河南省高校杰出科研人才创新工程基金(2005KYCX008)
- 作品数：3 被引量：18H指数：1
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- 相关机构：河南科技学院河南省动物免疫学重点实验室河南省农业科学院更多>>
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- 鸡传染性法氏囊病毒河南Xin-1株VP2基因的克隆与鉴定
- 2006年
- 应用反转录(RT-PCR)技术从河南传染性法式囊发病鸡中总RNA克隆出1461bp的VP2基因,并将其克隆于pGEM-T载体,筛选并构建了pT-VP2克隆载体。序列分析表明,该VP2基因及推导氨基酸序列与日本和欧洲超强毒株序列有较高的同源性,特征性氨基酸变异相似,进化分析也表明Xin-1毒株与欧洲超强毒株UK661和日本超强毒株OKYM位于同一进化分支,提示Xin-1株病毒可能为超强毒株。
- 乔宏兴王选年席俊王丽
- 关键词：VP2基因克隆
- IBDV VP3结构蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定
- 本研究应用RT-PCR技术从鸡IBDV总RNA中克隆出893bp的VP3基因,并将其进一步克隆于pET28a载体T7启动子的下游,构建了pETVP3原核表达载体。经IPTG诱导,在其宿主菌BL21(DE3)中成功表达了3...
- 王选年张改平席俊保银梅唐海蓉李敬玺王新华
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP3蛋白抗原性
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的原核表达及其B细胞抗原表位鉴定被引量：1
- 2009年
- 为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP3蛋白中的B细胞抗原表位,本研究将IBDV的VP3基因亚克隆于pET-28a中,构建了表达重组质粒pETVP3,经IPTG诱导在E. coli BL21(DE3)中表达了重组蛋白(rVP3)。Western blot鉴定表明,rVP3能被IBDV抗血清特异性识别。同时,根据IBDVVP3的氨基酸序列,合成覆盖VP3全序列的重叠多肽,并与载体蛋白BSA藕联制备多肽人工结合抗原。Peptide-ELISA和Dot-ELISA检测结果表明VP3中有2个线性表位可以被已制备的单克隆抗体(MAb)识别,即728PRDWDRLPYLNL739和982PKPKPKPNAPTQ993;Dot-ELISA结果显示,在VP3中还存在另外4个线性多克隆抗体识别位点:818LANAPQAGSKSQRA831,851QREKD TRISKKMETMGIYFATP872,876ALNGHRGPSPGQLKYWQNTREI897和961QMKDLLLTAMEMK973。这些抗原表位的鉴定为开发IBD表位疫苗奠定了基础。
- 赵坤郑玉姝赵德明赵朴赵恒章常新耀王选年
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒VP3蛋白原核表达B细胞抗原表位
- IBDV VP3结构蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定被引量：18
- 2005年
- 应用RT-PCR技术从鸡IBDV总RNA中克隆出893bp的VP3基因,并将其进一步克隆于pET-28a载体T7启动子的下游,构建了pETVP3原核表达载体。经IPTG诱导,在其宿主菌BL21(DE3)中成功表达了35.5,33kDa的鸡IBDVVP3蛋白。经SDS-PAGE和Westernblotting分析,VP3表达产物以包涵体形式存在,并与鸡IBDV抗血清特异性反应。
- 张改平席俊王选年乔宏兴张华王丽郭军庆
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP3蛋白抗原性
