国家科技支撑计划(2011BAD19B01)
- 作品数：17 被引量：51H指数：5
- 相关作者：张家新张春强栗瑞兰欧阳效晴范晓梅更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学中国农业大学北京安伯胚胎生物技术中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 生长分化因子-9对牛卵丘细胞增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 研究生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)对牛卵丘细胞增殖的影响。采用MTT法检测不同浓度GDF-9对卵丘细胞增殖的影响,结果表明,GDF-9能促进卵丘细胞的增殖,且GDF-9与卵丘细胞增殖效应存在浓度梯度关系;在卵丘细胞增殖过程中,FSH在一定程度上与GDF-9发挥协同作用。在GDF-9和FSH的作用下,去除卵母细胞的卵丘细胞复合体(oocytectomized cumulus cell complexes,OOX)也可以保持较好的发育形态。实时定量PCR结果表明,随着GDF-9浓度的增加,卵丘细胞扩展相关基因PTX3、HAS2及PTGS2的表达量也增加。总之,以上的研究结果表明,GDF-9可以促进卵丘细胞的增殖,对卵丘细胞功能的发挥起着重要的作用。
- 欧阳效晴张春强栗瑞兰张通范晓梅高丽霞赵濛张家新
- 关键词：增殖生长分化因子-9
- 羔羊体重与激素重复诱导对羔羊卵泡发育的影响被引量：2
- 2011年
- 为了研究体重和激素重复处理对羔羊卵泡及卵母细胞发育能力的影响,试验采用注射外源FSH+PMSG的方法,对5～15周龄的羔羊进行激素处理,诱导其卵泡发育并活体采卵,卵母细胞体外培养。结果显示:(1)体重居中(M组)的羔羊获得的卵泡数目多于体重较轻(L组)和较重(W组)的羔羊组,但各组之间差异不显著;M组卵母细胞数目多于其他两组,且差异显著(P<0.05)。(2)M组羔羊获得的卵母细胞体外发育卵裂率高于L组和W组,但各组间差异不显著;W组桑囊率高于其他两组,且与L组之间差异显著(P<0.05)。(3)重复处理组与初次处理组相比较,卵巢直径差异不显著,而重复处理组羔羊卵泡数目和获得的卵母细胞数目明显少于初次处理组,差异极显著(P<0.01),同时,重复组获得的卵母细胞卵裂率和桑囊率均低于初次组。结论:羔羊体重居中,其卵母细胞数目和细胞的发育率均好于体重过轻过重的羔羊,重复处理后羔羊所获卵母细胞数目少于初次处理。
- 王睿王冰源苗凯吴中红袁莉刚田见晖
- 关键词：羔羊激素诱导体重
- 氧化应激和抗氧化剂对精子生理过程影响的研究进展被引量：5
- 2011年
- 机体内活性氧和抗氧化剂调控水平失衡会发生氧化应激(oxidative stress,OS)。氧化应激可导致精子形态学损伤,最终导致雄性不育。故氧化应激被认为是导致不育的主要因素之一。然而,尽管高浓度的活性氧(reactive oxygen species,ROS)会导致精子的损伤,尤其是对精子顶体膜和DNA完整性等的损伤。但是大量研究表明,适当浓度范围的ROS对保证精子完成受精的生理过程(如获能、顶体反应、信号传导等)必不可少。本文对活性氧的类型和来源,氧化应激和活性氧对精子生理功能的影响,以及氧化应激的测定与防御机制的研究进展作一综述。
- 夏春梅吴中红张林波田见晖
- 关键词：氧化应激活性氧精子抗氧化剂
- C型钠肽预处理对牛卵母细胞体外成熟的影响被引量：3
- 2014年
