国家自然科学基金(81302357)
- 作品数：9 被引量：35H指数：3
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- 相关机构：广州医科大学南方医科大学广州医学院第二附属医院更多>>
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- 二甲双胍通过诱导G1期阻滞抑制骨肉瘤细胞增殖被引量：4
- 2014年
- 目的：检测二甲双胍对人骨肉瘤细胞株MG63增殖的影响。方法：不同浓度二甲双胍刺激MG63-MTT法检测细胞体外增殖能力：5mmol／L二甲双胍作用48h，流式细胞术检测MG63细胞周期分布．免疫印迹检测cyclinD1表达以及AMPK、AKT、S6K及s6蛋白磷酸化水平。结果：0～50mmol／L的二甲双胍对MG63细胞增殖的抑制作用，除10mmol／L和20mmol／L两组间外，其他处理组间均表现出显著性差异（P〈0．01）。5mmol／L二甲双胍诱导MG63细胞发生G1期阻滞（P〈0．01），抑制cylinD1、P-S6K1及P-s6表达，促进AMPK和AKT的磷酸化。结论：二甲双胍通过诱导细胞周期G1期阻滞．通过激活AMPK和AKT的磷酸化抑制roTOR通过抑制MG63增殖。
- 王雨辰侯敬申贾春宏白晓春赵莉
- 关键词：二甲双胍骨肉瘤细胞周期
- 急性脑梗死患者合并脑微出血的静脉溶栓治疗被引量：22
- 2014年
- 目的:探讨急性脑梗死合并脑微出血(CMB)的患者在静脉溶栓后脑微出血的变化。方法:收集2011年1月1日至2012年12月31日在广州医学院第二附属医院神经内科住院的89例急性脑梗死患者,入院时均行常规MRI加梯度回波序列T2加权检查,根据是否存在CMB分为有CMB组、无CMB组。记录两组患者的吸烟、饮酒、高血压、腔隙性脑梗死、糖尿病、白质疏松等既往史,并探讨CMB的危险因素。患者经溶栓治疗后,观察CMB数目的变化。结果:经溶栓治疗后24 h复查,有CMB组的CMB个数与治疗前相比,轻度CMB患者减少,重度CMB患者增多;性别、年龄、高血压病、腔梗、白质疏松与CMB有显著相关性。结论:性别、年龄、高血压病、腔隙性脑梗死、白质疏松是急性脑梗死发生CMB的危险因素。急性脑梗死合并CMB患者溶栓治疗增加重度CMB的发生率,增加出血转化危险。
- 林清原杨继党
- 关键词：脑梗死脑微出血静脉溶栓
- EGCG通过抑制SIRT1表达抑制鼻咽癌细胞增殖被引量：2
- 2014年
- 目的:观察不同浓度(0、10、25、50、100μmol/L)表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对鼻咽癌细胞株C666-1的增殖及凋亡的影响,明确沉默信息调节因子(SIRT)1在其中的作用。方法:不同浓度(0、10、25、50、100μmol/EGCG作用C666-1细胞24 h后或50μmol/L的EGCG作用不同时间(0,6,12,24 h),Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测其增殖情况;0、25、50、100μmol/L的EGCG作用24 h后,TUNEL法检测的细胞凋亡情况,Western blotting检测细胞内SIRT1蛋白表达情况。结果:0、10、25、50、100μmol/L的EGCG处理C666-1细胞24 h后,细胞增殖明显受到抑制,并呈剂量依赖性(P<0.05);而50μmol/L EGCG分别作用0、6、12、24 h时,12 h^24 h细胞增殖抑制明显被抑制(P<0.05)。0、25、50、100μmol/L的EGCG处理C666-1细胞24 h后,50μmol/L的EGCG即可引起明显的细胞凋亡(P<0.05),细胞内SIRT1的表达亦被明显抑制,且具有剂量依赖性(P<0.05)。结论:EGCG通过诱导鼻咽癌细胞C666-1凋亡抑制其增殖,SIRT1可能参与该过程。
- 赵莉覃媛何艳华侯敬申蔡轶
- 关键词：鼻咽癌表没食子儿茶素没食子酸酯细胞增殖
- p70/p85核糖体蛋白S6激酶1重组真核表达载体的构建及其在人乳腺癌MCF-7细胞内功能的初步鉴定
- 2014年
