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广东省科技厅科技计划项目(01656900179474038)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关机构：广州市番禺区石楼人民医院广州医科大学更多>>
发文基金：广东省科技厅科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇胰腺
  • 1篇胰腺癌
  • 1篇胰腺癌细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇腺癌
  • 1篇腺癌细胞
  • 1篇基因
  • 1篇共表达
  • 1篇癌细胞
  • 1篇NK4
  • 1篇NK4基因
  • 1篇PUMA
  • 1篇HGF

机构

  • 1篇广州医科大学
  • 1篇广州市番禺区...

传媒

  • 1篇国际医药卫生...

年份

  • 1篇2013
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
共表达人PUMA和HGF／NK4基因的重组腺病毒的制备及在胰腺癌细胞中的表达
2013年
目的制备同步表达HGF／NK4基因和PUMA基因的重组腺病毒，感染胰腺癌细胞后检测基因的有效表达。方法将PUMA基因和HGF／NK4基因以串联方式依次克隆至腺病毒穿梭载体，构建重组穿梭载体pAdTrack-PUMA-NK4，转化大肠杆菌BJ5183并在细菌内与腺病毒载体同源重组制备重组腺病毒载体pAd-PUMA-NK4。PacⅠ酶切后转染至HEK293细胞包装得到重组腺病毒。一定滴度的腺病毒感染人胰腺癌细胞株，荧光定量RT-PCR检测细胞中NK4和PUMA基因mRNA表达水平。结果双酶切重组pad-PUMA-NK4穿梭载体鉴定证实目的基因PUMA和HGF／NK4正确克隆；重组腺病毒载体经PacⅠ酶切得到特异的酶切产物转染HEK293细胞后成功包装出重组腺病毒；病毒感染胰腺癌细胞后3-9d内PUMA和NK4基因的表达水平较高，整体持续表达可维持2w。结论成功构建了同时表达NK4和PUMA基因的重组腺病毒载体并包装出相应的重组腺病毒颗粒，该腺病毒能有效感染胰腺癌细胞并高表达NK4和PUMA基因，这为进一步确定NK4和PUMA基因的功能及指导双基因联合治疗胰腺癌提供了理论依据和必要的材料。
黄柏强李二毛孔冠群黄志平
关键词：NK4PUMA胰腺癌
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