国家自然科学基金(30972500)
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 相关作者：唐焕文刘林华梁海荣凌晓璇黄明元更多>>
- 相关机构：广东医学院吉林大学深圳市疾病预防控制中心更多>>
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- 氢醌对DNA甲基转移酶表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的分子机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmo/lL HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达水平。结果与对照组相比,DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达量在各HQ处理组细胞中均下降,其中以20.0μmo/lL组细胞的下降最为明显,分别下降46%(P<0.05)、83%(P<0.05)和48%(P<0.05),且DNMT1和DNMT3a的表达量随着HQ剂量的增加而下降。结论 HQ致DNA整体低甲基化下调机制可能与DNMT1、DNMT3a和DNMT3b表达异常有关。
- 凌晓璇梁海荣黄明元杨慧唐焕文
- 关键词：氢醌DNA甲基转移酶基因表达
- 氢醌诱导TK6细胞miR-221表达异常致PARP-1基因下调的机制被引量：9
- 2011年
- 目的探讨氢醌(HQ)致TK6细胞PARP-1基因表达下调的机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为染毒组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测miR-221的表达改变,以蛋白印迹法检测PARP-1蛋白表达量,以生物信息学方法分析miR-221的潜在甲基化相关靶基因。结果与对照组相比,2.5、5.0和10.0μmol/L HQ组细胞PARP-1蛋白量逐渐下降,5.0和10.0μmol/L HQ组miR-221表达量分别下降17%(P<0.05)、42%(P<0.05)。miR-221能与MBD2 mRNA的3’非翻译区(UTR)形成调控复合体。结论 HQ致PARP-1基因下调机制可能与miR-221表达异常有关。
- 刘林华凌晓璇梁海荣翟璐唐焕文
- 关键词：氢醌TK6细胞MICRORNA
- 白血病相关原癌基因在氢醌处理TK6细胞中的表达
- 2012年
- 目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的后续结果。方法用磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测白血病相关原癌基因MPL、BRAF、ERBB2、MYB、MYC和RAF1的表达水平。结果与对照细胞相比,HQ处理细胞MPL和RAF1的mRNA表达量都随HQ剂量增加而上升,其中20μmol/L HQ对原癌基因表达的影响最为明显,分别上升了80%(P<0.05)和35%(P<0.05);MYB、MYC和ERBB2基因的mRNA表达量随HQ的剂量上升而下降。结论 MPL的转录活化很有可能与HQ导致的DNA整体低甲基化有关。
- 凌晓璇刘林华梁海荣戴娟秀郭莲仙唐焕文
- 关键词：氢醌TK6细胞原癌基因
- 低剂量氢醌对TK6淋巴母细胞生物学性状及miR-221表达影响被引量：7
- 2011年
- 目的探讨低剂量氢醌(HQ)对TK6淋巴母细胞的生物学性状及小分子非编码RNA(microRNA)-221(miR-221)表达的影响。方法磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组。应用CCK-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-221的表达改变。结果细胞增殖以48 h最为明显,2.5、5.0和10.0μmol/L组细胞增殖指数分别为1.33(P<0.05)、1.14(P<0.05)和1.12(P<0.05);miR-221表达改变以72 h最为明显,2.5、5.0、10.0μmol/L HQ组细胞miR-221表达量分别抑制了0.31倍(P<0.05)、0.39倍(P<0.05)和0.33倍(P<0.05)。结论低剂量HQ能抑制TK6细胞凋亡和miR-221的表达,促进细胞增殖。
- 刘林华梁小虎凌晓璇唐焕文
- 关键词：氢醌TK6细胞
- 作用钠离子通道海洋生物毒素的研究及检测进展被引量：1
- 2011年
- 离子通道类毒素是一类特异性作用于离子通道的神经毒素,而海洋生物毒素中有许多毒素都是通过作用于Na+通道蛋白来影响与受体有关的一系列细胞调控活动,它们以其独特的化学结构和毒理特性,将成为21世纪研究与开发海洋资源的重要组成部分。本文就海洋生物中几种主要的Na+通道受体神经毒素及其检测技术做一概述,为其研究提供科学参考。