- 目的:构建p70核糖体蛋白S6激酶1(p70 ribosomal protein S6 kinase 1,p70 S6K1)及p85 S6K1基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,并鉴定其在人乳腺癌MCF-7细胞内的表达及功能。方法:以pRK7-HA-S6K1为模板,采用PCR扩增出目的基因片段p70 S6K1、p85 S6K1,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag构建重组表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,采用PCR、双酶切和DNA测序鉴定。将重组载体转染MCF-7细胞,24 h后采用Western blotting方法检测细胞内p70 S6K1、p85 S6K1蛋白的表达;同时向转染细胞内加入1 mmol/L H2O2处理36 h,观察p70 S6K1、p85 S6K1蛋白对H2O2诱导的细胞死亡的影响。结果:成功扩增得到p70 S6K1、p85 S6K1基因片段并构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,重组载体经PCR、双酶切鉴定均出现p70 S6K1和p85S6K1预期条带,DNA测序结果显示其全长基因阅读框完整、正确。重组载体在MCF-7细胞中高效表达flag-p70 S6K1和flag-p85S6K1,且p85 S6K1能增强H2O2诱导的细胞死亡。结论:成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1(-)-flag-p70 S6K1和pcDNA3.1(-)-flag-p85 S6K1,均能在MCF-7细胞中高效表达,且p85 S6K1能够增强H2O2诱导的细胞死亡。
- 赵莉侯敬申白晓春贾春宏
- 关键词：基因重组细胞死亡乳腺癌MCF-7细胞
- 医学院校本科生进行基础科研能力培养的意义被引量：4
- 2014年
- 随着我国科学技术的迅猛发展,生命科学领域对专业人才的需求愈加迫切,要求亦愈加严格。部分医学院校为适应目前我国对基础科研工作者的需求现状,积极调整医学与生命科学专业本科生专业设置,改善完善课程设置,在本科生中有计划的进行科研训练,对学生毕业后的选择就业去向或者进一步深造具有重要指导作用,培养具有科研能力的高素质的医学从业人员,有助于推动医疗卫生事业的发展。
- 侯敬申王伟雄王斌黄亮沈波赵莉
- 关键词：本科教育教学改革
- 阿霉素加热化疗对人肝癌细胞HHCC及HepG2的抑制作用研究
- 2014年
- 目的探讨阿霉素加热化疗对人肝癌细胞HHCC及HepG2的抑制作用。方法选择体外培养对数生长期HHCC及HepG2细胞为研究对象,采用10%胎牛血清培养液配制成细胞密度5×104/mL的单细胞悬液,接种于50mL的培养瓶中,细胞分为3组,分别进行单纯加热、单纯化疗、加热化疗处理;采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 HHCC及HepG2细胞增殖抑制率3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);加热化疗组细胞增殖抑制率明显高于单纯加热组及单纯化疗组(P<0.05);HHCC及HepG2细胞凋亡率三组间差异有统计学意义(P<0.05),加热化疗组细胞凋亡率明显高于单纯加热组及单纯化疗组(P<0.05)。结论加热化疗可明显增强阿霉素对人肝癌细胞HHCC及HepG2的增殖抑制作用,对临床治疗有借鉴意义。
- 侯敬申侯敬侠王伟雄赵莉
- 关键词：阿霉素热化疗人肝癌细胞
- Rheb突变体重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的影响。方法采用细胞内同源重组法构建携带Rheb和Rheb突变体的重组腺病毒载体pacAd5CMV-Rheb,PCR法检测病毒上清;将病毒上清感染MCF-7细胞后Western blotting(WB)检测Rheb及下游产物表达。将重组腺病毒感染血清饥饿的乳腺癌细胞MDA-MB-231并观察细胞增殖情况。结果酶切、测序及PCR表明构建的重组腺病毒载体携带Rheb和Rheb突变基因。重组腺病毒体外感染MCF-7细胞,WB检测到腺病毒感染的MCF-7细胞内Rheb蛋白表达较对照组明显增高,S6及β-actin蛋白的表达在各组间没有统计学差异。转染Rheb WT和Q64L组MCF-7细胞的P-S6表达较对照组和D60K组显著增高。无血清培养条件下,感染Rheb Q64L组的乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力较对照组及WT组强,而转染D60K组则较其他三组(EGFP、WT和Q64L组)的细胞增殖明显减弱。结论成功构建野生型Rheb和Rheb突变体重组腺病毒质粒,为体内外进一步研究Rheb基因对乳腺癌的作用奠定了基础。
