徐州市科技计划项目(XF10C029)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王洁宫海滨王秀力李春梅吕茜更多>>
- 相关机构：徐州市中心医院南京大学更多>>
- 发文基金：徐州市科技计划项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心力衰竭大鼠骨髓间充质干细胞形态及功能的改变被引量：1
- 2015年
- 目的研究心力衰竭大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSC)在细胞形态、蛋白表达及细胞因子分泌能力的变化。方法本文采用部分缩窄腹主动脉法制备大鼠压力超负荷性慢性心力衰竭模型,分离和培养模型组和假手术组大鼠的BMSC,待细胞传代到第6代,观察细胞的形态和蛋白表达的变化情况。分别以1×108/L的细胞密度培养模型组和假手术组大鼠BMSC,72 h后收集上清。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测BMSC培养上清中的HGF、IGF-1、PDGF、SCF、FGF和VEGF的含量。组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果模型组BMSC的最小细胞直径、单个细胞的平均面积及单个细胞的蛋白表达量均显著低于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.01)。模型组细胞培养上清中的SCF和PDGF的浓度分别为(6.06±1.18)ng/L和(1.25±0.32)mg/L,明显低于假手术组(12.56±1.15)ng/L和(3.52±0.23)mg/L,而模型组的VEGF浓度为(652.44±83.19)ng/L,明显高于假手术组(419.97±67.85)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论心力衰竭大鼠的BMSC与健康大鼠相比,细胞形态发生显著改变,单个细胞的蛋白表达量及细胞因子SCF、PDGF的分泌能力均降低,但VEGF的分泌量上升。
- 王秀力刘颖吕茜王洁王雷宫海滨
- 关键词：腹部主动脉缩窄心力衰竭骨髓间充质干细胞
- 心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞的分化被引量：3
- 2013年
- 背景:前期研究发现,心肌细胞培养上清具有诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的能力,这可能与培养上清内的某种细胞因子或几种细胞因子有关。目的:分析大鼠心肌细胞培养上清诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞是否与心肌细胞培养上清内细胞因子含量不同有关。方法:采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞并在体外培养纯化,酶消化法分离心肌细胞,分别以1×108L-1的细胞浓度培养72 h后收集上清。用酶联免疫吸附试验技术检测心肌细胞和骨髓间充质干细胞培养上清内的肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、血小板源生长因子、干细胞因子、成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的水平。结果与结论:心肌细胞培养上清组内的胰岛素样生长因子1、血小板源生长因子和成纤维细胞生长因子水平明显高于骨髓间充质干细胞培养上清组(P<0.01),提示心肌细胞培养上清内的胰岛素样生长因子1、血小板源生长因子和成纤维细胞生长因子可能与诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞有关,其中主要的细胞因子是胰岛素样生长因子1。
- 李春梅王秀力朱海亮王洁宫海滨
- 关键词：干细胞间质干细胞血小板源性生长因子肝细胞生长因子
- 胰岛素样生长因子1诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究胰岛素样生长因子1（IGF-1）诱导骨髓间充质干细胞（BMSC）分化为心肌样细胞的能力及其机制。方法分离大鼠BMSC，并在体外培养纯化。实验分为两个部分：第一部分，IGF-1诱导BMSC分化为心肌样细胞的实验研究，分为培养基对照组（对照组）和15ng／ml的IGF-1诱导组（IGF．1组），连续培养21d，分别在第3、7、14和21天采用免疫细胞化学染色法和Westernblot法检测BMSC中磷酸化（P）IGF．1受体（R）、心肌特异性肌钙蛋白T（TNT）及肌钙蛋白I（TNI）的表达。第二部分为IGF-1R激酶阻断剂I-OMeAG538阻断IGF-1诱导BMSC向心肌样细胞分化的实验研究，分为培养基对照组（对照组）、15ng／mlIGF-1诱导组（IGF-l组）、300nmol／LI-OMeAG538阻断组（I-OMeAG538组）及300nmol／LI-OMeAG538阻断＋15ng／mlIGF-l诱导组（I-OMeAG538＋IGF-l组）。免疫细胞化学法和Westernblot法检测BMSC中TNT及TNI、MAPK和P13K信号通路的蛋白表达水平。结果IGF-1诱导BMSC分化的实验结果显示IGF-1组诱导后，TNT、TNI的表达均呈阳性，plGF-1R的表达量也明显高于对照组（上述因子均未检测到），以第14天为最高（P〈0．05）。I-OMeAG538作用BMSC3和6h后，I-OMeAG538组pERKl／2／ERKl／2比值分别为0．17±0．03和0．06±0．03，均显著低于对照组的1．00±0．05（P均〈0．05）。IGF-1组pAKT／AKT和pERKl／2ERKl／2的比值分别为1．00±0．07和1．00±0．09均显著高于对照组的0．724-0．05（P均〈0．05），而l-OMeAG538组pAKT／AKT和pERKl／2ERKl／2的比值分别为0．31±0．10和0．39±0．04均显著低于对照组的0．63±0．05（P均〈0．05）。I-ONeAG538＋IGF-1组心肌样细胞的TNT和TNI蛋白表达的灰度值分别为195．064-5．98和198．32±3．46均显著高于IGF-1组的188．70±5．35和176．10±4．96（P均〈0．05）。IGF-1组IGF诱导BMSC3、7、14和21d后，其TNT、TNI和pIGF-1R的蛋白表达水平均高于对照组，且�
- 王秀力李春梅吕茜王雷王洁宫海滨
- 关键词：间质干细胞胰岛素样生长因子I细胞分化心肌样细胞
