国家自然科学基金(30770535)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：王汉琴孙晓东陈龙菊王燕卢进昌更多>>
- 相关机构：太和医院湖北医药学院郧阳医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Transcriptional regulation of Pirn kinase in rat mesenchymal stem cells by shear stress and its role for proliferation
- <正>Objective:This study describes the effects of duration,magnitude and pattern of laminar shear stress (LSS) ...
- Han-qin WangXiao-dong SunXing-chun PengYa-hong YuanTie-zhu Huang
- 文献传递
- Wortmannin对表皮生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:研究PI3K抑制剂Wortmannin对表皮生长因子(EGF)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响,旨在探讨EGF诱导的VSMCs增殖和迁移的信号通路。方法:以低血清培养的VSMCs作为对照,采用细胞计数、划痕损伤实验和WesternBlotting技术,观察Wortmannin对EGF诱导的VSMCs增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响。结果:干预后24h,EGF组VSMCs增殖、迁移较对照组明显增强,同时磷酸化Akt蛋白的表达平行增高。而Wortmannin则明显抑制了VSMCs的增殖、迁移和磷酸化Akt蛋白的表达。结论:PI3K/Akt信号通路参与了EGF诱导的VSMCs增殖和迁移。
- 陈龙菊卢进昌姜铧梁江红刘志祥张正洪王汉琴
- 关键词：WORTMANNIN血管平滑肌细胞增殖迁移表皮生长因子
- STAT3介导了血小板源性生长因子BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞Pim-1表达被引量：5
- 2013年
- 目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时间刺激体外培养的VSMCs,用细胞计数法检测增殖;用re-al-time RT-PCR检测Pim-1 mRNA表达水平;Western blotting检测STAT3的活性变化;用放线菌素D(actinomycinD)、AG490(JAK特异性抑制剂)及siRNA沉默Pim-1和STAT3进行干预。结果:PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs24 h,可以诱导细胞增殖,Pim-1沉默抑制了这一过程;正常未经处理的VSMCs Pim-1 mRNA表达量较低,不同浓度PDGF-BB(10μg/L～50μg/L)作用VSMCs 1 h,Pim-1 mRNA表达明显增加,其中以20μg/L最显著;用PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs不同时间(0.5 h～4 h),可显著上调Pim-1 mRNA表达,以0.5 h最显著。用actinomycin D及AG490预处理后Pim-1 mRNA表达随之降低。PDGF-BB可激活VSMCs中磷酸化STAT3水平,AG490和转染STAT3-siRNA可抑制STAT3的磷酸化以及相应的Pim-1 mRNA表达。结论:PDGF-BB可通过Pim-1调节VSMCs增殖;STAT3可能参与了PDGF-BB诱导的VSMCs Pim-1表达。
- 孙晓东王燕王汉琴黄铁柱
- 关键词：STAT3转录因子血管平滑肌细胞血小板源性生长因子BB
- 磷酯酰肌醇3激酶抑制剂对碱性成纤维细胞生长因子诱导的平滑肌细胞增殖及迁移的影响被引量：2
- 2009年
- 目的：研究磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂Wortmannin（WT）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖、迁移及磷酸化Akt蛋白表达的影响，为探讨bFGF诱导平滑肌细胞增殖和迁移的信号通路提供实验依据。方法：采用细胞计数、划痕损伤实验和免疫印迹法，观察Wortmannin对bFGF诱导的VSMCs增殖、迁移及磷酸化Akt表达的影响。结果：干预后24h，bFGF组VSMCs增殖、迁移较对照组明显增强，同时磷酸化Akt的表达平行增高。加用Wortmannin后，明显抑制了VSMCs的增殖、迁移和磷酸化Akt的表达。结论：bFGF诱导的VSMCs增殖和迁移可能是通过PI3K／Akt信号通路发挥作用。
- 陈龙菊蒋飞卢进昌杞少华王配军王汉琴
- 关键词：增殖迁移蛋白激酶B碱性成纤维细胞生长因子
