国家科技支撑计划(2012BAK17B10)
- 作品数：30 被引量：159H指数：8
- 相关作者：薛峰朱国强蒋原孟霞厚华艳更多>>
- 相关机构：江苏出入境检验检疫局扬州大学深圳市易瑞生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程理学更多>>
- 肠炎沙门氏菌SEF14菌毛体外表达条件研究
- 2013年
- 为筛选肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)SEF14菌毛体外表达的最适培养条件,本研究对4种不同培养条件下S.enteritidis SEF14菌毛的体外表达情况进行了比较研究,并通过RT-PCR、透射电镜与免疫电镜观察和SDS-PAGE等方法进行验证。研究表明,其中以TSB肉汤25℃震荡培养24 h后转接20℃继续震荡培养24 h,最后转接粘附因子抗原培养基(CFA)(pH6.0)于37℃静置培养50 h^60 h的SEF14菌毛表达量最高。RT-PCR结果显示在该培养条件下SEF14菌毛主要亚单位蛋白编码基因sefA mRNA表达水平最高,在透射电镜和免疫电镜下均可观察到丰富的SEF14菌毛。SDS-PAGE结果显示,所抽提的菌毛蛋白大小为14.3 ku,与相关报道一致,而且等量菌泥的抽提量最大。
- 朱春红段晓丽厚华艳龚建森张江英姚丰华孟霞朱国强
- 关键词：肠炎沙门氏菌RT-PCR电镜观察
- 沙门氏菌菌毛研究进展被引量：13
- 2013年
- 基因组生物信息分析表明沙门氏菌同时含有多种菌毛操纵子基因序列,在不同血清型沙门氏菌中具有多样性分布特征,很可能是不同血清型沙门氏菌在不同环境下的进化结果。本文就沙门氏菌菌毛操纵子编码基因的分类,菌毛分子结构特征及不同菌毛在遗传进化、致病性、传染性中发挥的作用做简要综述。
- 朱春红孟霞厚华艳龚建森张江英朱国强
- 关键词：沙门氏菌生物学特性
- C18-磁性纳米颗粒萃取虾肉中氯霉素残留被引量：3
- 2012年
- 建立了一种用C18键合磁珠固相萃取虾肉中氯霉素残留的方法。在Fe3O4超顺磁性纳米颗粒的表面键合C18基团,制备双功能反相萃取颗粒。用该颗粒对样品中的氯霉素残留进行固相萃取,对结合时间、温度、磁珠用量等因素进行了优化,建立磁珠法兽药残留固相萃取方法。用标准方法(SN/T 1864-2007)对萃取所得产物进行检测。经过优化,C18键合磁珠的最佳萃取条件为50℃结合5 min,用1 mL甲醇洗脱3次。检测结果显示该方法具有良好的精密度和回收率。在0.1～10μg/kg之间具有良好的线性关系,相关系数为0.9941,检出限为0.1μg/kg。该方法灵敏度高、重现性好、准确度高,可满足虾肉中氯霉素残留检测的需要。
- 王西丽陈巧燕李金峰李颖薛峰蒋原朱海
- 关键词：固相萃取氯霉素
- 进出口食品中不同血清型沙门氏菌PFGE和MLST分型比较研究被引量：24
- 2014年
- 目的通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)两种方法对进出口食品中不同血清型沙门氏菌的分辨力和应用价值进行了比较研究。方法采用PFGE和MLST两种方法对进出口食品中分离得到的鼠伤寒及肠炎两种血清型共30株沙门氏菌进行分型研究。结果两种血清型共30株沙门氏菌经PFGE分型可得到23种型别,DI值为0.9563;鼠伤寒和肠炎两种血清型菌分别经PFGE分型,DI值分别为1.000和0.9048。MLST对30株沙门氏菌分型得到4种ST型,DI值为0.5793;鼠伤寒和肠炎两种血清型菌分别经MLST分型,DI值分别为0.2571和0.1333。结论 在分辨力方面,PFGE更适合于同一沙门氏菌血清型的分型,MLST则适合于不同沙门氏菌血清型间的分型。MLST在替代、补充血清型分型方面有潜在的优势,PFGE在溯源研究方面更胜一筹。
- 刘慧玲万志刚洪小柳谢丹妮黄李华赵芳薛峰蒋源吕敬章
- 关键词：食品鼠伤寒沙门氏菌肠炎沙门氏菌脉冲场凝胶电泳多位点序列分型
- 心理应激对犬认知的影响
- 2015年
- 美国心理学家R．S．Lazarus等[1]把心理应激概括为个体对外界环境有害物、威胁、挑战认知和评价后所产生的心理生理行为反应。适宜的心理应激刺激可使身体更好地适应环境变化，提高适应能力，改善认知功能，有利于动物维持稳定的健康状态[2]。长期的过度紧张和焦虑意味着这种努力的适应需要大量能量，从而损害其他重要生理功能，导致学习记忆能力下降、认知功能改变，以及行为异常[3]。
- 孙明亮王威包军
- 关键词：心理应激学习记忆能力生理功能心理学家环境变化
- 河南省4家大型屠宰场中预冷后肉鸡胴体沙门菌污染水平及耐药状况分析被引量：6
- 2018年
