,其原理应该与其所具有抗脂质过氧化和清除体内过多的氧自由基作用有关。
- 邢佳陶明煊郭宇星程光宇赵云霞蒋文亭张梦宇杜伟佳
- 关键词：抗氧化免疫器官
- 芦蒿秸秆总黄酮富集纯化及产物鉴定被引量：12
- 2013年
- 应用AB-8大孔树脂对芦蒿秸秆总黄酮进行富集和纯化,优化得到树脂富集纯化芦蒿秸秆总黄酮的最佳工艺条件;通过显色反应、紫外特征光谱吸收对纯化后的产物进行初步鉴定。结果表明:AB-8大孔树脂具有较好的吸附和解吸性能,最佳吸附洗脱条件为:pH4.0,上样质量浓度1.476mg/mL,上样流速1mL/min,上样体积为树脂体积的2.5倍,洗脱剂为体积分数60%的乙醇,洗脱流速1mL/min,洗脱体积为1.5～2.0BV左右。在该条件下,纯化产品中总黄酮的纯度由5.80%增加到30.26%;显色反应及紫外特征吸收峰显示,芦蒿秸秆总黄酮中可能含有黄酮醇、异黄酮、黄烷酮和双氢黄酮类,并且结构中有邻位双OH存在。
- 邓荣华郭宇星李晓明吕丽爽
- 关键词：总黄酮纯化
- 壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究被引量：1
- 2012年
- 以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件:凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。
- 王翠翠郭宇星潘道东
- 关键词：固定化酶活力
- 鹅肉蛋白酶解条件优化及酶解产物抗氧化活性研究被引量：22
- 2012年
- 运用响应面(RSM)分析对鹅肉蛋白酶解工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,以抗氧化活性为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、酶解温度、pH值、固液比、酶添加量对鹅肉蛋白水解度和抗氧化活性的影响。结果表明:鹅肉蛋白最佳酶解条件为酶解温度53℃、酶解液pH10.5、固液比1:3(m/V)、酶解时间7.2h,加酶量1200U/g,在此条件下,酶解液对Fe3+还原力为0.402,水解度可达34.74%。
- 李俊江潘道东郭宇星岳娜孙杨赢
- 关键词：酶解水解度抗氧化能力
- 瑞士乳杆菌的益生特性被引量：7
- 2014年
- 研究了瑞士乳杆菌作为发酵肉制品发酵剂的发酵特性;在模拟胃肠道环境中对酸和胆盐的耐受性;另以Caco-2细胞为体外肠道上皮细胞模型,研究了瑞士乳杆菌对小肠的黏附性和影响黏附的因素。实验结果表明,瑞士乳杆菌不产粘液,不产气,不产H2S,不产氨,不产H2O2,不具有氨基酸脱羧酶活性,不具有硝酸还原酶能力,具有抑制S.aureus和E.coli能力,能耐受一定量的NaCl和NaNO2,发酵葡萄糖产酸。瑞士乳杆菌同时还具有较好的耐酸和耐胆盐性能。通过瑞士乳杆菌的小肠黏附实验发现,生长稳定期的瑞士乳杆菌与Caco-2细胞有很好的黏附效果,当瑞士乳杆菌与Caco-2细胞共培养时间为2h时,黏附趋于饱和,且黏附环境pH值为7.0时黏附性最强。结果显示瑞士乳杆菌具备益生活性,满足发酵肉制品中益生菌制剂的筛选标准,可作为发酵菌种用于发酵肉制品的生产。
- 张丹丹郭宇星周慧敏张丹祝倩潘道东
- 关键词：瑞士乳杆菌发酵剂耐酸性CACO-2细胞黏附性
- 海藻酸钠固定瑞士乳杆菌条件优化被引量：4
- 2012年
- 采用海藻酸钠固定瑞士乳杆菌,制备具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的酸乳,通过单因素试验和L9(34)正交试验确定其最优固定条件。结果表明,最优固定条件是1.5g/100mL海藻酸钠溶液、菌液浓度1:10(m/V)、0.1mol/L CaCl2溶液、固定时间1h。将固定化的瑞士乳杆菌与传统酸乳发酵剂(保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)复配接入到11g/100mL牛乳中,在37℃条件下发酵至凝乳,凝乳时间为8h,pH值为4.2,凝乳状态好,口感柔和、细腻,成品酸乳ACE抑制活性为70.3%。
- 郭宇星潘道东刘洋王翠翠
- 关键词：固定化海藻酸钠瑞士乳杆菌
