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深圳市科技计划项目(200702156)
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
相关作者:
许锦贝
林苏霞
王晓梅
林晓潭
梅树江
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相关机构:
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发文基金:
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相关领域:
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年份
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2009
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小鼠腔前卵泡体外培养成熟-染色体分析技术的建立
被引量:3
2009年
背景与目的:初级卵母细胞生长过程中对理化因子反应敏感,拟建立小鼠腔前卵泡体外培养成熟(IVG)一染色体分析技术,为生殖毒理学提供有效的检测模型。材料与方法:采用机械分离法从12~14日龄昆明小鼠的卵巢中分离出直径为140—160μm的腔前卵泡,单个卵泡放入微液滴培养体系中,隔天半量换液,连续培养10d,对成活卵泡体外诱导超排,于16~24h后,检测卵母细胞成熟情况,分别计数停滞在生发泡期(GV)、生发泡期破裂(GVBD)和排出第一极体(PB)的卵母细胞数,对卵母细胞进行染色体数目与结构分析,并与体内发育体外成熟卵母细胞(IVM)及体内超排成熟卵母细胞(IVC)进行比较分析。结果:从4只小鼠卵巢中分离得到332个腔前卵泡,培养早期卵泡直径增长显著,随后呈“摊鸡蛋”样生长,部分形成假腔。培养10d后存活率为95.78%(318/332),激索诱导排卵后,卵丘-卵母细胞复合体排出率72.01%(229/318),其中11.80%(27/229)停滞在GV期,39.30%(90/229)发生GVBD,47.16%(108/229)发育成熟,排出第一极体(PB),1.74%(4/229)发生孤雌活化。IVG与IVM、IVC两种方法获得的卵母细胞染色体对比分析,未见明显的染色体数目与结构异常。结论:小鼠腔前卵泡体外培养成熟,可获得与体内生长相同的成熟卵母细胞,染色体分析未见异常,可成为一种良好的生殖毒理学体外检测与卵泡发育机制研究模型。
梅树江
林晓潭
王晓梅
林苏霞
许锦贝
程锦泉
马汉武
谢旭
关键词:
腔前卵泡
体外培养
染色体畸变
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