- Bmi-1基因表达与血管内皮细胞衰老的相关性被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨Bmi-1基因与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的相关性,为研究血管内皮细胞衰老的分子机制打下基础。方法:采用细胞传代及肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激方法模拟内皮细胞衰老,用SA-β-半乳糖酐酶(SA-β-gal)染色检测衰老,Real-time PCR检测P16INK4A及Bmi-1基因的表达变化。结果:随着细胞传代次数的增加,HUVECs体积变大,细胞浆内颗粒和空泡增多,β-gal阳性染色率显著增多,P16INK4A mRNA表达逐渐升高(第6、8代与第1代相比P<0.05),同时Bmi-1 mRNA表达下降(第2、4、6、8代与第1代相比均P<0.05)。TNF-α(10 ng/mL)孵育HUVECs 48 h,与对照组相比,P16INK4A mRNA表达明显增加(P<0.05),Bmi-1 mRNA表达下降(P<0.05)。结论:Bmi-1在衰老内皮细胞中表达显著降低,提示其在血管内皮细胞衰老发生发展中起重要作用。
- 王燕孙晓东王珺王汉琴
- 关键词：BMI-1内皮细胞衰老REAL-TIMEPCR
- 流体剪切应力对大鼠骨髓间充质干细胞MT1-MMP基因表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨流体剪切应力对大鼠骨髓间充质干细胞(ratbonemarrow-derived mesenchy malstem cells,rMSCs)中膜型基质金属蛋白酶1(Membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)基因表达的影响,为阐明应力诱导rMSCs分化的分子机制提供一些实验依据。方法应用平行平板流动腔系统,给rMSCs施加不同大小和不同加载时间的层流剪切应力,用real-time PCR检测MT1-MMP基因mRNA的表达水平。结果 5,15,30 dynes/cm2剪切应力均能刺激rMSCs的MT1-MMP mRNA表达,且其作用呈时间依赖和强度依赖。p38抑制剂(SB202190)可以明显抑制这种作用,而PI3K抑制剂(wortmannin)却增强了这种效果。结论流体剪切应力可诱导rMSCs的MT1-MMP基因表达,其表达量与刺激时间和剪切应力的强度密切相关,这种作用可能通过p38MAPK和PI3K/Akt信号通路。
- 唐杰孙晓东袁雅红李瑞明彭兴春王汉琴
- 关键词：间充质干细胞膜型基质金属蛋白酶1剪切应力
- 褪黑素对人神经胶质瘤DBTRG细胞Bmi-1基因表达的影响
- 2015年
- 目的:观察褪黑素是否抑制DBTRG细胞增殖;DBTRG细胞中Bmi-1基因的表达是否受到褪黑素的影响。方法:用不同浓度的褪黑素刺激体外培养的人神经胶质瘤细胞系DBTRG细胞,MTT法检测各组细胞的活性,显微成像系统对各组细胞进行拍照,观察细胞形态的变化;运用Real-time RT-PCR检测癌基因Bmi-1的表达水平,Western-blot检测Bmi-1的蛋白水平变化。结果:⑴使用药理浓度的褪黑素(0.5、1.0、2.0 mmol/L)可抑制DBTRG细胞增殖,且随作用时间延长抑制效果越明显。⑵未经处理的DBTRG细胞Bmi-1 mRNA水平很高,经褪黑素刺激后DBTRG细胞中Bmi-1 mRNA明显下降,并有浓度依赖。⑶经褪黑素刺激后DBTRG细胞中Bmi-1的蛋白水平明显降低。结论:褪黑素可能通过调低DBTRG细胞中癌基因Bmi-1的表达来抑制DBTRG细胞增殖。
- 孙晓东王汉琴王燕桑明
- 关键词：褪黑素BMI-1增殖神经胶质瘤
- 剪应力对大鼠骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶-9基因表达的影响被引量：3
- 2010年
- 探讨力学因素对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达的影响及可能的信号机制。体外分离培养大鼠骨髓MSCs;利用平行平板流动腔力学加载装置,对细胞进行低(5 dyne/cm2)、中(15dyne/cm2)和高(30 dyne/cm2)不同剪应力的刺激,采用RT-PCR技术分析MMP-9基因的表达;利用Wortmannin(PI3K特异性抑制剂)、SB202190(P38MAPK特异性抑制剂)和PD98059(ERK1/2MAPK特异性抑制剂)信号阻断剂探讨力学信号传导途径。结果显示:(1)MSCs在未受力状态下MMP-9基因的表达较弱,15 dyne/cm2剪应力作用2 h表达即明显增强,24 h达高峰,呈时间依赖;(2)低、中和高剪应力分别刺激2 h,均可使MSCs MMP-9基因表达增强,其中15 dyne/cm2时最强;(3)用三种信号通路的抑制剂预处理后,SB202190组MMP-9基因表达明显被抑制。以上结果表明:剪应力可诱导MSCs中MMP-9基因表达,其表达量与刺激时间和剪应力的强度密切相关,其中p38MAPK信号通路起关键作用。
- 陈龙菊孙晓东唐杰丁妍李静李文春龚坚王汉琴
- 关键词：剪应力间充质干细胞基质金属蛋白酶力学信号
