国家自然科学基金(30801104)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：吴文川王单松楼文晖靳大勇秦新裕更多>>
- 相关机构：复旦大学福建医科大学郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗的优化构建及体外转染研究
- 2013年
- 目的优化构建新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗。方法目的基因增加重复序列可变数目串联重复序列（VNTR），并分别插入乙型肝炎病毒（HBV）核心抗原基因（C1-144）和／或小鼠白细胞介素（IL）-18基因序列，插入真核表达载体pIRES2-EGFP，构建成优化重组质粒，酶切及测序鉴定。4种优化重组质粒分别体外转染2×10^6个293T细胞和Panc-02细胞，观察转染后48h后绿色荧光表达，评估转染效率。收集转染后的细胞，裂解后Western blot检测目的基因的表达，验证各优化重组质粒在真核细胞中的表达。结果双酶切鉴定证实了pIRES2-EGFP—A—B插入了1100bp大小片段，pIRES2-EGFP—A—C和pIRES2-EGFP—A—B—C重组质粒都插入了1200bp大小片段，分别与目的基因大小一致。在转染转染后48h后，293T和Panc-02均可见绿色荧光。Western blot检测可见在Panc-02细胞中pIRES2-EGFP-A—B质粒、pIRES2-EGFP—A—B—C质粒均可表达乙肝病毒核心抗原C1—144，pIRES2-EGFP—A—C质粒、pIRES2-EGFP—A—B-C质粒均可表达小鼠IL-18（mIL-18）。在293T细胞中，pIRES2-EGFP—A质粒、pIRES2-EGFP—A—B质粒、pIRES2-EGFP—A—C质粒、pIRES2-EGFP—A—B—C质粒均表达VNTR。结论优化构建的4个重组质粒均可在真核细胞中表达插入的目的抗原。
- 吴文川靳大勇楼文晖戎叶飞王单松秦新裕
- 关键词：胰腺癌DNA疫苗细胞转染
- 基因芯片技术在胰腺癌研究中的应用被引量：1
- 2014年
- 随着人类基因组计划的完成,基因芯片技术在近20年逐渐发展起来.它具有高通量、敏感、快速、高效的特点,是研究肿瘤发生发展的强有力工具.传统的研究方法是通过分子生物学的手段克隆1个基因,然后再用生物化学、遗传学以及生理学的手段去研究它的功能,往往需要花费大量的人力物力和时间.然而,大多数生命现象并非由单个基因所致,恰恰相反,大多与复杂交错的多个基因有关.因此,传统的研究方法就很难胜任.随着近些年的发展和日趋完善,基因芯片技术目前也已广泛用于医学各领域的研究.现对基因芯片技术在胰腺癌基础研究和临床实践中的应用作一综述.
- 林超吴文川
- 关键词：基因芯片技术胰腺癌人类基因组计划肿瘤发生发展生物化学生命现象
- 清除Treg增敏胰腺癌疫苗治疗作用的研究进展
- 2012年
- 胰腺癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，恶性程度高，预后极差。即使施行治愈性手术，多数患者术后仍较早地出现了复发和转移。为改变这种现状，近年来对胰腺癌疫苗的研究方兴末艾。
- 吴文川
- 关键词：胰腺癌癌疫苗消化道恶性肿瘤增敏恶性程度
- 肿瘤的免疫编辑与自然选择被引量：7
- 2013年
- 近年来，肿瘤的进展被视为一种微观的生态进化过程。新生肿瘤的形成，除了需克服突变细胞间的互相竞争以争夺空间和资源，互相合作以完成迁徙、形成转移灶，还需逃避免疫系统的监视。这一系列过程遵循着类似达尔文进化论中的自然选择。本文着重从自然选择的角度，对肿瘤的免疫编辑（cancer immunoediting）研究现状作一综述。
- 王枭杰吴文川
- 关键词：自然选择免疫编辑肿瘤进化论细胞间转移灶
- CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肿瘤免疫中的作用研究被引量：4
- 2011年
- CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在自身免疫耐受、免疫自稳、肿瘤免疫中发挥着重要作用,它可以抑制自身抗原或者非自身抗原如肿瘤抗原引起的免疫反应.人们对Treg细胞的免疫抑制作用已进行了相关的研究和临床应用,最新研究表明其能够诱导肿瘤特异性抗原和局部的免疫反应.此综述将讨论Treg细胞的相关表面分子及其在肿瘤免疫逃逸机制、肿瘤免疫治疗中的研究进展.
- 刘立吴文川刘保池
- 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞肿瘤免疫免疫反应
- 免疫增强型胰腺癌MUC1-VNTR—C144DNA疫苗的构建被引量：2
- 2009年
- 目的构建免疫增强型胰腺癌MUC1-VNTR—C144DNA疫苗。方法在pcDNA3．1-VNTR／Myc—his（＋）A质粒靶基因之后插入乙型肝炎病毒核心抗原C144基因，构建MUC1-VNTR—C144DNA疫苗。45只C57BL／6小鼠随机分3组，VC组接种pcDNA3．1-VNTR—C144／Myc—his（＋）A质粒，V组单纯接种pcDNA3．1-VNTR／Myc—his（＋）A质粒，C组单纯接种pcDNA3．1-C144／Myc—his（＋）A质粒。4周后加强免疫1次。结果VC组小鼠脾细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的特异性杀伤率（46．7±8．2）％显著高于V组（34．8±3．1）％和C组（12．9±1．2）％（E／T=80／1，P〈0．01）。而CTL对未经VNTR合成肽孵育的靶细胞EL4-VNTR^-杀伤率较低（P〈0．01），Vu3C6可抑制CTL对经VNTR合成肽孵育的靶细胞EIA—VNTR’的杀伤活性（P〈0．01），表明具有VC组诱生的CTL应答依然保持VNTR特异性。VC组小鼠血清抗VNTR抗体等效浓度（2810．2±308．3）mg／L高于V组（2323．5±238．3）mg／L和C组（2130．9±138．5）mg／L，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论增强型胰腺癌MUC1-VNTR—C144DNA疫苗所诱生的VNTR特异的CTL应答和抗体应答显著增强。
- 吴文川靳大勇楼文晖王单松秦新裕
- 关键词：胰腺癌核酸疫苗乙型肝炎
