国家自然科学基金(30770575)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：朱楚洪糜建红应大君周振华范文辉更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学西南医院广东医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管内皮祖细胞种植支架的研制被引量：4
- 2008年
- 目的研制一种新型内皮祖细胞(EPCs)种植支架,为防止脑血管介入术后再狭窄提供新策略。方法利用密度梯度离心法结合诱导培养法分离纯化脐血源性EPCs。一种支架表面涂布经EDC交联的胶原(A组),另一种涂布经EDC交联的胶原后再利用双官能耦联剂N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯(SPDP)与CD34抗体化学键合(B组),再将EPCs进行种植。通过共聚焦显微镜观察其生长状况。结果EPCs能很好分离纯化。支架培养7d后,A组支架上的细胞不能完全覆盖支架,呈散在分布。而B组细胞基本能覆盖支架,实现了再内皮化,生物学功能良好,且细胞数明显多于A组。结论抗体耦联胶原的方法能有效实现血管EPCs的种植,可为防止血管介入后再狭窄提供新支架选择。
- 周振华李露斯陈康宁刘国军范文辉史树贵朱楚洪糜建红
- 关键词：内皮祖细胞抗体胶原
- 锌指蛋白A20基因抑制缺氧诱导内皮细胞CD54的表达
- 2008年
- 【目的】探讨外源性锌指蛋白基因A20对缺氧诱导内皮细胞黏附分子CD54表达的影响。【方法】培养原代人脐静脉内皮细胞,将细胞分组建立缺氧模型;采用DOTAP脂质体介导pcDNA3.1EHA20质粒转染培养的内皮细胞,筛选抗G418的阳性克隆,经免疫荧光鉴定A20基因的表达;采用免疫组化和原位杂交检测内皮细胞CD54的表达。【结果】A20基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到高效表达。缺氧能诱导人内皮细胞CD54高表达,外源性A20基因能抑制75%以上由缺氧诱导的内皮细胞CD54表达,两者间相差明显(P<0.01)。【结论】外源性A20基因能够显著抑制缺氧诱导的内皮细胞活化,有效抑制CD54的表达,可能在内皮细胞缺氧损伤中具有保护作用。
- 张剑凯李国营朱楚洪糜建红应大君
- 关键词：A20基因CD54内皮细胞缺氧
- 切应力诱导间充质干细胞分化成内皮细胞的研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究绿色荧光蛋白（GFP）小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）体外分离培养及扩增及其在流体剪切力条件下向内皮细胞（EC）定向分化能力。方法选用GFP小鼠作为研究对象,分离培养骨髓间充质干细胞,并在体外进行细胞的扩增和传代。应用流体剪切力刺激方法对骨髓间充质干细胞进行诱导,并观测其对GFP小鼠骨髓间充质干细胞分化为内皮细胞的积极作用,对其结果进行免疫荧光检测,计算阳性细胞比例,统计分析。结果GFP小鼠骨髓间充质干细胞每扩增一代,细胞数量增加5-8倍。检测诱导后MSCs,结果显示在诱导3 d时出现vWF表达阳性细胞。结论GFP小鼠MSCs在体外的培养扩增能力强,MSCs在流体剪切应力的作用下可以转化成内皮细胞。
- 李立朱楚洪糜建红宋林应大君
- 关键词：骨髓间充质干细胞内皮细胞流体剪切力
- 人工锌指蛋白(ZFP)的设计及原核表达分析被引量：2
- 2008年
- 本实验通过生物信息学手段人工设计了与A20基因启动子区特定靶序列特异作用的锌指蛋白结合域。首先对A20基因启动子进行了结构及功能分析,把经过分析获取的A20启动子区的目标序列提交Scrips研究院的ZF Tools在线服务器,经序列比较,成功获取了A20启动子区特定的18bp靶序列及与这一靶序列特异性作用的锌指蛋白的氨基酸序列。进一步利用生物信息学手段对获取的锌指蛋白进行了序列特征分析及结构模建。把锌指蛋白的DNA优化序列重组于原核表达载体pTYB11上,并成功进行了原核表达。研究表明,利用生物信息学手段,人工设计特定的锌指蛋白可行,为进一步设计完整的人工转录因子,进而干预A20基因的表达奠定了基础。
- 魏勇应大君侯春丽朱楚洪崔晓萍邢艳郭洪峰
- 关键词：锌指蛋白启动子生物信息学同源模建原核表达
