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河南省医学科技创新人才工程项目(2005001)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
董子明
王进
崔景彬
张亚卓
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相关机构:
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发文基金:
河南省医学科技创新人才工程项目
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张亚卓
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2006
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胰岛素样生长因子-1基因真核表达载体的构建
被引量:1
2006年
目的构建胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因重组逆转录病毒,为将IGF-1基因应用于神经系统疾病的治疗打下基础。方法质粒pcDNA3.1-IGF-1经EcoR I和Xho I双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建成重组逆转录病毒表达载体pLXSN-IGF-1,采用酶切及测序对重组体进行鉴定。而后脂质体转染pLXSN-IGF-1至包装细胞pA317,检测培养上清病毒滴度。结果重组真核基因表达载体pLXSN-IGF-1经EcoR I和Xho I双酶切后,得到了400 bp和6.0 kb两条带;以重组体为模板进行PCR检测,400 bp的目的基因片段呈阳性;重组体测序结果与预期结果完全一致;建立了细胞系PA317-IGF-1,其培养上清平均病毒滴度为6.5×105CFU/ml。结论成功构建了IGF-1基因重组逆转录病毒。
王进
崔景彬
张亚卓
董子明
关键词:
胰岛素样生长因子-1
逆转录病毒载体
病毒滴度
基因重组
质粒
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