广东省科技计划工业攻关项目(2012B031800258)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 相关作者：杨艳旗华平陶俊杨淞然刘家良更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院广州市第一人民医院四川省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MRI活体示踪心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的移植被引量：2
- 2013年
- 背景:干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的:观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法:直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,获得的细胞进行免疫鉴定。以新型超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞,体外MRI成像确定其体内示踪的可行性。标记后锥虫蓝拒染试验、MTT比色试验分别检测标记细胞的活力、增殖情况。60只SD大鼠随机分为3组,制备大鼠心肌梗死模型2周后再次开胸移植含标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液、含未标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液和等量PBS。于移植后第1天、第3周行MRI检查,动态观察移植细胞的分布、迁徙,并根据MRI图像定位选择性行CD90免疫组化检查。结果与结论:骨髓间充质干细胞标记后,普鲁士蓝染色见胞浆内蓝色铁颗粒,标记效率为99%,标记细胞与未标记细胞间锥虫蓝拒染率、MTT吸光度差异无显著性意义。体外MRI可检测到标记细胞,并在T2WI及T2W/FFE序列上呈低信号。细胞移植1d后,在T2WI及T2W/FFE序列上可见标记细胞在梗死心肌边缘呈类圆形低信号;移植3周后,移植区域信号边界模糊,范围扩大,对比度降低。CD90免疫组化检测证实移植细胞可由梗死边缘向梗死区域迁徙。结果可见新型超顺磁性氧化铁可成功对大鼠骨髓间充质干细胞进行标记,细胞标记后可被MRI检测。
- 华平王友于杨淞然刘家良刘立宝陶俊杨艳旗
- 关键词：干细胞骨髓干细胞心肌梗死骨髓间充质干细胞干细胞移植活体
- Caspase-3沉默对缺血缺氧大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响
- 2013年
- 【目的】探讨沉默caspase-3对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)在体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。【方法】构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染MSC。建立缺血缺氧模型,流式细胞术和Hoechst荧光染色法检测细胞的凋亡情况。Western blot检测caspase-3的蛋白表达,Real-time PCR检测caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA表达。【结果】重组慢病毒成功转染MSC。缺血缺氧环境下,转染组的细胞凋亡率为(13.66±0.20)%,低于空载体组的(21.86±0.43)%和空白对照组的(22.28±0.48)%(P<0.01)。沉默caspase-3后caspase-3表达下调,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。【结论】沉默caspase-3能显著提高MSC在缺血缺氧环境下的存活能力。
- 华平刘家良杨淞然陶俊江慧琦王萌杨艳旗
- 关键词：骨髓间充质干细胞基因沉默CASPASE-3缺血缺氧凋亡
- 围术期口服辛伐他汀减轻体外循环后全身炎症反应的随机对照研究
- 2015年
- 目的探讨围手术期口服辛伐他汀减轻体外循环心脏瓣膜手术后患者全身炎症反应的作用。方法将130名体外循环下行心脏瓣膜手术的患者随机分成两组,试验组:65例,围手术期口服辛伐他汀片20 mg/晚;对照组:65例,口服同剂量安慰剂。记录患者术前临床基线情况和术后辅助呼吸时间、24小时尿量与引流量、ICU停留时间和术后10天左室射血分数等;在主动脉阻断前、主动脉开放后不同时间点抽血测定患者血清肌钙蛋白T(c Tn T)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)、血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr)。结果围手术期口服辛伐他汀可明显降低辅助呼吸时间(9.92±3.42 h VS 11.69±4.79 h,P=0.03)和改善术后左室射血分数(58.91%±8.48%VS55.50%±7.04%,P=0.024),但对于术后24 h尿量、引流量和ICU停留时间的影响,差异无统计学意义;服用辛伐他汀相对于对照组可降低血浆c Tn T、CKMB、TNF-α、IL-6、IL-8、CRP、BUN和Cr的水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论围手术期口服辛伐他汀可以减轻体外循环手术引起的全身炎症反应并减轻心脏、肾脏等器官损伤,改善患者预后。
- 刘剑扬陶俊李鸿木杨艳旗华平
- 关键词：辛伐他汀体外循环炎症反应
- 慢病毒介导的caspase-3沉默对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨沉默caspase-3对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染MSCs,通过real-time PCR和Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果。采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。Real-time PCR检测bcl-2和bax mRNA的表达。Hoechst荧光染色法检测细胞的凋亡情况。结果:Real-time PCR和Western blotting结果均表明成功建立稳定转染shRNA-caspase-3的大鼠MSCs细胞株。沉默caspase-3使MSCs的增殖率明显提高(P<0.05),且S期细胞百分比明显增多,为(52.66±0.30)%。沉默caspase-3后bcl-2 mRNA表达上调,bax mRNA表达下调,bcl-2/bax比值升高(P<0.05)。转染组的细胞凋亡率为(15.01±1.73)%,低于空载体组的(25.67±3.05)%和空白对照组的(23.67±1.16)%(P<0.05)。结论:沉默caspase-3能调控MSCs的细胞周期,促进细胞增殖,减少细胞凋亡。
- 华平刘家良杨淞然江慧琦王萌陶俊杨艳旗
- 关键词：骨髓间充质干细胞基因沉默半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 围术期口服辛伐他汀对心脏瓣膜置换患者术后炎症因子与认知执行功能的影响
- 2013年
- 目的：观察围手术期口服辛伐他汀（simvastatin）对成人体外循环（CPB）心脏瓣膜置换术患者血浆炎症因子、神经损伤标记物及认知、执行功能的影响。方法择期行心脏瓣膜置换术患者51例，随机分为辛伐他汀组（S组）和对照组（C组）。S组于围手术期口服辛伐他汀片20 mg/晚（术前口服＞5 d，术后第2天开始口服）；C组口服安慰剂。分别于术前、术后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h抽取中心静脉血，测定术前、术后6～72 h血浆神经元特异性烯醇化酶（NSE）及S100β浓度，术前、术后6～24 h血浆炎症因子（TNFα、IL-6、IL-8）浓度；分别于术前1天、术后第5天使用简易智能状态检测法和蒙特利尔认知评估量表对患者进行认知评估，使用 Mattis 痴呆评定量表的主动与持续部分进行执行功能评估，并同时运用汉密尔顿焦虑量表和汉密尔顿抑郁量表评估患者情绪状态。结果两组患者在基线数据，术前、术后患者发病率与死亡率无明显差别。S组术后6 h、12 h血浆NSE、S100β浓度及术后6 h、12 h、24 h血浆IL-6浓度低于C组（P＜0.05）；S组术后认知、执行功能评估得分高于C组（P＜0.05），S组术后3例（12.5%）发生认知功能障碍（POCD），C 组术后7例（29.17%）发生 POCD，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在体外循环心脏瓣膜置换术患者中，围手术期口服辛伐他汀可减少体外循环后血浆炎症因子的浓度，降低POCD发生，改善患者执行功能。
- 陶俊华平杨淞然刘剑扬杨艳旗
- 关键词：心脏瓣膜体外循环辛伐他汀
