国家自然科学基金(31070121)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:王庆敏刘秋红唐瑛肖安雷呈祥更多>>
- 相关机构:中国人民解放军海军医学研究所成都军区昆明总医院更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌MPT64抗原对巨噬细胞的影响及其与Toll样受体-2的相关性被引量:2
- 2014年
- 目的观察结核分枝杆菌MPT64抗原对RAW264.7巨噬细胞凋亡及Toll样受体-2(toll-like receptor 2,TLR-2)表达的影响。方法将佛波肉荳蔻醋酸(phorbol myristoyl acetate,PMA)分化的RAW264.7巨噬细胞分为阴性对照组、卡介菌纯蛋白衍化物(purified protein derivative of BCG,BCG-PPD)诱导组、PPD+MPT64共同作用组,孵育16 h后,Annexin V-FITC染色,用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)和Western blot检测细胞凋亡、细胞膜及细胞内TLR-2的表达情况。结果 BCG-PPD可以诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡,PPD+MPT64作用组的细胞凋亡水平明显低于BCG-PPD组,随着MPT64蛋白浓度的逐渐增高,凋亡水平逐渐降低。FCM和Western blot技术检测结果表明,BCG-PPD组的TLR-2表达水平明显高于阴性对照组,在诱导16 h达到高峰。而在PPD+MPT64组,细胞膜及细胞内的TLR-2水平均明显低于BCG-PPD组。结论 MPT64抗原能够抑制PPD诱导的巨噬细胞凋亡,可能通过调节TLR-2的表达水平来实现。MPT64抗原可能是一种毒力因子,在结核分枝杆菌感染机体的过程中,通过抑制巨噬细胞凋亡参与宿主与结核分枝杆菌的相互作用。
- 王庆敏刘淑鹏唐瑛武文斌张术刘秋红姚永杰
- 关键词:结核分枝杆菌巨噬细胞凋亡
- 结核分枝杆菌MPT64抗原对淋巴细胞的作用
- 2016年
- 目的分析结核分枝杆菌MPT64抗原对EL4淋巴细胞瘤的影响及相关机制。方法将EL4淋巴细胞分为3组,分别为阴性对照组、MPT64低剂量组(10μg/ml)、MPT64高剂量组(15μg/ml)。孵育16 h后;AnnexinV-FITC染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测培养细胞上清的细胞因子水平,用实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和Western blot检测凋亡基因Fas、FasL的表达水平。结果 MPT64可以诱导EL4淋巴细胞凋亡,并呈浓度依赖性。与阴性对照组相比,白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)和转化生长因子β(transformation growth factor beta,TGF-β)分泌水平明显升高,而干扰素γ(interferon gamma,IFN-γ)的分泌水平未见明显变化。在MPT64诱导淋巴细胞凋亡的过程中,Fas基因表达升高。结论MPT64抗原能够诱导EL-4淋巴细胞凋亡,这种促凋亡作用可能与IL-4和TGF-β分泌水平的升高、Fas基因的表达升高相关。MPT64抗原可能是一种毒力因子,在结核分枝杆菌感染机体的过程中,可能通过促进淋巴细胞凋亡参与机体与结核分枝杆菌的相互作用。
- 王庆敏唐瑛刘淑鹏
- 关键词:结核分枝杆菌凋亡
- 结核分枝杆菌MPT64抗原对巨噬细胞凋亡的抑制作用被引量:4
- 2013年
- 目的探讨结核分枝杆菌MPT64抗原对RAW264.7巨噬细胞的影响及相关机制。方法将MPT64基因在大肠杆菌中表达、纯化,获得的纯化蛋白用于后续实验。将用佛波醇酯(PMA)分化的RAW264.7巨噬细胞分为对照组、卡介菌纯蛋白衍生物(BCGPPD)诱导组、BCG-PPD+MPT64共同作用组,分别给予相应的处理。孵育16 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用ELISA试剂盒检测培养细胞上清的细胞因子TNF-α及IL-10水平。结果 BCG-PPD可以诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡,BCG-PPD+MPT64组的细胞凋亡水平低于BCG-PPD组(P<0.05)。细胞因子上清检测结果表明,与对照组相比,BCG-PPD作用组的TNF-α水平升高(P<0.01),而IL-10水平无明显变化;与BCG-PPD组相比,BCG-PPD+MPT64共同孵育组的IL-10水平升高(P<0.01),而TNF-α水平无明显变化。结论 MPT64抗原可能是一种毒力因子,能够抑制BCG-PPD诱导的巨噬细胞凋亡,该作用可能是通过提高IL-10水平来实现的。
- 王庆敏雷呈祥肖安刘秋红
- 关键词:结核分枝杆菌巨噬细胞细胞凋亡