广州市科技攻关项目(2003Z3-E4201)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 新精氨酸类似物对异丙肾上腺素诱导心肌细胞钙浓度改变的影响
- 2008年
- 目的探讨新精氨酸类似物对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导心肌细胞内游离钙变化的影响。方法培养乳鼠心肌细胞,白介素-6(IL-6)联合内毒素(LPS)诱导心肌细胞表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS),钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM及激光共聚焦显微镜检测精氨酸类似物对ISO诱导的心肌细胞内游离钙变化的影响。结果IL-6联合LPS可以明显诱导心肌细胞表达iNOS,增加心肌中一氧化氮(NO)浓度;新精氨酸类似物可以降低炎症因子刺激的心肌细胞中NO浓度,明显升高ISO诱导的心肌细胞内游离钙浓度。结论新精氨酸类似物可以通过抑制心肌iNOS/NO途径,提高心肌对β受体激动剂的反应。
- 孙飞吴赛珠张晓添
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶游离钙
- 精氨酸酶对异丙肾上腺素诱导心肌细胞内钙浓度的影响
- 2008年
- 目的探讨精氨酸酶对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞内游离钙浓度变化的影响及其机制。方法培养乳鼠心肌细胞,分别给予精氨酸酶抑制剂S-(2-boronoethyl)-L-cysteine(BEC)及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂vinyl-L-N-5-(1-imino-3-butenyl)-L-ornithine(L-VNIO),钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM及激光共聚焦显微镜(LSCM)检测ISO诱导的心肌细胞内游离钙浓度的变化。结果BEC明显升高心肌中NO浓度和ISO诱导的心肌细胞内钙离子浓度。L-VNIO可以逆转这一过程。结论抑制精氨酸酶能够通过nNOS/NO途径升高ISO诱导的心肌细胞内钙浓度。
- 孙飞吴赛珠张晓添
- 关键词：精氨酸酶一氧化氮一氧化氮合酶游离钙
- 硝基精氨酸-赖氨酸三肽的合成及对巨噬细胞一氧化氮合酶的影响
- 2005年
- 目的合成硝基精氨酸-赖氨酸三肽,并研究其对巨噬细胞一氧化氮(NO)产生及一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法液相合成法合成硝基精氨酸-赖氨酸三肽。脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶(iNOS),检测不同浓度的硝基精氨酸-赖氨酸三肽对巨噬细胞NO产生的抑制效果、以及对NOS活性及蛋白表达的影响。结果①硝基精氨酸-赖氨酸三肽可显著抑制LPS刺激的巨噬细胞产生NO并呈浓度依赖性。在同一浓度下,硝基精氨酸-赖氨酸三肽较NG-硝基-L-精氨酸(L-NNA)作用增强。②硝基精氨酸-赖氨酸三肽可显著降低巨噬细胞iNOS的活性,对于巨噬细胞的结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性无明显影响。③硝基精氨酸-赖氨酸三肽对于巨噬细胞内iNOS的蛋白表达无明显影响。结论硝基精氨酸-赖氨酸三肽通过抑制巨噬细胞iNOS活性而抑制NO产生,并呈剂量依赖性。
- 孙飞吴赛珠张晓添
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶合成法诱导性一氧化氮合酶结构型一氧化氮合酶
- 新型合成三肽抑制巨噬细胞精氨酸转运
- 2006年
- 目的观察新型合成三肽[Arg(NO3)-Lys(OCH3)-Arg(NO3)]对巨噬细胞株(RAW264．7)左旋-精氨酸／一氧化氮 (L-Arg／NO)途径的影响。方法培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0．5 mmol／L)加入脂多糖(LPS,1μg/L)随机分为3组 (每组n=6),分别加入双蒸水、三肽(1×10-4mol／L)、NG甲基-L-精氨酸(L-NMMA,1×10-4mol／L),对照组只含L-Arg (n=6),作用24 h后,检测亚硝酸盐(NO2-)、3H-L-Arg转运量;培养的巨噬细胞[培养液中含L-Arg(0-2 mmol／L)]加入 LPS(1 μg／L)24 h后,检测NO2-;培养的巨噬细胞(培养液中含L-Arg 0．5mmol／L)加入LPS(1μg/L)后分别加三肽[ (0-10)×10-4 mol／L]24 h后,检测NO2-、3H-L-Arg转运量。结果 LPS刺激细胞产生NO的量和L-Arg率转运分别为非刺激组的50倍和2．7倍,三肽(1×10-4mol／L)即可明显降低NO的生成及抑制L-Arg的转运(分别降低71％、67％),较 L-NMMA(1×10-4 mol／L)作用要强(P<0．05);NO的生成依赖于细胞外L-Arg,并成浓度依赖性,其米氏常数(Km):(0．162± 0．015) mmol／L、最大转运速率(Vmax):(91．2±2．3)μmol／(24 h·106cells);三肽成浓度依赖性的降低细胞L-Arg转运和 NO的生成,半数有效抑制剂量(EC50)分别为0．21×10-4mol／L、1．27×104mol／L。结论 LPS作用于巨噬细胞引起L-Arg转运增加:三肽通过抑制细胞L-Arg转运及与L-Arg竞争性结合一氧化氮合酶作用位点,影响NO的生成。
- 王辉清吴赛珠阮云军程宇宁孙飞容志毅银孟卓
- 关键词：精氨酸巨噬细胞脂多糖
- 精氨酸类似物对一氧化氮合酶的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究新精氨酸类似物对一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法脂多糖刺激巨噬细胞,检测不同浓度新精氨酸类似物对诱导型iNOS的抑制程度;胰岛素刺激脐静脉内皮细胞,检测新精氨酸类似物对于内皮细胞的iNOS的抑制作用。结果(1)新精氨酸类似物可显著抑制脂多糖刺激的巨噬细胞产生一氧化氮,并呈剂量依赖性。而对胰岛素刺激的内皮细胞一氧化氮产生无明显影响。(2)新精氨酸类似物可显著降低巨噬细胞iNOS的活性,对于巨噬细胞的结构型iNOS活性及内皮细胞的iNOS活性无明显影响。(3)新精氨酸类似物对于巨噬细胞iNOS的蛋白表达无明显影响。结论新精氨酸类似物是一种具有高度选择性的iNOS抑制剂。
- 孙飞吴赛珠张晓添刘长青
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶
