“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09401-019)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：陈昭烈王启伟李世崇叶玲玲刘红更多>>
- 相关机构：军事医学科学院解放军第307医院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 腺病毒E1B-19K基因过表达对HEK293细胞生长和代谢的影响
- 2012年
- 细胞凋亡是动物细胞大规模培养中影响活细胞密度和目的产品质量的重要因素,过表达抗凋亡基因是目前常用的提高工程细胞凋亡抗性的一种策略。拟在HEK293细胞中过表达腺病毒E1B-19K基因,挑取了不同E1B-19K表达水平的单克隆细胞,考察在不同培养条件下细胞的凋亡水平和代谢情况。E1B-19K的过表达可显著增强细胞在低葡萄糖、低血清和无谷氨酰胺3种培养条件下的抗凋亡能力,使凋亡细胞比例降低60%～80%;E1B-19K的过表达可使批次培养HEK293细胞的衰退期延迟2天,而对细胞的葡萄糖、乳酸和谷氨酰胺等的代谢无显著影响。结果表明,过表达E1B-19K是一种有效减缓HEK293细胞在培养过程中凋亡的策略。
- 叶玲玲刘红李世崇扬振西刘兴茂王启伟陈昭烈
- 关键词：基因HEK293细胞细胞培养代谢
- 一种新型的生物素诱导的真核基因表达调控系统的建立被引量：1
- 2014年
- 为建立一种适用于生物制药工业和基因治疗领域的基因表达调控系统,构建枯草芽胞杆菌生物素连接酶(BS-BirA)与转录激活结构域的融合蛋白,以其表达载体为调控载体;在弱化的CMV启动子上游连接BS-BirA特异的操纵子序列,获得响应载体,从而得到响应于生物素的真核基因表达调控系统BS-Biotin-On。以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因对该系统进行考察,结果表明,与现有的类似调控系统相比,该系统具有良好的诱导率;可通过调节培养体系中生物素的浓度,实现对目的基因表达水平快速、较高效的调节。上述结果表明,BS-Biotin-On系统可能为外源基因的调控表达提供新的选择。
- 叶玲玲刘红李世崇王启伟蓝三春陈昭烈
- 关键词：生物素诱导率
