国家自然科学基金(31271358)
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 相关作者：倪海波高殿帅张宝乐虞正权刘惠祥更多>>
- 相关机构：徐州医学院苏州大学张家港市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金枣庄市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 组蛋白高乙酰化介导的Egr-1结合促进gdnf基因高转录被引量：4
- 2015年
- 目的探讨大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II区组蛋白H3K9高乙酰化引发该基因高转录的机制。方法采用Ch IP-PCR技术检测了大鼠C6星形胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中gdnf基因启动子II区转录因子Egr-1结合位点处H3K9的乙酰化水平以及Egr-1与该启动子的结合能力;利用Real-time PCR和Ch IP-PCR技术,检测了组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)和去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II区Egr-1结合位点处H3K9的乙酰化水平、Egr-1与之的结合能力以及该基因转录水平的影响。结果较之正常星形胶质细胞,C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II区Egr-1结合位点处H3K9的乙酰化水平显著升高,并且Egr-1与之的结合能力也显著升高(P<0.01)。当Curcumin显著降低了Egr-1结合位点处H3K9乙酰化水平时,Egr-1与启动子II区的结合量以及gdnf基因m RNA的表达量都显著下调(P<0.05);而当TSA显著升高了Egr-1结合位点处H3K9乙酰化水平时,Egr-1与启动子II区的结合量以及gdnf基因m RNA的表达量都显著升高(P<0.05)。结论在大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子II区H3K9高乙酰化介导的Egr-1结合量升高可能是其高转录的原因。
- 李周儒刘捷雷宇倪海波蔡红星张宝乐
- 关键词：GDNF组蛋白乙酰化EGR-1
- 胶质细胞源性神经营养因子对胶质瘤促增殖作用的基因表达谱研究
- 2017年
- 目的研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)促进胶质瘤增殖的差异表达基因。方法体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞分为3组,正常对照组(对照组)和实验组(GDNF 70μg·L-1干预6 h组和GDNF 70μg·L-1干预12 h组)。利用全基因组表达谱芯片技术进行分析,实时定量PCR验证芯片结果,并对差异基因进行聚类分析和信号转导通路分析等。结果与对照组比较,GDNF干预6 h组和GDNF干预12 h组分别上调772和664个基因,下调282和259个基因。其中,最显著的上调基因为NTN1、SLC7A5、NDST1、CD24、NFIC、KDM4A、CEACAM1、SOCS2。下调基因主要有Sctr、C4-2、GNAL、HSD3B1、Stfa2l1等。基于KEGG数据库进行生物学通路分析显示上调基因主要参与葡糖胺聚糖半乳糖基转移酶-硫酸盐肝素的生物合成、细胞的黏附连接、癌症的转录失活、JAK-STAT信号通路等。选取8个差异基因(CD24,CEACAM1、Synpo、Ndst1、Nfic、Ntn1、Socs2、Ccdc6)进行RT-PCR验证,GDNF干预12 h组与对照组比较,CEACAM1、Nfic、Socs2、Ccdc6基因表达倍数显著增加(P<0.05)。提示差异基因的mRNA变化趋势与表达谱结果一致。结论应用全基因组表达谱芯片并结合生物信息学软件分析差异表达基因,为GDNF促进胶质瘤细胞增殖的分子生物学机制的研究提供了依据。
- 王莉肖成华高殿帅
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子大鼠C6胶质瘤细胞全基因表达谱差异基因
- HAT/HDAC抑制剂在胶质瘤中的研究进展被引量：1
- 2015年
- 胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,由于其恶性程度高,手术切除根治困难,对放化疗药物敏感性差等特点,预后极差。组蛋白乙酰基转移酶(HAT)/组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂可通过改变染色质特定区域组蛋白的乙酰化水平,从而影响基因的表达,成为一类新的抗肿瘤药物,具有广阔的开发前景和应用价值。本文就HAT/HDAC抑制剂在胶质瘤治疗方面的研究进展及其作用机制进行综述。
- 倪海波刘惠祥虞正权
- 关键词：神经胶质瘤组蛋白乙酰化组蛋白乙酰基转移酶组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- 曲古抑菌素A对C6胶质瘤细胞中胶质细胞系源性神经营养因子基因转录活性的影响
- 2015年
- 胶质细胞系源性神经营养因子（GDNF）被认为是与胶质瘤关系最密切的生长因子之一,参与肿瘤细胞的扩散、种植[1].我们通过使用不同浓度的组蛋白去乙酰化酶（HDACs）抑制剂曲古抑菌素A （TSA）干预大鼠C6胶质瘤细胞株,观察其对GDNF基因转录活性及启动子区组蛋白乙酰化的影响,探讨胶质瘤细胞中GDNF基因表达调控的机制.
