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猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立被引量：2: 2010年; 用机械刮取小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法，采用新生未吮乳仔猪小肠组织，成功地分离了猪小肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells，IEC）且在体外培养传代，并采用碱性磷酸酶和角蛋白免疫学试验鉴定，结果表明：体外培养的猪IEC在DMEM—F12培养基中，细胞在1～2d贴壁，5～6d形成细胞克隆，9～11d融合成片；碱性磷酸酶和生物素标记的细胞角蛋白抗体鉴定结果显示90％培养的细胞为阳性，分别从生化的角度证明和细胞生物学角度鉴定了所培养的细胞为IEC。; 职爱民左建军黄志毅邹仕庚冯定远; 关键词：原代培养

苦味酸法检测猪骨骼肌肌酸和肌酐的含量被引量：2: 2010年; 为测定猪骨骼肌中肌酸和肌酐含量,采用碱性苦味酸法并进行适当改良建立了一个适宜的反应体系。结果:采用pH值12.0磷酸缓冲溶液配制的碱性苦味酸反应液测定肌酐含量所获得标准曲线的线性关系最好,y=0.0218x+0.0228(x:肌酐浓度;y:OD490nm),相关系数R2为0.9978。以此法测定了肌酐和肌酸平均回收率,分别为99.33%和93.38%。蓝塘猪、大花白猪和长白猪背最长肌(n=8)中肌酐含量变异系数为46.4%,6.8%和20.7%,肌酸含量变异系数分别为13.57%,12.70%和19.47%。蓝塘猪背最长肌肌酸含量显著高于大花白和长白猪(P<0.05),肌酐含量分别比大花白和长白猪高18.92%(P<0.05)和12.82%(P>0.05),肌酐和肌酸含量比值显著高于长白猪和大花白猪(P<0.05)。由此表明,苦味酸法可用于猪骨骼肌肌酐和肌酸含量测定,蓝塘猪骨骼肌肌酸代谢与大花白猪和长白猪可能存在较大差异。; 代发文黄升科左建军冯定远叶慧曹庆云钟锐钦陆映升; 关键词：碱性苦味酸肌酸肌酐骨骼肌

猪肠上皮细胞分离(冷消化)及原代培养方法的建立: 本试验拟采用冷消化法(4℃),建立猪小肠上皮细胞的原代培养方法,为从体外直接研究猪小肠上皮细胞的生物学特征,进一步研究营养物质吸收的细胞学过程及分子调控机制奠定基础。试验选取刚出生(未吮乳)的仔猪,颈动脉放血处死,无菌条...; 邹仕庚叶慧黄志毅职爱民颜惜玲冯定远; 关键词：原代培养上皮细胞; 文献传递

猪肠道钠氢交换载体NHE2cDNA的分子克隆: 本试验的目的是对猪肠道钠氢交换载体 NHE2基因序列进行克隆,旨在为开展钠氢交换载体在肠道的基因表达及其作用的相关研究工作提供基础。试验根据 GenBank 中的部分序列(AF184171)设计引物,采用 RACE 结合...; 邹仕庚黄志毅左建军曹庆云代发文冯定远; 关键词：克隆肠道; 文献传递

猪肠道寡肽转运载体和钠氢交换载体mRNA表达的发育模式: 本试验目的是研究不同品种猪寡肽转运载体(PepT1)和钠氢交换载体(NHE2和 NHE3)mRNA 在肠道中表达的发育性变化,为不同品种猪肠道寡肽吸收的差异提供一定的理论基础。试验选取断奶重无显著差异的蓝塘仔猪50头(2...; 邹仕庚职爱民左建军颜惜玲曹庆云冯定远; 关键词：发育性表达肠道; 文献传递

胰岛素和丁酸钠对寡肽转运载体及钠氢交换载体mRNA表达的影响: 本试验旨在研究胰岛素和丁酸钠对猪肠道肠黏膜上皮细胞的寡肽转运载体和钠氢交换载体 mRNA 表达的影响。试验采用本试验室建立的方法进行猪肠上皮细胞分离(冷消化)及原代培养。胰岛素浓度共设置0、1μg/mL、5μg/mL 和...; 邹仕庚叶慧职爱民黄志毅曹庆云冯定远; 关键词：胰岛素丁酸钠肠黏膜上皮细胞; 文献传递

猪肠道寡肽转运载体及钠氢交换载体mRNA表达的肠段特异性: 本试验以长白猪为研究对象,旨在从基因的 mRNA 水平探讨 PepT1、NHE2和 NHE3在猪肠道十二指肠、空肠、回肠和结肠表达的肠段特异性,为寡肽转运载体及钠氢交换载体在猪肠道营养中的作用提供理论依据。试验选取2～3...; 邹仕庚黄志毅左建军董泽敏叶慧冯定远; 关键词：肠道; 文献传递

乳酸菌对猪肠道寡肽转运载体和钠氢交换载体mRNA表达的影响: 本研究选用乳酸菌作为肠道营养的调控因子,从分子水平研究乳酸菌对肠道寡肽转运载体及钠氢交换载体 mRNA 表达的影响,为进一步深入了解乳酸菌在猪肠道中的作用机理提供依据。本研究选用乳酸菌作为肠道营养的调控因子,从分子水平来...; 邹仕庚左建军职爱民叶慧董泽敏冯定远; 关键词：乳酸菌肠道; 文献传递

丁酸钠对体外培养猪肠黏膜上皮细胞寡肽转运载体及钠氢交换载体mRNA表达的影响被引量：5: 2010年; 为探讨丁酸钠对肠道寡肽转运载体(PepT1)及钠氢交换载体(NHE2、NHE3)mRNA表达丰度的调控,取刚出生未吮乳的仔猪小肠黏膜组织,建立猪小肠上皮细胞(IEC)分离及原代培养方法。分别用0,2,4,8 mmol/L的丁酸钠处理体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞96 h后,提取细胞总RNA,以18S rRNA为内标基因,用实时荧光定量RT-PCR法(SYBR GreenⅠ试剂盒)检测PepT1、NHE2及NHE3 mRNA在不同浓度丁酸钠处理细胞中的表达丰度。结果表明,体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞用丁酸钠处理96 h后,PepT1和NHE2 mRNA的表达丰度均显著增加(P<0.05),且呈现剂量依赖效应;NHE3 mRNA表达丰度的剂量效应不明显,只有在高浓度丁酸钠(8 mmol/L)组时才显著高于对照组(P<0.05)。; 邹仕庚冯定远陈峰谭会泽黄志毅左建军职爱民叶慧; 关键词：肠黏膜上皮细胞丁酸钠

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国家教育部博士点基金(20070564014)