教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-07-0807)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：曹云鹤陈轶群李志民马威沈志娜更多>>
- 相关机构：中国农业大学哈尔滨师范大学中国生物技术发展中心更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”动物营养学国家重点实验室开放课题基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- β-甘露聚糖酶研究进展被引量：6
- 2010年
- β-甘露聚糖酶是水解以β-1,4-D-吡喃甘露糖为主链的甘露寡糖、甘露多糖的内切水解酶。β-甘露聚糖酶能够消除β-甘露聚糖的抗营养作用,在动物饲粮中添加β-甘露聚糖酶能够促进饲料转化效率、提高机体免疫机能。本文从β-甘露聚糖酶的来源、提纯方法、酶学性质、作用机理及应用等方面,对β-甘露聚糖酶做一简要介绍。
- 崔栩曹云鹤李瑞国
- 关键词：Β-甘露聚糖酶酶学性质
- 枯草芽孢杆菌MA139β-甘露糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究
- β-甘露聚糖主要存在于植物种子中,在豆科植物中的含量约占1.3%～1.6%。很多研究表明,β- 甘露聚糖能够增加动物消化道内食糜黏度,阻碍消化酶与营养物质接触,从而产生抗营养作用,对动物生产性能产生负面影响。β-甘露聚糖...
- 曹云鹤乔家运
- 关键词：枯草芽胞杆菌毕赤酵母
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达被引量：8
- 2010年
- 目的:研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株。方法与结果:将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139β-甘露聚糖酶基因用EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切,克隆到诱导型表达载体pPICzαA中α因子信号肽编码序列的下游,转化大肠杆菌筛选重组质粒,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,经Zeocin筛选,获得重组表达菌株X-33/mann。将重组菌株在10L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养,甲醇诱导72h发酵活力达到2100U/mL。重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适催化pH值为6.0。结论:枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为饲料添加剂的潜能。
- 马威沈志娜陈轶群李志民曹云鹤
- 关键词：Β-甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌毕赤酵母分泌表达
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶的定向进化及其在毕赤酵母中的表达
- 本试验旨在通过体外分子定向进化技术,提高野生型α-半乳糖苷酶的酶活.在前期研究中,本实验室从扬奇青霉中成功克隆到1个新的α-半乳糖苷酶,但该酶的野生型酶活不高,发酵活力仅为254U/ml.本试验中,利用易错PCR和DNA...
- 陈轶群曹云鹤
- 关键词：定向进化Α-半乳糖苷酶毕赤酵母
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶的定向进化及其在毕赤酵母中的表达
- 本试验旨在通过体外分子定向进化技术,提高野生型α-半乳糖苷酶的酶活。在前期研究中,本实验室从扬奇青霉中成功克隆到1个新的α-半乳糖苷酶,但该酶的野生型酶活不高,发酵活力仅为254U/ml。本试验中,利用易错PCR和DNA...
- 陈轶群曹云鹤
- 关键词：定向进化Α-半乳糖苷酶毕赤酵母
- 硫色曲霉β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的组成型分泌表达被引量：4
- 2009年
- 目的:构建硫色曲霉β-甘露聚糖酶的毕赤酵母组成型分泌表达菌株,研究重组菌株的产酶水平。方法:EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切质粒pPIC-mann-opt,琼脂糖凝胶电泳、回收目的基因片段后,与组成型毕赤酵母表达载体pGAPzαA连接,转化大肠杆菌,经筛选获得含有pGAP-mann-opt的重组克隆;提取pGAP-mann-opt,用限制性内切酶BspHⅠ线性化后,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,进行Zeocin抗性筛选和PCR鉴定。结果:获得了重组菌株,重组菌株在YPD培养基中摇瓶发酵24h,上清液酶活达到343U/mL,产酶蛋白约为1.0mg/mL。结论:构建的硫色曲霉β-甘露聚糖酶组成型表达菌株具有较好的应用前景。
- 李松瑜陈小玲王军军曹云鹤董冰
- 关键词：Β-甘露聚糖酶毕赤酵母组成型表达
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶agl1基因在大肠杆菌中的表达与纯化研究
- 2009年
- 提取扬奇青霉总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增α-半乳糖苷酶agl1基因的编码区DNA序列,连接到原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点,获得重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,通过IPTG诱导获得agl1基因的特异性表达。结果表明:8mol/L尿素变性处理后的重组蛋白,经过Ni2+亲和柱纯化,SDS-PAGE检测该重组蛋白分子量约82ku,与预测结果相符。纯化的酶蛋白依次经过6、4、2mol/L和0mol/L尿素梯度透析复性后,α-半乳糖苷酶酶活为0.4U/mL。
- 张波陈轶群李志民李一航曹云鹤
- 关键词：Α-半乳糖苷酶基因表达蛋白纯化