- 旨在研究C型钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)预处理对牛卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。以常规的牛卵母细胞体外24h成熟培养为对照,研究了CNP预处理牛卵母细胞6h,再进行成熟培养28h后(CNP预处理组)的牛卵母细胞成熟情况。结果表明,CNP预处理组的牛卵母细胞成熟效果明显提高,其受精后的囊胚率和囊胚细胞数都明显高于对照组((51.55%±2.50%),(156.2±11.0)和(28.13%±3.80%),(116.3±19.0),P<0.05);卵母细胞中线粒体分布由未成熟时的周边分布变为成熟时的均匀分布;而CNP预处理6h的卵母细胞中线粒体多呈半周边分布,在随后的28h成熟培养中也变为均匀分布;CNP预处理组的成熟卵母细胞线粒体DNA的拷贝数为(510 078.4±28 906.0),明显高于对照组的((416 558.5±51 743.0),P<0.05)。综上表明:C型钠钛预处理可以有效改善牛卵母细胞的体外成熟质量。
- 张春强欧阳效晴张通栗瑞兰范晓梅张家新
- 关键词：牛卵母细胞体外成熟线粒体
- 血浆抗苗勒氏管激素水平预测荷斯坦牛胚胎生产能力的研究初报被引量：5
- 2014年
- 为了验证抗苗勒氏管激素(AMH)作为标记物预测荷斯坦牛胚胎的生产能力,为选择供体牛进行胚胎生产提供一种简便有效的方法。本研究测定了10头供体牛在促性腺激素注射前后血浆中AMH浓度,结果表明促性腺激素处理前后AMH浓度无明显差异(P>0.05)。试验还测定分析了30头供体牛血浆中AMH浓度与胚胎生产数量之间的关系,结果表明,AMH水平与卵巢的储备功能及卵巢反应性有关,与获得的胚胎数量呈显著正相关(r=0.60,P<0.01,n=30),可以作为一种预测荷斯坦牛超数排卵后胚胎生产能力的标记物。
- 薛建华吕小青孙凤俊陈龙李艳华张佳谊朱玉林
- 关键词：AMH荷斯坦牛超数排卵胚胎生产
- 褪黑素提高热应激猪卵母细胞的质量被引量：3
- 2015年
- 为了研究热应激对猪卵母细胞成熟的影响，以及热应激过程中培养基添加褪黑素是否能够缓解生理过高热对卵母细胞的损伤，试验对体外成熟过程中（0～2h）的卵母细胞进行热应激（41℃），并在成熟培养液（M199）中添加褪黑素（1×10-9mol／L），对其后期发育和囊胚细胞数、囊胚细胞凋亡进行检测。结果表明：热应激能够显著降低猪卵母细胞的囊胚率和囊胚细胞数，囊胚细胞凋亡率显著升高，而添加褪黑素后能够缓解热应激对卵母细胞的影响。说明热应激能够影响卵母细胞的成熟，并对卵母细胞的后期发育产生影响，同时在培养液中加入浓度为1×10-9mol／L的褪黑素能够缓解热应激损伤。
- 张振南陈丹朔任立坤刘鹏杨明瑶吴中红李相运
- 关键词：褪黑素卵母细胞热应激囊胚凋亡
- 玻璃化冷冻对猪MⅡ卵母细胞皮质颗粒分布及其激活后胚胎发育能力的影响被引量：3
- 2012年
- 本实验旨在探讨玻璃化冷冻保存对猪MⅡ期卵母细胞皮质颗粒分布和孤雌激活后早期胚胎发育能力的影响。实验将卵母细胞随机分为对照组、毒性实验组和冷冻组。采用EFS40和EDFS40两种玻璃化冷冻液处理,卵母细胞经恢复后对其进行染色,观察皮质颗粒的分布;并对另一部分卵母细胞实施孤雌激活,观察早期胚胎的发育。结果表明:毒性实验组和冷冻组卵母细胞皮质颗粒部分释放、完全释放的比例无显著差异,但均显著高于对照组(P<0.05)。不同毒性处理组和不同冷冻组间对皮质颗粒的分布无显著差异。与毒性实验组相比,冷冻处理组显著降低皮质颗粒在皮质区分布的比例(P<0.05)。EFS40毒性实验组孤雌激活后的存活率、卵裂率、囊胚发育率均显著高于EDFS40毒性实验组(86.6%vs.75.0%)、(61.8%vs.40.7%)、(30.2%vs.23.5%)(P<0.05)。EFS40冷冻组存活率显著高于EDFS40冷冻组,但均显著低于对照组。结果显示,抗冻保护剂处理和玻璃化冷冻均导致猪卵母细胞皮质颗粒释放,与EDFS40相比采用EFS40较适合猪MⅡ期卵母细胞冷冻保存。
- 郑天威傅祥伟吴国权贾宝瑜朱士恩
- 关键词：卵母细胞皮质颗粒OPS法
- 添加阿拉伯半乳聚糖或聚蔗糖对取样体外胚胎冷冻效果的研究