- 袁建辉誉倩文杨慧唐焕文
- 关键词：毒理作用
- 钠离子荧光探针用于检测雪卡毒素的细胞毒性被引量：3
- 2011年
- 目的研究和建立以细胞为基础的结合钠离子荧光探针检测雪卡毒素的方法,为快速、敏感检测雪卡毒素提供科学的实验依据。方法采用雪卡毒素标准品(P-CTX-1)结合乌苯苷和黎芦定处理小鼠脑神经瘤细胞(N-2A),用钠离子荧光探针(CoroNaTM Green)标记细胞,利用多功能酶标仪检测荧光强度,建立雪卡毒素浓度与荧光强度的标准曲线关系式;同时,采用CCK-8法和酶标仪检测毒素处理组细胞的存活率,建立细胞毒性实验的标准曲线关系式;分析比较两种方法的灵敏度。以两种方法分别对采集的33份深海珊瑚鱼样品进行毒素检测,对检测结果作分析比较。结果以细胞为基础的荧光检测法检测样品中毒素的检出限为10-13 g/ml,而细胞毒性试验检测法检测样品中毒素的检出限为10-12 g/ml,其结果具有一定的相关性,且荧光检测法灵敏度比细胞毒性试验高;同时钠离子荧光探针检测法的实验终点比CCK-8法缩短2～4 h。结论以细胞为基础的结合钠离子荧光探针检测法能快速、敏感地检测雪卡毒素,可作为雪卡毒素检测初筛方法推广应用。
- 袁建辉杨慧唐焕文黄薇徐新云刘建军柯跃斌程锦泉庄志雄
- 关键词：雪卡毒素荧光检测细胞毒性
- 大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1基因RNA干扰表达质粒构建与鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的构建并筛选大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因的RNA干扰(RNAi)表达质粒,为职业性疾患的基因治疗探索新途径。方法根据基因序列数据库中报道的PARP-1基因序列及短发夹RNA(shRNA)设计原则,设计、合成用于构建RNAi质粒的寡核苷酸,构建4种重组PARP-1 RNAi质粒,酶切及测序鉴定正确后,以脂质体Li-pofectamineTM2000介导转染大鼠骨髓间充质干细胞。48 h后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转染细胞中PARP-1 mRNA的转录水平,筛选有效的PARP-1 RNAi质粒。结果 4种重组PARP-1 RNAi质粒经酶切及测序证明构建正确。转染后48 h,转染质粒shRNA-PARP-1-532的细胞PARP-1基因抑制效果最明显,mRNA的转录水平下降了78%,可作为后续实验的有效质粒。结论成功构建并筛选出PARP-1基因的RNAi表达质粒,为探索PARP-1基因在疾病中的作用奠定了基础。
- 高羽亭黄明元刘林华梁海荣唐焕文
- 关键词：聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1短发夹RNA骨髓间充质干细胞转染
- 低剂量氢醌对大鼠骨髓间充质干细胞生物学性状及PARP-1表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨低剂量氢醌(HQ)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学性状及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因表达的影响,阐明低剂量HQ对骨髓的毒效应。方法:磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ染毒大鼠BMSCs为处理组。应用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖能力,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PARP-1基因表达的改变。结果:与PBS对照组比较,各剂量组细胞增殖能力明显提高(P<0.05);染毒48 h后,5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞的凋亡率均明显降低(P<0.05);染毒48 h后,2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞PARP-1表达量分别为对照组0.92、0.56(P<0.05)和0.45倍(P<0.05)。结论:低剂量HQ能抑制大鼠BMSCs凋亡和PARP-1基因表达,促进细胞增殖。
- 高羽亭刘林华黄明元梁海荣范洪学唐焕文
- 关键词：氢醌骨髓间充质干细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1
