国家自然科学基金创新研究群体项目(XJEDU2004G10)
- 作品数:5 被引量:88H指数:2
- 相关作者:温浩林仁勇卢晓梅张亚楼李海涛更多>>
- 相关机构:新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金创新研究群体项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 泡球蚴18基因的克隆、原核表达质粒的构建及其初步表达的研究被引量:11
- 2005年
- 目的: 克隆、分析泡球蚴 18 (Em18)抗原基因,构建 pET41a Em18 原核表达质粒,并初步诱导表达Em18重组蛋白。方法: DNAman软件设计引物,RT PCR法克隆 Em18 cDNA并构建 pMD18 T/Em18 质粒,测序确定序列,利用DNAman和BLAST软件,对其进行基因序列分析。构建 pET41a Em18 原核表达质粒,测序鉴定插入序列正确性。IPTG初步诱导和表达 rEm18 GST重组蛋白,SDS PAGE电泳检测。结果: 测序结果显示Em18抗原基因长度为 486 bp,编码 161 个氨基酸。BLAST 比对分析表明为一新序列并被 GenBank 收录(AY513691)。构建的 pET41a Em18原核表达质粒,经 IPTG诱导后,SDS PAGE检测表明 rEm18 GST重组蛋白得到成功表达,在相对分子量为50 KDa处有表达条带。结论: 成功克隆并构建了 pET41a Em18 原核表达质粒,初步诱导表达出 rEm18 GST重组蛋白,为新一代包虫病诊断试剂盒的研制奠定基础。
- 王俨林仁勇丁剑冰卢晓梅张静萍王星梁晓慧张亚楼张琰温浩
- 关键词:泡球蚴重组蛋白
- 大鼠肝细胞无血清原代培养体系的建立被引量:1
- 2008年
- 目的:建立大鼠肝细胞无血清原代培养体系。方法:以Wistar大鼠做肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离肝细胞,分别通过有血清和无血清方法进行原代培养;以台盼蓝染色法测细胞活力,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,流式细胞仪测定原代培养大鼠肝细胞增殖指数。结果:在大鼠肝脏有血清原代培养体系和无血清原代培养体系两种方法中,大鼠肝细胞存活率均>90%,生长良好,经24 h和48 h培养后,经检测大鼠肝细胞增殖指数无统计学差异(P>0.05)。结论:成功建立大鼠肝细胞无血清原代培养方法,为今后利用此方法进行细胞信号传导等相关研究提供有力的实验手段。
- 周晓涛林仁勇张雪张亚楼许晏卢晓梅马海龙刘辉温浩吕国栋刘涛
- 关键词:大鼠肝细胞胶原酶细胞增殖
- 两型肝包虫病手术疗效547例临床分析被引量:72
- 2007年
- 目的探讨两种类型肝包虫病即肝囊型包虫病(cystic echinococcosis,CE)和肝泡型包虫病(alveolar echinococcosis,AE)手术治疗的方式、适应证及其疗效。方法对我院2002年6月到2006年11月手术治疗的肝囊型包虫患者519例和1995~2006年手术治疗的28例肝泡型包虫病患者手术方式进行比较分析。结果(1)CE组:CE内囊摘除术(A组)术后残腔并发症、带管时间等均显著高于其他3组(P〈0.01),其术后平均住院天数则低于肝切除术(D组)(P〈0.01);手术D组的平均住院天数、肝功不全发生率、手术耗时及出血量等均显著高于其他3组(P〈0.01)。临床治愈518例(99.8%),死亡1例(0、2%)。(2)AE组:28例中AE行根治性手术治疗19例,其10年存活率100%,而姑息性手术治疗9例,10年存活率44%(P〈0.01)。结论(1)肝包虫外囊完整剥除术治疗可根除因内囊摘除术所致包虫复发和胆瘘等并发症,与肝切除相比具有创伤较小、并发症少的特点,故可认为是CE的首选术式;(2)对于邻近大血管、重要脏器组织或周围解剖层次不清的肝包虫,外囊次全切除术可在有效消灭残腔的同时,减少了手术难度及外囊剥除术所致手术风险;(3)扩大半肝切除胆道血管重建术是治疗AE有效根治手段,其技术关键是应按无瘤术的原则切除病灶并行胆道血管重建,而AE患者术前综合评估尤其肝血管和胆道成像可明显提高根治性切除率。
- 温浩邵英梅赵晋明吐尔干艾力李海涛买买提江·阿不都卡得尔
- 关键词:肝囊型包虫病肝泡型包虫病内囊摘除术肝切除术
- 肝囊型包虫破裂的外科治疗110例被引量:2
- 2010年
- 目的分析肝囊型包虫破裂外科手术治疗方式的演变及其对患者预后的影响。方法回顾性分析1990年1月至2008年12月外科手术治疗的肝囊型包虫破裂110例,按不同手术综合处理方法分为3组;A组22例:内囊摘除+甲醛或双氧水局部杀虫+残腔锁边缝合或大网膜填塞或残腔内翻缝合引流;B组65例:内囊摘除+高渗盐水局部杀虫+外囊肝外部分切除+残腔胆漏缝合+残腔开放引流;C组23例:外囊全部或次全剥除+高渗盐水局部杀虫+术区引流。分析3种外科综合手术治疗方式的效果。结果术后A组、B组、C组残腔并发症发生率分别为40.9%、16.9%、0.0%(P〈0.05),复发率分别为18.2%、4.6%、0.0%(P〈0.05);带管引流时间A组〉B组〉C组;手术耗时及术中出血量,A组、B组均低于C组,B组与A组相比无明显差别;高渗盐水腹腔处理后包虫腹腔种植率低于单纯生理盐水处理组,差异无统计学意义。结论外囊全部或次全剥除+高渗盐水局部杀虫+术区引流的处理方式是目前最佳的治疗肝囊型包虫破裂的外科方法。
- 温浩邱斌玉吐尔干·艾力邵英梅赵晋明李海涛冉博
- 关键词:外科手术
- 泡球蚴囊液对原代培养大鼠肝细胞增殖影响的初步研究被引量:2
- 2008年
- 目的探讨泡球蚴囊液对体外原代培养大鼠肝脏细胞增殖的影响。方法以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离肝细胞。取1×106肝细胞接种于Ⅰ型胶原铺底35mm培养皿,无血清培养20h后以泡球蚴囊液置换培养液培养24h和48h,期间在荧光倒置显微镜下观察肝细胞形态变化,流式细胞仪测定细胞周期;另取1×105肝细胞接种于Ⅰ型胶原铺底96孔培养板,同上培养,MTT法检测泡球蚴囊液对大鼠肝脏细胞毒性作用。结果与泡球蚴囊液共培养后肝细胞贴壁生长良好,MTT法测定肝细胞存活率为77.5%~100%。培养24h后肝细胞增殖指数(PI)泡球蚴囊液处理组为(49.35±4.00)%,对照组为(82.00±6.00)%;培养48h后两组肝细胞增殖指数(PI)分别为(27.61±6.00)%和(67.00±10.00)%,差异均有显著性(P<0.05)。结论泡球蚴囊液对体外培养大鼠肝细胞无毒害作用,但对肝细胞的增殖有一定的抑制作用。
- 周晓涛林仁勇张亚楼马海龙张雪卢晓梅刘辉许晏温浩吕国栋刘涛
- 关键词:大鼠肝细胞MTT细胞增殖