国家自然科学基金(91129717)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：北京协和医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的表达
- 2016年
- 背景:miR-181b与多种肿瘤的形成相关,但其在结肠炎相关结肠癌中的表达情况尚不明确。目的:探索miR-181b在结肠炎相关结肠癌发生过程中的变化,并初步筛选其下游可能的靶基因。方法:联合使用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)制备结肠炎相关结肠癌小鼠模型。以实时荧光定量PCR(qP CR)检测不同时期小鼠结肠组织miR-181b表达。利用全基因组表达谱芯片结合miRNA靶基因预测软件TargetS can、PicTar和miRDB初步预测miR-181b的下游靶基因,并以qPCR法检测结肠炎相关结肠癌小鼠中靶基因的表达。结果:miR-181b表达在结肠炎相关结肠癌形成过程中逐渐升高,但单独使用AOM或DSS均不会改变miR-181b水平。结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件初步筛选出miR-181b可能的下游靶基因为Ipmk、E2f5、Klf6、Prkcd、Bai3和Hic2,qPCR法显示Ipmk、Prkcd、Bai3、Hic2表达明显低于对照组。结论:miR-181b表达随结肠炎相关结肠癌的发展而升高,该变化与单纯慢性炎症无关。
- 贺龙梅赵新华马怡茗汪红英
- 关键词：结肠肿瘤结肠炎
- 微小RNA-155在结肠炎相关结肠癌发生过程中的表达变化被引量：8
- 2014年
- 目的探究微小RNA-155（miR-155）在结肠炎相关结肠癌发生过程中的作用并初步筛选其下游的靶基因。方法联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL／6小鼠发生结肠炎相关结肠癌，得到从结肠炎到结肠癌的3个不同阶段的小鼠模型（分别命名为AD1、AD2和AD3），同时设立无任何处理的对照组和只给予DSS来模拟慢性炎症的DSS组，取各组小鼠的结肠组织提取总RNA，逆转录成cDNA后应用实时荧光定量PCR检测miR-155的表达。结合前期的全基因组表达谱芯片数据和miRNA靶基因预测软件TargetScan和PicTar预测出来的潜在靶基因，初步筛选miR-155的下游靶基因，并用PCR进一步验证潜在靶基因的表达变化。结果ADM和DSS联合使用能有效地模拟人类结肠炎相关结肠癌，结肠炎相关结肠癌的演变顺序为正常、轻度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生和腺癌。DSS组小鼠结肠miR-155的表达水平（O．0056±0．0037）与对照组（0．0120±0．0051）比较，差异无统计学意义（P〉0．05），而AD3组小鼠的miR-155表达水平（0．0544±0．0270）高于DSS组（0．0056±0．0037），差异有统计学意义（P〈0．01）。结合全基因组表达谱芯片和miRNA靶基因预测软件，初步筛选出miR-155可能的下游靶基因为Tle4、Kena1、Itk、Beorl1、Caena1c、Rspo2和Foxo3，其中Kcna1和Cacna1c经PCR验证与芯片检测结果一致。结论miR-155的表达升高与结肠炎相关结肠癌有关，而与慢性炎症无关。
- 李伟伟韩文晓赵新华汪红英
- 关键词：微RNAS结肠炎结肠肿瘤氧化偶氮甲烷葡聚糖硫酸钠
- 结肠炎相关结肠癌分泌蛋白质体外富集方法的建立
- 2014年
- 目的:建立小鼠结肠炎相关结肠癌分泌蛋白质体外富集的方法;方法:利用结肠炎相关结肠癌小鼠模型,取不同阶段实验小鼠的结肠体外培养48h,收集分泌蛋白质。使用SDS-PAGE分离分析分泌蛋白质,并通过Western blot检测分泌蛋白质是否存在胞浆蛋白或者核蛋白的污染。结果:在实验条件下收集得到的分泌蛋白重现性好,分泌蛋白中核蛋白和胞浆蛋白的污染较少,且能够明显分辨与病程相关差异表达蛋白质条带。结论:成功建立了结肠炎相关结肠癌分泌蛋白质的体外富集方法。
- 马怡茗肖汀赵新华韩文晓汪红英
- 关键词：分泌蛋白质