- 倪海波刘惠祥高殿帅高嵘
- 关键词：胶质细胞系源性神经营养因子C6胶质瘤细胞基因转录活性曲古抑菌素A胶质瘤细胞株组蛋白乙酰化
- 大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区组蛋白高乙酰化可能参与了其高转录调控过程被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因高转录与其启动子Ⅰ区组蛋白乙酰化的关系。方法:应用Real-time PCR和ChIP-PCR技术分别检测了大鼠正常星形胶质细胞和C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达水平以及其启动子Ⅰ区组蛋白H3K9的乙酰化程度;利用Real-time PCR技术,检测了不同浓度的组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素(Curcumin)或去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理对C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA表达的影响。结果:较之正常星形胶质细胞,C6胶质瘤细胞中gdnf基因mRNA的表达量极显著增高(P<0.01),并且其启动子Ⅰ区H3K9的乙酰化水平也显著升高(P<0.05)。C6胶质瘤细胞经Curcumin处理24 h后,gdnf基因mRNA的表达量随药物浓度的升高而降低,且100μmol/L作用浓度时其表达量下降了74.17%(P<0.001);相反,TSA处理后gdnf基因mRNA的表达量呈上升趋势,且200nmol/L组其表达量约上升145.35%(P<0.05)。结论:在大鼠C6胶质瘤细胞中gdnf基因启动子Ⅰ区H3K9发生了高乙酰化修饰,这种修饰可能是其高转录的原因。
- 倪海波张宝乐任庆先续继军高殿帅虞正权
- 关键词：GDNF启动子组蛋白H3乙酰化胶质瘤
- 16种脑胶质瘤动物模型的N—cadherin肽链差异性研究
- 2013年
- 目的探讨不同动物模型与人的神经钙黏素（N—cadherin）肽链之间的差异，从而评估这些动物作为胶质瘤动物模型的可行性。方法采用Clustalx1．83和MEGA4．0软件对16种动物的N—cadherin肽链进行最大似然分析。结果得到不同种间N—cadherin成熟肽链的氨基酸变化位点和1棵最大似然合意树。结论作为细胞表面重要的黏附分子，N—cadherin在肿瘤转移与入侵过程中起着关键性作用，因此构建胶质瘤动物模型时，有必要使所采用的动物模型的N—cadherin肽链尽可能与人类的一致。
- 熊晔高殿帅
- 关键词：胶质瘤动物模型
- 大鼠羊膜上皮细胞的生物学特性
- 2013年
- 目的探讨建立大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法及观察其生物学特性。方法从妊娠14～16 d的SD大鼠胎盘剥离羊膜,用胰蛋白酶消化法分离大鼠羊膜上皮细胞,采用免疫荧光细胞化学和流式细胞仪分析细胞表型特征;使用含有10%胎牛血清(FBS)和100 U/ml青霉素-链霉素(PS)溶液的DMEM/F-12的培养基进行细胞培养。结果每次采用胰蛋白酶消化法从1只孕鼠分离的上皮细胞数为(1～6)×105/ml,足够达到贴壁培养浓度。所分离的羊膜上皮细胞表达神经前体细胞特异性蛋白nestin和骨髓间充质干细胞表面标记蛋白CD29和CD44,但是未成熟神经元标记蛋白β-Ⅲ-tublin、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及造血干细胞表面标记蛋白CD34表达阴性。在完全培养基培养条件下,羊膜上皮细胞生长增殖较快,原代培养1 w后即可传代。结论建立了大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定的方法,大鼠羊膜上皮细胞具有神经前体细胞的特异标志和间充质干细胞的某些表型特征。
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