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TP17蛋白的重组表达及其在梅毒血清学诊断中的初步应用被引量：1: 2013年; 目的通过基因工程技术获得梅毒重组蛋白TP17,并探索其在梅毒血清学诊断中的初步应用。方法以PCR扩增获得TP17基因,构建pET28b-TP17原核表达载体,将其转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,重组蛋白经镍柱纯化后,以飞行时间质谱和免疫印迹法进行鉴定。建立基于TP17的ELISA间接法,通过检测临床患者的血清标本,评价其与化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测符合率。结果成功构建了原核表达载体pET28b-TP17,重组蛋白TP17以包涵体形式存在,分子量约20kD。质谱和免疫印迹分析表明重组蛋白为梅毒蛋白TP17,并且能够与梅毒阳性血清发生特异性反应。基于TP17的ELISA法与CMIA法和TPPA法的符合率均为99.2%(125/126),3种方法检测梅毒特异性抗体的差异无统计学意义。结论基因工程技术获得的重组蛋白TP17能够与梅毒阳性血清发生特异性反应,有良好的临床应用前景。; 俞辉林勇平张婷侯剑辉何丽斯刘忠民; 关键词：梅毒基因工程酶联免疫吸附试验

化学发光微粒子免疫分析法筛查梅毒螺旋体特异性抗体的临床研究被引量：12: 2014年; 目的：用化学发光微粒子免疫分析法（CM IA ）联合梅毒螺旋体明胶凝集试验（T PPA ）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测梅毒抗体（TP-Ab），探讨CMIA在筛查梅毒螺旋体特异性抗体中的临床应用价值。方法采用CMIA对住院和门诊患者进行TP-Ab筛查，阳性标本再进行TPPA和TRUST 的检测，对比分析3种检测方法的检验结果的符合率。结果25030例血清标本经CM IA筛查共检出T P-Ab阳性732例，检出率为2．9％。以TPPA和TRUST对阳性标本进行联合检测的阳性检出率分别为78．7％、37．2％。以 TPPA为标准参考方法， CM IA S/CO在1～＜9的阳性符合率为29．7％～90．1％，S/CO≥9的阳性符合率为100．0％。结论 CM IA可取代传统的非密螺旋体抗原血清试验用于高通量梅毒抗体的筛查。; 范婷婷张婷欧阳立杰万舒婷; 关键词：梅毒螺旋体特异性抗体化学发光微粒子免疫分析梅毒螺旋体明胶凝集试验甲苯胺红不加热血清试验

自动化初筛检测梅毒螺旋体抗体流程的改进被引量：2: 2014年; 目的对梅毒血清学新筛查模式下出现的不一致结果进行分析和评价。方法用自动化的化学发光微粒子免疫技术(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体,S/CO≥1的标本再用甲苯胺红试验(TRUST)检测梅毒螺旋体非特异性抗体和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测特异性抗体,若两种方法检测结果均为阴性,再选用目前被认为"金标准"之一的荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)进行Ig M和Ig G测定确认,并对患者进行随访复查。结果采用CMIA检测28 640例血清标本,阳性率为3.1%。429例CMIA检测S/CO≥1的标本中有70例(16.3%)结果为TRUST(-)TPPA(-),其S/CO值均<15。对70例CMIA(S/CO≥1)TRUST(-)TPPA(-)标本再用FTA-ABS进行Ig G和Ig M检测,阳性率为47.1%。对45例CMIA(S/CO≥1)TRUST(-)TPPA(-)患者进行了血清学随访复查,其中有8例(17.8%)CMIA结果转变为S/CO<1;有2例(4.4%)标本TPPA转为阳性。结论 CMIA初筛检测梅毒螺旋体抗体存在假阳性;对于CMIA方法 S/CO≥1、TRUST(-)和TPPA(-)的患者,建议可采用其他特异性试验测定确认和随访复查,改进目前的初筛检测流程。; 张婷林勇平范婷婷张东梅; 关键词：梅毒

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广东省医学科学技术研究基金(A2012246)