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重组杆状病毒载体介导螺旋神经节细胞基因转染的实验研究: 目的探讨重组杆状病毒作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒 Bac—GFP,以不同 MOI 的病毒和不同浓度的丁酸钠转染螺旋神经节细胞,通...; 王俊蔡昌枰王士礼; 关键词：杆状病毒丁酸钠螺旋神经节细胞; 文献传递

重组杆状病毒载体介导大鼠螺旋神经节细胞基因转染的研究: 2007年; 目的探讨重组杆状病毒(baculovirus,Bac)作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统制备携带绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,GFP)的杆状病毒载体(Bac-GFP),以不同感染复数(multiplicities of infection,MOI)的病毒和不同浓度的丁酸钠转染大鼠螺旋神经节细胞,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞转染率和绿色荧光蛋白表达强度,并观察杆状病毒和丁酸钠对螺旋神经节细胞的毒性。结果杆状病毒可以高效转染螺旋神经节细胞,转染效率达77.69%。Bac-GFP 转染率和表达强度随着 MOI和丁酸钠浓度的提高而提高。GFP 在转染后6 h 开始表达,第2天达到最高。重组杆状病毒 MOI 小于800以及丁酸钠终浓度小于或等于10 mmol/L 时,对螺旋神经节细胞没有明显细胞毒性。结论重组杆状病毒可以在体外高效安全转染内耳螺旋神经节细胞。; 王俊王士礼蔡昌枰李彪张一帆胡胜平田相龙张敏; 关键词：螺旋神经节转染

杆状病毒介导内耳基因治疗的实验研究被引量：3: 2007年; 目的探讨重组杆状病毒作为内耳基因治疗载体的可行性及其转染特点。方法应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,建立新生大鼠耳蜗Corti器体外模型,加入携带报告基因的病毒悬液,观察外源基因表达情况,并将其通过圆窗直接显微注射进入豚鼠内耳,观察杆状病毒在体内的转染特点。结果Bac-GFP联合丁酸钠可以高效转染毛细胞和螺旋神经节细胞,但并没有改变Corti器的正常结构。体内试验显示杆状病毒可以忠实和长效转染螺旋神经节细胞,而未被补体系统灭活。结论实验证实杆状病毒有希望成为内耳基因治疗的新型载体。; 王俊王士礼蔡昌枰李彪张一帆; 关键词：杆状病毒丁酸钠螺旋神经节细胞 CORTI器

重组杆状病毒载体介导新生大鼠耳蜗Corti器体外模型基因转染研究: 2007年; 目的建立新生大鼠耳蜗Corti器体外培养模型,探讨重组杆状病毒作为内耳基因转染载体的可行性及其转染特点。方法应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,建立新生大鼠耳蜗Corti器体外模型,加入携带报告基因的病毒悬液,观察外源基因表达情况。结果耳蜗Corti器体外培养48小时后,培养组织生长良好。Bac-GFP联合丁酸钠可以高效转染毛细胞和螺旋神经节细胞,同时并没有改变Corti器的正常结构。结论新生大鼠离体内耳组织转基因培养法是内耳基因治疗实验研究的一种可行方法。杆状病毒可以在体外高效、安全、快速的转染毛细胞和螺旋神经节细胞,有希望成为内耳基因治疗的新型载体。; 王俊李彪蔡昌枰张一帆王士礼胡胜平田相龙张敏; 关键词：杆状病毒丁酸钠 CORTI器

胶质细胞源性神经营养因子被引量：1: 2008年; 胶质细胞源性神经营养因子（glial cellline-derived neurolrophic factor，GDNF）是近年来才被发现而且被证明有确定生物学活性的一种神经营养因子，其在促进神经细胞的功能维持和损伤修复方面有着其他神经营养因子无可比拟的强效作用。本文就GDNF的结构特点、生物学特性及临床应用前景三方面的研究进展进行综述。; 陈艳春王士礼

感音神经性聋基因治疗: 2006年; 1996年基因治疗应用于内耳,目前基因治疗被认为是感音神经性聋治疗最有希望的方法之一。目前内耳基因治疗正从试验可行性研究转向内耳安全导入的探索上。本文从内耳常用治疗基因、内耳基因转导径路及常用载体三个方面的最新研究进展进行综述。; 王俊王士礼

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上海市科学技术委员会资助项目(044119744)