- 2013年
- 本试验对切割取样后和透明带完整的体外受精胚胎进行冷冻-解冻、培养后,比较在常规乙二醇冷冻液(EG FREEZE)中添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(EAS)或5.52%聚蔗糖(EFS)后的冷冻效果。结果表明,对切割取样后的胚胎,添加0.276%阿拉伯半乳聚糖(EAS)冷冻效果最好,胚胎回收率、4h形态完整率、培养24h发育率分别为90.00%、55.56%、11.11%;但是对透明带完整的胚胎,常规乙二醇冷冻液(EG FREEZE)冷冻效果最好,胚胎回收率、4h形态完整率、培养24h发育率分别为100.00%、55.56%、22.22%。
- 韩伟毕江华冯春涛陈龙刘潇裴燕余文莉
- 关键词：体外胚胎冷冻阿拉伯半乳聚糖
- GPX5在成年绵羊附睾中的表达与蛋白定位被引量：8
- 2015年
- 【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase type-5,GPX5)在成年绵羊附睾的表达特征以及GPX5蛋白在附睾中的定位,为绵羊精子在附睾中抗氧化机制的研究提供理论依据。【方法】采取年龄相近的成年蒙古绵羊的附睾、睾丸和输精管。每一只公羊的附睾分别按照附睾头、附睾体和附睾尾进行分割。样品保存于-80℃冰箱,采用实时荧光定量PCR和Western blotting的方法,对成年绵羊的附睾、睾丸和输精管的GPX5表达量进行分析。将新鲜的组织样品各部分切取适合大小浸泡于4%多聚甲醛溶液中24h,按照石蜡切片的方法制作组织切片。用GPX5特异性抗体孵育组织切片,利用DAB显色试剂盒对阳性信号进行标记。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,成年绵羊附睾头GPX5基因的表达量极显著高于附睾体和附睾尾(P<0.01),而在输精管和睾丸几乎不表达。Western blotting的结果显示,GPX5蛋白在成年绵羊附睾头高表达,在附睾体和附睾尾有微量蛋白存在,睾丸和输精管中未发现GPX5蛋白。这表明GPX5主要在成年绵羊附睾头表达;经过免疫组化染色分析,GPX5蛋白主要位于附睾头上皮细胞质以及静纤毛,附睾体和附睾尾中的GPX5蛋白主要集中在静纤毛。在附睾头、附睾体和附睾尾中的精子上以及附睾腔都可以观察到GPX5蛋白,表明GPX5蛋白从附睾上皮分泌到附睾腔中,随着精子在附睾中的运输与精子结合。【结论】在成年绵羊附睾中,GPX5主要由附睾头上皮细胞合成和分泌,在附睾管腔中与精子结合,为精子功能的正常发挥提供保护。
- 栗瑞兰张通范晓梅欧阳效晴张春强曹俊伟张家新
- 关键词：绵羊附睾基因表达蛋白定位
- 父源性印记基因在牛早期胚胎中的表达被引量：1
- 2013年
- 【目的】研究父源印记基因在牛早期胚胎中的表达模式。【方法】利用Real-time PCR技术,检测Gnas、Grb10和Xist这3个父源性印记基因在牛体外受精(In vitro Fertilization,IVF)和孤雌激活(Parthenogenetic Activation,PA)胚胎各发育阶段的表达情况。【结果】对于IVF和PA两种来源的牛胚胎,Gnas在胚胎各发育阶段的表达没有明显差异;Grb10在2细胞阶段的PA胚胎中的表达量明显高于在IVF胚胎的,但从4细胞阶段到囊胚阶段,Grb10在两种来源的牛胚胎中表达没有明显差异;从2细胞阶段到8细胞阶段,Xist在两种来源的牛胚胎中表达没有明显差异,但从16细胞期开始,Xist在PA胚胎中的表达明显高于IVF胚胎的表达量。【结论】对于牛IVF胚胎和PA胚胎,Gnas、Grb10和Xist从2细胞期到囊胚期都可以检测到表达,但表达模式不同。这3个父源性印记基因在牛胚胎发育过程中可能发挥着重要的作用。
- 张春强赵德超韩志玲张文广张家新
- 关键词：早期胚胎
