四川省卫生厅科研基金(100236)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- C-erbB-2 shRNA对小鼠肺腺癌细胞化疗敏感性的影响及其机制被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨人表皮生长因子受体2短发夹RNA(C-erbB-2shRNA)对小鼠肺腺癌Lewis细胞化疗敏感性的影响及其机制,为非小细胞肺癌尤其是腺癌的治疗提供新的思路。方法:常规培养小鼠肺腺癌Lewis细胞,分为未转染组、pGPU6/RFP/Neo-shNC组和pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组;应用Lipofectamine 2000将质粒快速转染各组Lewis细胞;应用RT-PCR法检测各组细胞C-erbB-2mRNA表达水平;应用Western blottting法检测各组细胞C-erbB-2蛋白表达水平。将Lewis细胞分为未转染对照组、pGPU6/RFP/Neo-shNC组、卡铂组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2+卡铂组和pGPU6/RFP/Neo-shNC+卡铂组;应用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组C-erbB-2mRNA和蛋白表达水平均低于未转染组和pGPU6/RFP/Neo-shNC组;pGPU6/RFP/Neo-erbB-2+卡铂组细胞凋亡率高于其他各组(P<0.01);与其他各组比较,pGPU6/RFP/Neo-erbB-2+卡铂组Bcl-2蛋白表达水平下降、Bax蛋白表达水平增加。结论:C-erbB-2shRNA能增强小鼠肺腺癌Lewis细胞对卡铂的敏感性,其机制可能是通过上调Bax蛋白、下调Bcl-2蛋白表达,进而增强卡铂诱导的细胞凋亡。
- 曹新梅张岱权王栩夏纪毅黄黎高燕
- 关键词：人表皮生长因子受体2短发夹RNA肺腺癌细胞
- 靶向HER2基因的siRNA联合卡铂对肺腺癌A549细胞的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨靶向HER2基因的siRNA联合卡铂对肺腺癌A549细胞的抑制作用。方法设计并合成3对靶向HER2基因的siRNA(2621组、1724组、1491组),分别转染肺腺癌A549细胞,同时设阴性对照组及空白组。应用实时荧光定量PCR法和免疫组化法检测细胞内HER2 mRNA及其蛋白的表达。应用流式细胞术检测卡铂与HER2 siRNA联合应用时肺癌A549细胞的凋亡率。结果 2621组和1724组HER2 mRNA及蛋白表达均低于1491组和阴性对照组。流式细胞术检查显示,各组间细胞凋亡率比较P<0.01,HER2 siRNA+卡铂组细胞的凋亡率均高于对应浓度的卡铂组。结论 siRNA能抑制HER2基因在肺癌A549细胞中的表达,并与卡铂协同诱导癌细胞凋亡。
- 曹新梅张岱权王栩任德莲刘代玉
- 关键词：RNA干扰卡铂
- shRNA对小鼠Lewis细胞C-erbB-2基因表达的影响
- 2013年
- 目的:探讨shRNA表达质粒抑制小鼠肺腺癌Lewis细胞C-erbB-2基因的表达。方法:构建pGPU6/RFP/Neo-shNC质粒和4种GPU6/RFP/Neo-erbB-2质粒。按DNA∶LIPOFECTAMINE 2000为1∶2、1∶2.5、1∶3,将pGPU6/RFP/Neo-shNC质粒转染小鼠肺腺癌Lewis细胞,应用荧光显微镜观察转染效率。实验分组:pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-347组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-1944组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-2310组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-3669组、pGPU6/RFP/Neo-shNC组、空白组,应用RT-PCR技术检测转染前后C-erbB-2 mRNA的水平,应用Western blotting技术检测其蛋白的表达。结果:DNA∶Lipofectamine 2000为1∶2.5时,转染效率最高,后续试验均按此比例进行转染。4种pGPU6/RFP/Neo-erbB-2质粒均能降低C-erbB-2 mRNA和蛋白的表达,其中干扰效果最好的是pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-3669。结论:pGPU6/RFP/Neo-erbB-2-mus-3669质粒能有效抑制小鼠Lewis细胞C-erbB-2基因的表达。
- 曹新梅张岱权王栩郑春燕
- 关键词：C-ERBB-2SHRNA