- 赵莉邹镇洪叶永斌侯敬申
- 关键词：腺病毒载体MCF-7MDA-MB-231
- CXC趋化因子受体4对胆囊癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 观察CXC趋化因子受体4（CXCR4）对人胆囊癌细胞株GBC-SD增殖的影响.方法 分别用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot、流式细胞术等方法检测CXCR4在GBC-SD细胞及人脐静脉内皮细胞株ECV-304中mRNA、蛋白以及细胞表面分子的表达;设计CXCR4靶向短发卡RNA （shRNA）,并构建到pSilencer^Tm2.1-U6质粒中,转染GBC-SD细胞,噻唑蓝比色法（MTT）检测GBC-SD细胞增殖.结果 与ECV-304细胞比较,GBC-SD细胞中CXCR4 mRNA和蛋白呈明显阳性表达,而细胞表面CXCR4分子的表达也明显增高[（70.30±3.50）％与（0.76±0.11）％];与对照组GBC-SD细胞比较,转染了pSilencer^TM 2.1-U6-CXCR4 shRNA质粒的GBC-SD细胞,其CXCR4 mRNA未见明显条带,蛋白表达亦明显降低,MTT结果显示干扰CXCR4 120 h后,GBC-SD细胞吸光度值较未转染组细胞明显降低（3.19±0.16与1.63±0.23）.结论 抑制CXCR4表达可抑制胆囊癌细胞生长.
- 侯敬申王伟雄黄亮赵莉
- 关键词：CXC趋化因子受体4细胞增殖胆囊癌
- 姜黄素对鼻咽癌C666-1细胞增殖的抑制作用及其可能机制被引量：2
- 2014年
- 目的:观察姜黄素对鼻咽癌细胞株C666-1增殖及凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法:0、10、25、50及100μmol/L姜黄素作用24 h或50μmol/L姜黄素不同时间(0、6、12及24 h)后,CCK-8法检测C666-1细胞的增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blotting检测不同浓度姜黄素作用24 h后细胞内AMPK、S6K1及S6蛋白磷酸化情况。结果:与0μmol/L组比,50、100μmol/L姜黄素作用24 h后,对C666-1细胞增殖的抑制作用显著增强[(38.33±6.53)%、(21.14±5.36)%vs(100±0.00)%,均P<0.05];50μmol/L姜黄素作用6、12、24 h后,对C666-1细胞增殖的抑制作用显著增强[(49.6±5.67)%、(47.7±6.65)%、(46.86±9.4)%vs(100±0.00)%,均P<0.05]。50、100μmol/L姜黄素作用后细胞的凋亡率显著增加[(43±12.53)%、(48±8.54)%vs(2.87±1.03)%,均P<0.05],50μmol/L姜黄素作用12、24 h后,细胞凋亡率随作用时间延长而增加[(35.33±5.86)%、(47.33±13.01)%vs(4.33±3.21)%,均P<0.05]。50、100μmol/L姜黄素可促进细胞内AMPK磷酸化,抑制其下游mTOR信号通路中S6K及S6蛋白的磷酸化活化[(3.87±1.38)、(0.19±0.16)、(0.39±0.24)vs 1;(4.34±1.34)、(0.059±0.043)、(0.11±0.095)vs 1,均P<0.05]。结论:姜黄素可显著抑制鼻咽癌C666-1细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与影响AMPK、S6K1及S6蛋白磷酸化有关。
- 赵莉蔡轶何艳华覃媛
- 关键词：姜黄素鼻咽癌雷帕霉素靶蛋白增殖凋亡