- 目的分析河南省4家大型屠宰场中预冷后肉鸡胴体沙门菌污染水平及耐药状况。方法以河南省4家屠宰量为15 000～50 000羽/日的大型屠宰场为采样点，共采集269份预冷后肉鸡胴体进行沙门菌污染检测，对样品中沙门菌进行检测和分离，采用微量半同体氯化镁孔雀绿最可能数（MPN）法对样品中沙门菌进行定量检验，采用微量肉汤稀释法测定分离株对8种抗生素的最低抑菌浓度（MIC），并进行药敏试验。结果共分离出沙门菌131株，污染率为48.7%，平均污染水平为1.32 MPN/g。131株沙门菌共检出8种血清型，其中肠炎沙门菌最多，为93株（71.0%），其次为印第安纳沙门菌21株（16.0%）。只有2株肠炎沙门菌（1.5%）对所有测试的抗生素敏感，其余129菌株对8种抗生素均有不同程度的耐药，其中对奈啶酸（NAL）的耐药率最高，为79.4%（104株），多重耐药菌株为51株（38.9%）。结论河南省4家大型屠宰场中预冷后肉鸡胴体沙门菌污染率较高，污染水平较为严重，血清型复杂。
- 白莉李薇薇韩海红刘继开付萍张秀丽郭云昌
- 关键词：沙门菌感染耐药分析屠宰场
- C_(18)键合磁珠固相萃取-液质联用检测蜂王浆中磺胺二甲嘧啶残留被引量：4
- 2012年
- [目的]建立一种应用C18键合磁珠固相萃取-液质联用检测蜂王浆中磺胺二甲嘧啶残留的方法。[方法]MCX固相萃取小柱联合C18磁珠对蜂王浆进行前处理,用HPLC-串联质谱仪对净化后样本进行检测。[结果]该方法的线性范围是5～80μg/kg,相关系数0.993 1。添加水平为5、10、20μg/kg时各种化合物的平均回收率范围为93%～104%,RSD值均不大于11.3%。[结论]该方法简单、快速,结合自动化设备,可实现蜂王浆样品中磺胺二甲嘧啶测定前处理的自动化。
- 李金峰李颖蒋原薛峰朱海
- 关键词：固相萃取磁珠磺胺二甲嘧啶超高效液相色谱-串联质谱
- 肠炎沙门菌Ⅰ型菌毛主要亚单位FimA原核表达及纯化被引量：2
- 2014年
- 为探讨肠炎沙门菌非编码小RNA(non-coding small RNA)IsrE在转录后水平是否参与对fimA的调控作用,在大肠杆菌中构建并表达FimA重组蛋白,并对其培养条件进行优化,制备高纯度FimA重组蛋白。利用原核表达载体p ET-28a(+)构建出能表达fimA的重组质粒,并分别对IPTG浓度、诱导温度和诱导时间等条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和增大其可溶性,最后经Ni-NTA亲和层析分离纯化FimA重组蛋白。通过酶切、测序和Western blot鉴定分析,成功构建并表达肠炎沙门菌I型菌毛主要亚单位FimA,蛋白分子质量约为19.3 kDa,且主要以包涵体的形式表达,经Ni-NTA亲和层析纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE中显示单一条带。本研究构建、表达并获得纯度较高的重组蛋白FimA,为进一步研究和验证肠炎沙门菌非编码sRNA IsrE是否在转录后水平参与对fimA的调控奠定了基础。
- 王勇祥孟霞段进坤周明旭周明旭杨溢陶洁
- 关键词：肠炎沙门菌ISRE原核表达
- 食品中4种常见致病菌的磁珠吸附-PCR检测方法研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究磁珠粒子在食品样品中对常见致病菌的吸附效果。方法以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎克罗诺杆菌为研究对象，通过一系列优化，确定磁珠最佳吸附条件，并研究了其在模拟添加样品中的吸附效率。结果最佳吸附条件为：磁珠粒径2．0～3．0μm，磁珠用量50μ1，孵育时间60min，吸附温度37℃。磁珠粒子对模拟添加样品，如果汁、牛奶和鸭肉中大肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎克罗诺杆菌、金黄色葡萄球菌的吸附效率分别为50％～84％、46％～66％及54％～74％。结论磁珠分离技术操作简单、吸附效率高，可满足后续PCR检测的需要。
- 王娉胡玥田雪杨海荣赵勇胜陈颖
- 关键词：食源性致病菌食品卫生
- 进出口食品中金黄色葡萄球菌spa基因的分型被引量：3
- 2014年
- 目的对我国进出口食品中分离得到的金黄色葡萄球菌进行spa基因分型。方法对36株金黄色葡萄球菌的spa基因进行PCR扩增,并对产物进行测序分析,测序结果通过数据库进行spa基因分型。结果共分出16个基因型,分别为t189、t091、t164、t002、t899、t197、t1044、t034、t156、t7400、t2592、t4209、t127、t437和两株新发现的基因型。其中t189型共有13株,t091型共4株,t164和t002型分别为3株,其余型分别为1株。结论 食品中分离出的36株金黄色葡萄球菌spa分型以t189居多,t091型次之,其他14型相对较少。
- 赵芳洪小柳万志刚葛丽雅黄李华刘慧玲薛峰蒋原吕敬章张玲
- 关键词：金黄色葡萄球菌多态性分析
