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Synthesis and biological characterization of the analogs of Huwentoxin-IV,a neuronal TTX-sensitive sodium channel Inhibitor: Huwentoxin-Ⅳ(HWTX-Ⅳ) is a polypeptide neurotoxin isolated from the venom of the Chinese tarantula Ornithoctonu...; Meichun DengXuan LuoLiping JiangHanchun Chen; 文献传递

Purification and functional characterization of Jingzhaotoxin-X,a Kv4 potassium channel modifier from the venom of the spider Chilobrachys jingzhao: ＜正＞Chinese tarantula Chilobrachys jingzhao is one of the largest venomous spiders spread in the south of China...; Meichun DengXuan LuoLiping JiangZhonghua LiuXiongzhi ZengHanchun Chen; 文献传递

Thr28突变对虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ钠通道活性的影响: 2013年; 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ(HWTX-Ⅳ)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化到的一种新型多肽类神经毒素,能明显抑制表达于大鼠背根神经节细胞的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道.为了更好地研究该毒素的结构与功能之间的关系,采用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成法合成了用谷氨酸(Glu)替代HWTX-Ⅳ第28位苏氨酸残基的突变体T28D-HWTX-Ⅳ,线性多肽合成产物经反相高效液相色谱(HPLC)分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物采用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)技术鉴定分子质量,通过全细胞膜片钳电生理技术测定其电压门控钠通道药理学活性.当第28位Thr残基被Glu取代后,突变体T28D-HWTX-Ⅳ对表达于大鼠DRG细胞膜上的TTX-S钠通道的IC50值约为362 nmol/L,对TTX-S钠通道的抑制活性比天然HWTX-Ⅳ(IC50值=30 nmol/L)下降了约12倍,显示第28位的Thr残基是HWTX-Ⅳ与TTX-S型钠通道相互作用的关键活性残基.目前的研究为进一步探索HWTX-Ⅳ的结构与功能关系及新型镇痛药物的研发奠定了基础.; 邓梅春罗旋陈汉春王军梁宋平; 关键词：固相多肽合成氧化复性钠通道

重叠法联合长引物法构建具有HA标签的DJ-1 L166P突变体: 2014年; 目的通过构建具有HA标签的DJ-1 L166P突变体(DJ-1 L166P-HA),建立一种快速构建具有标签的突变体的方法——重叠法联合长引物法。方法 PCR分别扩增DJ-1的N端和C端。扩增C端的反向引物DJ-1-HA-R包含HA标签的编码序列,是具有60个核苷酸的长引物。然后,DJ-1的N端和C端重叠延伸获得DJ-1 L166P-HA全长。最后,克隆DJ-1 L166P-HA至质粒pcDNA3.1(+)。结果只需一次连接反应,成功地构建了具有HA标签的DJ-1 L166P突变体的重组质粒pcDNA3.1(+)-DJ-1 L166P-HA。将该重组质粒转染HEK293细胞后,DJ-1 L166P-HA融合蛋白质成功表达。结论重叠法联合长引物法具有简便、快捷,易掌握等特点,具有良好的应用前景。; 马幸邓梅春陈汉春朱飞舟; 关键词：基因克隆定点突变 DJ-1 帕金森病

Huwentoxin-XVI,a specific N-type calcium channel blocker from tarantula venom,produces dose-dependent antinociception in rats: <正>N-type calcium channels play important roles in the control of neurotransmission release.Their selective bl...; Meichun DengYuanyuan WuTianfu CaiZhenghua SunHanchun ChenYucheng XiaoSongping Liang; 文献传递

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国家自然科学基金(31100764)