山西省回国留学人员科研经费资助项目(2007005)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：高奋边云飞肖传实周华李茂莲更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目年山西省研究生优秀创新项目山西省卫生厅科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 载ACEshRNA表达质粒壳聚糖纳米转染培养的大鼠血管内皮细胞实验性研究
- 2009年
- 目的研究载血管紧张素转化酶短发卡RNA(ACEshRNA)表达质粒壳聚糖纳米颗粒对体外培养大鼠血管内皮细胞的转染效率。方法采用离子交联法制备壳聚糖纳米粒,喷金扫描电子显微镜鉴定;通过静电吸附复合ACEshRNA表达质粒,采用琼脂糖凝胶电泳分析载体与DNA结合能力;用体外培养大鼠血管内皮细胞转染实验,评价体外壳聚糖颗粒的转染能力。结果体外对培养的大鼠血管内皮细胞的转染实验显示,绿色荧光蛋白的表达,说明该壳聚糖有一定的转染效率,且在壳聚糖与质粒体积比为1∶3时转染率最高。结论本研究制备的载ACEshRNA表达质粒壳聚糖纳米载体,能在体外培养的大鼠血管内皮细胞实现有效转染,并且为进一步转染条件的优化奠定实验基础。
- 高奋朱国斌赵惠萍马喻边云飞肖传实
- 关键词：肽基二肽酶A质粒壳聚糖内皮细胞
- RNA干扰联合基因沉默ACE和AT1R对自发性高血压大鼠血压及心肌重构的影响被引量：5
- 2010年
- 目的用RNA干扰技术下调血管紧张素转换酶（ACE）和血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）表达，观察其对自发性高血压大鼠（SHR）血压及心肌重构的影响。方法SHR随机分为5组：即空白对照组（注射生理盐水）；病毒对照组（注射对照腺病毒）；Ad5-ACE-shRNA治疗组；Ad5—AT1R-shRNA治疗组；Ad5—ACE—AT1R—shRNA治疗组[分别注射表达ACE基因，AT1R基因，ACE和AT1R基因特异短发夹RNA（shRNA）的重组腺病毒载体]；同时设WKY正常血压对照组（注射生理盐水）。以上各组大鼠均于实验的第1，17天各注射1次，干预前后检测血压、心率的变化。于首次注射后第3天，用实时荧光定量PCR检测心肌、主动脉组织ACE，AT1R mRNA的表达。实验结束时，检测左心重／体重及心肌胶原蛋白的含量，并做电镜切片观察心肌超微结构的变化。结果Ad5-ACE-shRNA治疗组，Ad5—AT1R-shRNA治疗组，Ad5—ACE-AT1R-shRNA治疗组于每次注射后，尾动脉压分别下降24mmHg（1mmHg=0．133kPa）、22mmHg、26mmHg左右，单次注射后降压作用至少可持续15d，累计降压幅度分别达39mmHg、37mmHg、43mmHg；而SHR空白对照和病毒对照组血压则持续升高约26mmHg，且两组比较差异无统计学意义；WKY组尾动脉压无明显变化，治疗组（Ad5-ACE—shRNA，Ad5-ACE-AT1R—shRNA）心肌、主动脉组织中ACE mRNA和治疗组（Ad5-AT1R—shRNA，Ad5—ACE-AT1R—shRNA组）心肌、主动脉组织中AT1R mRNA表达明显低于空白对照和病毒对照组（P〈0．05），而与WKY组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE—shRNA治疗组，Ad5-T1R-shRNA治疗组，Ad5-ACE-AT1R—shRNA治疗组左心重／体重与心肌胶原蛋白含量[（2．22±0．18）μg／mg、（2．23±0．19）μg／mg、（2．17±0．16）μg／mg与（1．291±0．019）μg／mg、（1．298±0．019）μg／mg、（1．276±0．019）μg／mg]明显低于空白对照组[（3．23±0．13）μg／mg与（1．683±0．013�
- 周华边云飞李茂莲高奋肖传实
- 关键词：高血压RNA干扰
- 编码大鼠血管紧张素转换酶短发夹环RNA质粒的构建与鉴定
- 2008年
- 目的构建编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体质粒,为利用基因沉默技术从转录后水平进行高血压治疗的研究做准备。方法根据大鼠ACE mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体,经测序证明与设计的相同,获得大鼠ACE的shRNA表达载体质粒。结论构建的编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体可进入哺乳动物细胞内表达短发夹RNA,经Dicer酶裂解成si R-NA并降解靶基因mRNA,而达到基因干扰的作用。为利用其进行自发性高血压大鼠的降压治疗研究奠定了基础。
- 周华高奋李茂莲边云飞何军华肖传实
- 关键词：基因干扰高血压血管紧张素转换酶短发夹RNA
- 靶向大鼠血管紧张素转换酶基因的短发夹RNA重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的利用AdMax腺病毒载体系统构建大鼠血管紧张素转换酶-短发夹RNA(ACE-shRNA)腺病毒载体并在人胚胎肾-293细胞中扩增制备重组病毒。方法自先期构建的pGenesil-1-ACE-shRNA真核表达载体中用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出ACE-shRNA片段,并克隆进入穿梭质粒pDC316中,将构建好的穿梭质粒pDC316-ACE-shRNA载体和骨架病毒pBHGlox-E1,3Cre共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果经限制性内切酶,聚合酶链反应(PCR)检测和绿色荧光蛋白(FGFP)表达证实成功地构建了携带ACE-shRNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。结论成功地构建了携带ACE-shRNA片段的重组腺病毒载体,为进一步利用基因沉默技术抗高血压的研究奠定了基础。
- 周华高奋李茂莲边云飞何军华李瑾肖传实
- 关键词：腺病毒科肽基二肽酶A基因疗法
